闫慧
- 作品数：2 被引量：3H指数：2
- 供职机构：山西医科大学更多>>
- 发文基金：山西省青年科技研究基金博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠精子发生过程中dysbindin-1的表达被引量：2
- 2015年
- 目的探讨精子发生过程中dysbindin-1的表达及dysbindin-1对精子顶体形态的影响。方法取生后7d、14d、21d、28d、35d和3月龄的雄性小鼠各3只,用免疫印迹法检测睾丸组织dysbindin-1的表达;以dysbindin-1缺失突变的sdy小鼠为研究对象,收集附睾尾部精子,一部分制备精子涂片,HE染色显示精子形态,用异硫氰酸荧光素-豌豆凝集素(FITC-PSA)和抗精子蛋白56(sp56)单克隆抗体进行荧光染色显示顶体的结构;另一部分采用免疫印迹法检测精子中dysbindin-1的表达。结果不同发育阶段小鼠睾丸组织及精子中均只有dysbindin-1A,无dysbindin-1C的表达;sdy小鼠的精子及顶体的形态未见明显异常。结论 Dysbindin-1A表达于小鼠精子发生的不同时期,dysbindin-1A对精子形态维持不起关键作用。
- 闫慧刘慧霞魏宗波郭蕊张涛冯雅琴
- 关键词：顶体小鼠
- GST pull-down联合质谱筛选(肌)营养不良短小蛋白结合蛋白1在小鼠睾丸组织中的相互作用蛋白质被引量：2
- 2017年
- (肌)营养不良短小蛋白结合蛋白1(dystrobrevin binding protein 1,dysbindin-1)是溶酶体相关细胞器生物发生复合体-1(biogenesis of lysosome-related organelles complex 1,BLOC-1)的1个亚基,在多种组织细胞中广泛表达;然而,其在睾丸组织中的作用至今尚不明确。为寻找(肌)营养不良短小蛋白结合蛋白1在睾丸组织中的相互作用蛋白质,以进一步研究(肌)营养不良短小蛋白结合蛋白1在睾丸中的作用,本研究首先在Rosetta(DE3)菌种中表达可溶性GST-dysbindin-1融合蛋白,经谷胱甘肽-琼脂糖珠亲和纯化后,与小鼠的睾丸组织蛋白质孵育进行GST pull-down实验,并通过液相色谱串联质谱(LC MS/MS)分析筛选(肌)营养不良短小蛋白结合蛋白1在睾丸组织中的相互作用蛋白质。利用Bio GPS数据库聚类在睾丸组织中高表达和特异性表达的互作蛋白质,运用DAVID6.8在线分析工具从细胞组分、分子功能、生物学过程和KEGG通路等方面对筛选出的互作蛋白质进行GO(gene ontology)富集分析。本实验共筛选出108个(肌)营养不良短小蛋白结合蛋白1在睾丸组织中的潜在互作蛋白质,其中98个为尚未报道的(肌)营养不良短小蛋白结合蛋白1相互作用蛋白质,7个为睾丸高表达蛋白质,5个为睾丸特异性表达的蛋白质。这些候选蛋白质主要分布在细胞质、细胞核、细胞膜、细胞外泌体等细胞组分中,通过与蛋白质、核酸等分子结合参与蛋白质翻译和转运、囊泡运输及凋亡等生物学过程以及氨基酸生物合成、溶酶体及蛋白酶体等生物学通路。我们推测,在睾丸组织中(肌)营养不良短小蛋白结合蛋白1可能通过与多种蛋白质相互作用参与精子的发生和受精等过程。
- 张盼盼闫慧袁业锋冯雅琴
- 关键词：睾丸组织相互作用蛋白
