田媛媛
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
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- 逆转录病毒感染法对RP患者人体细胞向iPS细胞和iPS—RPE细胞诱导分化的研究
- 2016年
- 背景视网膜色素上皮（RPE）细胞移植是目前人类尝试治疗视网膜色素变性（RP）的主要手段。诱导多能干细胞（iPSCs）将成为移植细胞的一个重要来源，人胚胎干细胞（hESCs）可以无限期地自我更新和分化，是RPE细胞移植的重要供体来源。此外，iPS-RPE细胞为患者自身细胞成为治疗源组织提供了个性化治疗平台。目的评估利用逆转录病毒将Oct4、Sox2、c—Myc和K归4种基因导入RP患者皮肤成纤维细胞后诱导入iPSCs的可行性，并建立将正常人iPSCs诱导分化为RPE细胞的方法。方法分别采集基因突变点为SNRNP200p．S1087L的RP患者及无SNRNP200p．S1087L突变受试者的大腿皮肤组织块约2cm-3cm。采用胰蛋白酶消化和组织块培养法分离纯化得到成纤维细胞并进行传代，取第3代细胞用于研究，分别采用形态学和免疫荧光技术对培养细胞进行鉴定。采用含OCT4、SOX2、C—MYC和KLF44种cDNA的质粒病毒转染的成纤维细胞，并用hESCs条件培养液诱导iPSCs，采用细胞形态学、碱性磷酸酶（AP）染色、干细胞表面多潜能标志物表达对所得到的iPSCs和iPS—RPE细胞进行鉴定，并通过细胞在SCID小鼠的体内种植考察iPSCs的成瘤性。采用诱导分化拟胚体（EB）法将不含SNRNP200p．S1087L突变的iPSCs诱导分化为RPE细胞，分别采用免疫荧光技术和实时荧光定量PCR法检测细胞中特异性蛋白的表达。结果用皮肤组织块培养的成纤维细胞呈梭形和多角形，光学显微镜下可见细胞间排列紧密，细胞形态和大小趋于一致，细胞中特异性蛋白Vimentin表达阳性。经逆病毒转染的成纤维细胞培养后第5～7天可见小的细胞聚集，细胞形态由梭形变为圆形；培养后20d出现类似hESCs集落形态的iPSCs克隆；培养后25～30d细胞中的标志物SSEA3、SSEA4、TRA—1-60、TRA-1-81及Nanog均呈阳性表达，培养后12周形成的iPSCs克隆中AP染色阳性，接种到
- 田媛媛蒋超陈雪丁思加徐敏赵晨
- 利用人皮肤成纤维细胞诱导iPS细胞并向视网膜色素细胞分化的研究
- 目的 视网膜色素变性(RP)是一组具有显著临床和遗传异质性的进行性视网膜退行性疾病，视网膜色素上皮(RPE)细胞的变性、坏死可导致RP 的发生和视力下降等，目前尚无有效治愈RP 的方法，细胞治疗被认为是最具前景的治疗方法...
- 田媛媛丁思加蒋超赵晨
- 关键词：皮肤成纤维细胞IPS细胞RPE细胞
- 卷曲蛋白4基因新致病突变p.E160K引起家族性渗出性玻璃体视网膜病变被引量：2
- 2016年
- 目的 研究1个常染色体显性遗传家族性渗出性玻璃体视网膜病变（FEVR）家系的致病基因突变.方法 一个3代常染色体显性遗传FEVR家系中3例患者及1例患者的配偶纳入研究.先证者,男,5岁.其母亲和外公眼底均表现为典型的FEVR改变;父亲眼底检查正常.采集所有受试者外周静脉血,提取基因组DNA,扩增候选致病基因Norrie病、卷曲蛋白4（FZD4）、低密度脂蛋白受体相关蛋白5、四旋蛋白12、锌指蛋白408基因的全部编码区及外显子-内含子交界区剪切位点附近的序列,直接测序法检测潜在致病基因突变.应用分析软件明确该基因突变位点的保守性、有害性及可能引起的蛋白结构改变.结果 3例患者及先证者父亲共检测到5个单核苷酸变异,滤过最小等位基因频率值高于0.001的高频变异位点4个,可疑致病突变位点1个即FZD4基因c.478G＞A.该突变位点所对应的氨基酸改变为FZD4基因所编码蛋白的第160号氨基酸从谷氨酸突变为赖氨酸（p.E160K）.基因型和表型共分离验证结果表明,FZD4 p.E160K为该家系的致病突变位点.蛋白序列同源性分析结果显示,该突变位点在多个物种中均高度保守;功能性分析结果显示,该突变为有害性突变;晶体结构分析结果显示,该突变能够引起第160号氨基酸位点与第152号天冬酰胺间的氢键消失,影响蛋白的三级结构和正常功能.结论 发现并证实了该家系FZD4 p.E160K为FEVR的新突变位点.
- 徐敏田媛媛陈雪黄健成丁思加蒋超赵晨
- 关键词：基因突变
- 信息化建设对医院感染防控能力提升效果:26所三级综合甲等医院的多中心研究
- 目的：探讨医院感染信息化建设对医院感染防控能力提升效果。方法 采用多中心研究，设计标准化问卷，在三级综合甲等医院中开展调研。采取了回顾性研究，比较医院感染信息系统安装后医院感染质控指标提升情况。再采用前瞻性研究，选择神经...
- 李占结张卫红张永祥刘娟柴小玉陈浮方平冯诚怿葛学顺黄炳花黄奉毅黄辉萍姜萍雷小航梁丹燕刘菁刘善善卢珊潘虹霞宋舸唐红萍陶红英田媛媛王世浩王婷睿王文毅吴晓琴邢虎杨乐姚静袁咏梅臧金成张波周俊朱铁林陈文森
