刘朵朵
- 作品数：5 被引量：35H指数：3
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 2014-2015年广州759例儿童肠道病毒感染病原谱调查被引量：21
- 2017年
- 目的调查2014-2015年我院759例儿童感染肠道病毒血清型的分布,了解广州地区肠道病毒(enterovirus,EV)病原谱。方法采集手足口病等疑似肠道病毒感染患儿肛拭子标本,采用荧光逆转录多聚酶链反应法(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测通用型、肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)柯萨奇病毒A组16型(coxsackie virus A group 16,CA16)核酸,巢式PCR法扩增VP1基因测序分型。结果 1 060例疑似感染者检出759例EV阳性(检出率71.6%);两年均检出11种血清型,2014年CA16、EV71、CA4、CA10和CA6位列前五位,CA16和EV71占77.1%;2015年CA6、EV71、CA10、CA16和CA2列前五位,CA6占51.7%;性别比为1.8~5.3;感染以<3岁儿童为主(60.1%,456/759);全年均可检出,4~7月达高峰,5月CA16、EV71、CA10和CA2达高峰,7月CA6达高峰。由于病原谱不同,2015年病情普遍较2014年轻,两年均无死亡病例。EV71感染重症病例比率最高(12.7%),CA16、CA10、CA4和CA6偶见重症病例。结论广州主要流行十余种肠道病毒,两年病原谱不同,大部分感染引起疾病较轻。
- 赵崇泉郭勇晖沈永棋陈满君刘朵朵余楠
- 关键词：肠道病毒属聚合酶链反应手足口病
- 儿童细菌性脑膜炎95例病原菌分布和预后分析被引量：9
- 2016年
- 目的了解儿童细菌性脑膜炎(BM)病原菌分布、细菌耐药性、临床特征和预后。方法回顾分析2011年1月至2015年7月期间住院治疗的病原体明确的BM患儿的临床资料。按出院时结局将患儿分为结局良好和结局不良组。分析比较各组患儿的病原菌分布、细菌耐药性、临床特征及预后。结果共纳入95例病原体明确的BM患儿,其中69例(72.6%)为革兰阳性菌,以肺炎链球菌(43例,45.3%)占首位;26例为革兰阴性菌(27.4%),以大肠埃希菌(13例,13.7%)占首位。肺炎链球菌和大肠埃希菌对青霉素的耐药率均超过了50%。BM患儿神经系统并发症包括硬膜下积液、脑积水、脑实质损伤,以及听力和视力损伤等。多元logistic回归分析显示,意识障碍、昏迷、脑脊液葡萄糖水平低下是BM患儿出院时不良结局的独立危险因素。结论儿童BM的病原体以肺炎链球菌和大肠埃希菌为主,对青霉素的耐药率高。BM患儿可出现不同程度的神经系统后遗症,意识改变和异常以及脑脊液葡萄糖水平低下提示患儿出院时不良结局。
- 彭琼玲吴渚刘朵朵陶少华
- 关键词：细菌性脑膜炎病原体预后儿童
- 探究黄热病毒NS1蛋白在感染早期的诊断价值被引量：1
- 2018年
- 为了探讨黄热病毒（Yellow fever virus,YFV）非结构蛋白1（Nonstructural protein 1,NS1）在感染早期的诊断价值。颅内注射YFV-17D感染乳鼠,每日处死1窝,收集抗凝血。Vero细胞和C6/36细胞感染YFV-17D病毒后,每隔12h收集培养上清。分别采用荧光定量PCR和基于YFV NS1多克隆抗体的双抗体夹心酶联免疫（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）方法检测感染后乳鼠血液、C6/36和Vero细胞上清中YFV的扩增情况和NS1蛋白的分泌规律。乳鼠感染YFV-17D后第2d在血清中即可检测到YFV NS1,第3d血液中检测到YFV核酸。敏感细胞株在感染YFV-17D后第36h培养上清中可检测到YFV NS1,而48h后才能检测到YFV核酸。YFV NS1蛋白具有作为YFV感染早期的诊断靶标的潜在价值。
- 刘朵朵陈月任瑞文郭勇晖温坤余楠
- 关键词：多克隆抗体
- 肠道病毒5’-非翻译区测序分型的应用评估被引量：3
- 2018年
- 目的评估5’-非翻译区（5’-untranslated region，5’-UTR）扩增测序法对临床标本直接进行肠道病毒（enterovirus，EV）血清型分型的价值。方法收集实时荧光聚合酶链反应（real-time PCR）检测EV通用型核酸为阳性的肛拭518份、鼻拭148份，采用5’-UTR区逆转录PCR（reverse transcription PCR，RT—PCR）对标本中的EV进行扩增、测序、比对及血清型分型，与VP1（viral protein1）区简并引物巢式PCR测序分型方法比较，两者不一致的标本经EV血清型特异性RT-PCR验证。结果666份EV通用型核酸为阳性的标本，5’-UTR和VP1区各分型成功553例（83．0％）和318例（47．7％），P〈0．001；以VP1法为参考，对肛拭中主要检出的血清型CoxA6（217例）、CoxA16（88例）、EVA71（40例）、CoxA10（28例）和CoxA4（27例），5’-UTR法敏感度（57．1％～100％）、特异度（67．4％～98．1％）以及方法一致性（kappa值0．188～0．847），均因血清型而异；对鼻拭中主要检出的血清型EVD68（15例），5’-UTR法敏感度100％，特异度91．1％，一致性差（kappa值0．217）。分型不一致标本，经CoxA6、CoxA16、EVA71、CoxA10和EVD68型特异性RT—PCR验证，大部分得以确认。以VP1法联合型特异性RT—PCR法为参考，5’-UTR法的敏感度和特异性以及与参考方法的一致性均提高。结论5’-UTR对肠道病毒的分型的敏感度和特异度因血清型而异，应用时应根据研究目的综合考虑。
- 唐诗欢谢争华刘朵朵袁颖陈满君范笑地丁细霞余楠
- 关键词：肠道病毒逆转录-聚合酶链式反应测序
- 黄热病毒NS1蛋白的制备及免疫原性鉴定被引量：1
- 2018年
- 目的原核系统克隆表达黄热病毒(yellow fever virus,YFV)非结构蛋白1(nonstructural protein 1,NS1),鉴定其免疫原性。方法以YFV-17D疫苗株为模板,常规分子生物学方法构建pQE30-YFV NS1表达载体,原核表达纯化YFVNS1重组蛋白;免疫印记、免疫荧光和酶联免疫吸附实验验证其免疫原性。结果成功构建重组质粒pQE30-YFV NS1,制备纯化可溶性YFV NS1蛋白;该重组YFV NS1蛋白与登革病毒、黄热病毒、乙脑病毒、西尼罗河病毒免疫小鼠腹水及寨卡病毒NS1、YFV NS1蛋白免疫小鼠血清均发生反应,重组YFV NS1蛋白免疫小鼠血清与YFV感染细胞超声上清也发生反应。结论获得高纯度YFV NS1重组蛋白,且具有较好的免疫原性,含天然NS1蛋白表位,为基于NS1黄热病毒早期抗原诊断方法和蛋白功能研究奠定基础。
- 刘朵朵任瑞文张培李春缘余楠刘乐斌陈荣华陈月
- 关键词：黄热病毒免疫原性
