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赵丽霞

作品数:1 被引量:2H指数:1
供职机构:广东医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇信号
  • 1篇信号通路
  • 1篇衰老
  • 1篇体外分化
  • 1篇通路
  • 1篇人骨
  • 1篇人骨骼肌
  • 1篇肌细胞
  • 1篇骨骼
  • 1篇骨骼肌
  • 1篇骨骼肌成肌细...
  • 1篇分化
  • 1篇INK4A
  • 1篇成肌细胞

机构

  • 1篇广东医学院
  • 1篇华中科技大学

作者

  • 1篇廖翔
  • 1篇熊东林
  • 1篇李蓉
  • 1篇姚尚龙
  • 1篇赵丽霞

传媒

  • 1篇中华实验外科...

年份

  • 1篇2013
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
人骨骼肌成肌细胞体外分化的全程观察及INK4a信号通路对其衰老的诱导研究被引量:2
2013年
目的建立人骨骼肌成肌细胞分离和纯化方法,展示人成肌细胞体外增殖分化至衰老的全过程;研究INK4a信号通路对其衰老的诱导。方法采用机械法和胶原酶消化法,结合差速贴壁技术,获得高纯度的人成肌细胞,结蛋白(desmin)抗体染色鉴定,β-半乳糖苷酶染色及倒置显微镜下观察人成肌细胞生长、分化及衰老全程。构建慢病毒载体pLVX—p16INK4a,感染第3代人骨骼肌成肌细胞(p16组),采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT—qPCR)法测定p16INK4amRNA水平,Westernblot法测定蛋白水平;用β-半乳糖苷酶染色及倒置显微镜下观察鉴定细胞衰老程度。结果desmin抗体着色表明分离得到的人成肌细胞纯度接近100%,获取了其增殖并分化为肌管、肌纤维以及最终转归为衰老细胞各阶段的实验图片。转染7d后,RT—qPCR法与Westernblot法证明p16组细胞p16INK4amRNA与蛋白表达水平明显高于对照组(P〈0.05);p16组细胞镜下见明显衰老表型,细胞计数显著少于对照组(P〈0.05),胞质经β-半乳糖苷酶染色后有明显蓝染,而对照组胞质蓝染微弱。结论人成肌细胞体外分离培养获得的不同阶段实验图景与现象分析,为以其为靶点的研究奠定了基础。INK4a信号通路的上调直接诱导了人成肌细胞的衰老。
赵丽霞李蓉熊东林姚尚龙廖翔
关键词:骨骼肌成肌细胞分化衰老信号通路
共1页<1>
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