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钟浩海

作品数:20 被引量:43H指数:4
供职机构:惠州市中心人民医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 19篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 20篇医药卫生

主题

  • 10篇平滑肌
  • 10篇气道
  • 9篇气道平滑肌
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  • 7篇肌细胞
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  • 3篇下呼吸道
  • 3篇下呼吸道感染
  • 3篇腺病毒载体
  • 3篇疗效
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机构

  • 11篇惠州市中心人...
  • 9篇南方医科大学...
  • 4篇南方医科大学
  • 1篇广州呼吸疾病...
  • 1篇惠州市中心医...

作者

  • 20篇钟浩海
  • 9篇罗雅玲
  • 9篇赖文岩
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  • 4篇任敦强
  • 4篇陈丽丽
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  • 3篇张旃
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  • 3篇黎振兴
  • 3篇吴诗华
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  • 3篇陈丽丽
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传媒

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  • 1篇临床医学工程

年份

  • 1篇2021
  • 3篇2017
  • 1篇2016
  • 2篇2015
  • 2篇2014
  • 1篇2013
  • 4篇2011
  • 2篇2010
  • 4篇2009
20 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
改变PTEN基因表达影响支气管平滑肌细胞增殖被引量:1
2010年
目的:通过基因过表达和RNA干扰(RNAi)技术改变PTEN基因的表达并观察其对人支气管平滑肌细胞(BSMC)增殖和相关信号通路的影响。方法:利用携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-GFP-PTEN)和针对PTEN基因的腺病毒短发夹状RNA(shRNA)载体(Ad-GFP-shRNA-PTEN),转染BSMC细胞,建立PTEN基因过表达细胞模型Ad-GFP-PTEN-BSMC和PTEN基因沉默细胞模型Ad-GFP-shPTEN-BSMC,并以感染Ad-GFP和空白组作为对照。通过荧光倒置显微镜检测转染效率;Westernblot法检测PTEN蛋白的表达和AKT、ERK1/2通路的活化情况;MTS/PMS法检测细胞生长的变化;PI单染流式细胞术检测细胞周期的变化。结果:腺病毒介导的过表达载体和shRNA载体都能有效改变PTEN基因的表达。PTEN基因表达上调后,BSMC细胞生长受到抑制,G0-G1期细胞增多,S期细胞和G2/M期细胞减少,PI3K/AKT通路受到抑制,而MAPK/ERK通路未见变化;PTEN基因表达下调后,BSMC细胞生长受到促进,S期细胞增多,G0-G1期细胞和G2/M期细胞减少,PI3K/AKT通路激活,但MAPK/ERK通路却受到抑制。结论:PTEN基因可能主要通过调节PI3K/AKT通路影响人支气管平滑肌细胞的生长。
张达成罗雅玲赖文岩钟浩海陈丽丽
关键词:腺病毒载体细胞增殖AKTERK1/2
老年患者下呼吸道铜绿假单胞菌感染临床分布与耐药性分析被引量:4
2014年
目的:分析老年患者下呼吸道铜绿假单胞菌感染临床分布与耐药性。方法:搜集2011年6月至2013年6月我院老年下呼吸道感染住院患者,分离培养出铜绿假单胞菌菌株痰标本156份,用VITEK2-Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统对临床标本中分离的156株铜绿假单胞菌进行鉴定,并采用琼脂扩散法进行体外药敏试验,依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)最新折点判读结果。结果:非多重耐药(MDR)铜绿假单胞菌临床分离株对头孢噻肟、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药性最高,耐药率达70%以上;对亚胺培南、美罗培南、氨曲南和头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、哌拉西林/舒巴坦、阿米卡星的耐药率均在20%以内,其中亚胺培南、美罗培南敏感性均达到100%。而MDR菌株对哌拉西林、头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星、妥布霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶高度耐药,耐药率达100%,对哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、阿米卡星耐药率高达60%以上,对亚胺培南、美罗培南、氨曲南依旧敏感性较好,耐药率均低于20%。结论:亚胺培南、美罗培南对铜绿假单胞菌有较好的敏感性,可作为老年患者重症下呼吸道铜绿假单胞菌感染治疗的首选药物,如MDR铜绿假单胞菌感染,可联合用药。在联合用药的同时应当加强医院的抗生素合理使用,规范临床用药。
周毓彭军卢健聪钟浩海
关键词:下呼吸道感染铜绿假单胞菌耐药性
妥洛特罗贴剂治疗C、D级COPD稳定期患者的疗效与不良反应
2015年
目的探讨妥洛特罗贴剂治疗C、D级COPD稳定期的有效性和安全性。方法选取2013年6月至2014年1月85例C、D级COPD稳定期患者随机分为研究组和对照组,两组均给予吸入激素、口服茶碱缓释片、痰液溶解药等综合治疗,研究组加用妥洛特罗贴剂,每日1贴(2 mg/贴)。治疗6个月。观察用药前后肺功能、临床症状评分的变化及吸入短效β2-受体激动剂的使用情况。结果两组患者治疗前肺功能指标、临床症状评分及吸入短效β2-受体激动剂的使用情况比较差异均无统计学意义(P>0.05),治疗后两组肺功能指标、临床症状评分、吸入短效β2-受体激动剂的使用情况比较差异有统计学意义(P<0.05)。研究组局部皮肤不良反应发生率仅2.2%,且程度轻。结论妥洛特罗贴剂能改善C、D级COPD稳定期患者的临床症状和肺功能。
周毓吴诗华钟浩海
关键词:妥洛特罗贴剂疗效
老年患者下呼吸道铜绿假单胞菌感染临床分布与耐药性分析被引量:1
2014年
目的:分析老年患者下呼吸道铜绿假单胞菌感染临床分布与耐药性。方法:搜集老年下呼吸道感染住院患者,分离培养出铜绿假单胞菌菌株痰标本156份,用VITEK2-Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统对临床标本中分离的156株铜绿假单胞菌进行鉴定,并采用琼脂扩散法进行体外药敏试验,依据CLSI最新折点判读结果。结果:非MDR铜绿假单胞菌临床分离株对头孢噻肟、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药性最高,耐药率达70%以上;对亚胺培南、美罗培南、氨曲南和头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、哌拉西林/舒巴坦、阿米卡星的耐药率均在20%以内,其中亚胺培南、美罗培南敏感性均达到100%。而MDR菌株对哌拉西林、头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星、妥布霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶高度耐药,耐药率达100%,对哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、阿米卡星耐药性高达60%以上,对亚胺培南、美罗培南、氨曲南依旧敏感性较好,耐药性均低于20%。结论:亚胺培南、美罗培南对铜绿假单胞菌有较好的敏感性,可作为老年患者重症下呼吸道铜绿假单胞菌感染治疗的首选药物,如MDR铜绿假单胞菌感染,可联合用药。同时应当加强医院的抗生素合理使用,规范临床用药。
周毓彭军卢健聪钟浩海
关键词:下呼吸道感染铜绿假单胞菌耐药性
PTEN重组腺病毒载体的构建及其在气道平滑肌细胞的表达被引量:1
2009年
目的应用pAdxsi载体系统构建携带PTEN基因的腺病毒载体。方法将PTENcDNA自载体pcDNA3-PTEN中切出,克隆至穿梭质粒pShuttle-GFP-CMV中,然后与腺病毒质粒pAdxsi在化学感受态细胞DH5α菌株内同源重组,经Pac-Ⅰ线性化后,重组子通过脂质体2000介导转染HEK293细胞,产生有感染能力的腺病毒,并测定其滴度,通过荧光显微镜能观察HEK293细胞内绿色荧光的表达;PCR检测腺病毒载体PTEN mRNA的表达,Western blotting检测PTEN蛋白在气道平滑肌细胞的表达。结果感染腺病毒载体的HEK293细胞表达GFP随着时间逐渐增强,并且出现明显的细胞病变效应,经过3轮扩增后病毒达到合适的滴度,构建的Ad-PTEN腺病毒滴度为2×1010pfu/ml,PCR扩增后经琼脂糖凝胶电泳证实其表达,Western blotting检测到腺病毒感染的气道平滑肌细胞内PTEN蛋白表达明显增高。结论成功构建了携带野生型PTEN腺病毒载体,为进一步研究PTEN基因应用于哮喘治疗提供了实验基础。
钟浩海罗雅玲赖文岩徐健陈丽丽叶涵
关键词:PTEN腺病毒载体气道平滑肌细胞哮喘
IL-22对人气道细胞的作用被引量:5
2011年
目的探讨IL-22对人气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、气道成纤维细胞的生理学作用。方法用实时定量PCR检测气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、气道成纤维细胞哮喘血清刺激前后IL-22R1 mRNA表达的变化。不同浓度的IL-22(10 ng/ml,100 ng/ml,1 000 ng/ml)刺激气道上皮细胞、气道平滑肌细胞和气道成纤维细胞后,用MTT法检测细胞的增殖,用流式细胞技术(FACS)检测细胞的凋亡和坏死。结果哮喘血清刺激后气道上皮细胞IL-22R1 mRNA表达降至正常对照组的9%,气道平滑肌细胞IL-22R1 mRNA表达升高至正常对照组的345倍,而气道成纤维细胞IL-22R1 mRNA表达无明显变化。高剂量(1 000 ng/ml)的IL-22刺激气道上皮细胞和气道成纤维细胞12、24 h可显著降低细胞增殖(P<0.05,P<0.01)。三种不同浓度的IL-22刺激气道上皮细胞24 h后均导致细胞凋亡显著下降(P<0.05),低浓度的IL-22(10 ng/ml)导致细胞坏死增加(P<0.01)。不同浓度的IL-22刺激气道平滑肌细胞后,细胞凋亡和坏死无显著性变化。中、高浓度IL-22(100 ng/ml,1 000 ng/ml)刺激气道成纤维细胞后,细胞坏死率显著下降(P<0.05)。结论 IL-22在支气管哮喘中对气道上皮的作用具有双重性,并与支气管哮喘的病程相关;而对气道平滑肌细胞的作用则可能与浓度及病程相关。支气管哮喘后续阶段,IL-22对气道成纤维细胞作用轻微。
张旃蓝海兵周丽丽赖文岩徐建黎振兴任敦强叶涵钟浩海罗雅玲
关键词:白细胞介素-22气道上皮细胞气道平滑肌细胞
重组腺病毒介导的绿色荧光蛋白基因转染体外培养的人气道平滑肌的实验研究被引量:2
2011年
目的:研究重组腺病毒载体介导的绿色荧光蛋白基因转染体外培养的人气道平滑肌(HASMCs)的方法。方法:用组织贴块原代培养传代至3~8代的HASMCs,重组绿色荧光蛋白基因的腺病毒载体(Ad-GFP)以不同的感染复数(multiplicity of infection,MOI)转染,荧光显微镜和流式细胞术检测其转染效率,CCK-8法检测其对细胞的毒性。结果:随着MOI增高,转染效率增高。MOI=100时Ad-GFP对HASMCs的感染效率可达(96±0.32)%,以感染后48h达高峰,持续7d仍有绿色荧光表达;转染后的细胞与未转染细胞相比,细胞毒性无统计学差异(P>0.05)。结论:重组腺病毒载体介导的绿色荧光蛋白基因Ad-GFP能高效转染HASMCs,转染后对细胞无毒性,是一种安全的基因载体。
蓝海兵高杨罗雅玲钟浩海张达成任敦强赖文岩
关键词:转染人气道平滑肌重组腺病毒绿色荧光蛋白
强的松联合抗结核药物治疗结核性渗出性胸膜炎的疗效评价被引量:2
2016年
目的探讨抗结核药物联合强的松治疗结核性渗出性胸膜炎的临床效果。方法本院2014—2015年收治的80例结核性渗出性胸膜炎患者,随机分为对照组和观察组,每组40例,对照组患者给予抗结核药物(异烟肼、利福平、乙胺丁醇、吡嗪酰胺)口服治疗,并根据患者胸腔B超检查情况抽取胸腔积液;观察组患者在对照组治疗方法的基础上,联合强的松口服治疗。观察并记录两组患者的全身中毒症状缓解时间、体温恢复时间、胸腔积液吸收时间,根据患者临床症状改善情况对患者进行疗效评价。结果治疗后,观察组的全身中毒症状缓解时间、体温恢复时间、胸腔积液吸收时间均优于对照组患者,两组差异具有统计学意义,P<0.05;观察组患者的总有效率明显高于对照组患者的总有效率,两组差异具有统计学意义,P<0.05。结论结核性渗透性胸膜炎采用强的松联合抗结核药物治疗比单纯应用抗结核药物的疗效更显著,可快速改善患者临床症状,特别是可明显缩短全身中毒症状缓解时间、体温恢复时间、胸腔积液吸收时间,值得在临床上应用。
钟浩海陈丽丽邓帆黄慧杨国志林常青
关键词:联合用药抗结核结核性渗出性胸膜炎临床疗效
PTEN基因重组腺病毒对人气道平滑肌细胞增殖的影响及其作用机制
2009年
目的观察携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)体外转染人气道平滑肌细胞(HASMC)后的表达,研究其对HASMC增殖的影响,并对其作用机制作初步的探讨。方法利用pAdxsi载体系统构建携带PTEN基因的腺病毒载体,体外转染HASMC,荧光显微镜观察Ad-PTEN的转染效率。RT-PCR及Western blotting检测PTEN在HASMC中的表达。采用MTS/PMS法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期分布。Western blotting检测Akt及p-Akt的表达,RT-PCR检测P21mRNA的表达。结果外源性野生型PTEN基因经腺病毒介导成功转入HASMC,当感染复数MOI为100时,体外转染效率高达98%以上。Ad-PTEN感染HASMC后,能有效地引起细胞内过度表达PTEN。上调PTEN表达能显著提高G0/G1期细胞的比例,抑制细胞的增殖。上调PTEN表达能显著降低p-Akt及提高P21的表达水平。结论成功构建了过度表达PTEN的原代培养HASMC模型,该模型能有效地引起细胞内过度表达PTEN。上调PTEN表达能有效抑制HASMC的增殖,可能是通过对PI3K/AKt信号通路的抑制及上调P21的表达而起作用的。
陈丽丽罗雅玲赖文岩徐健钟浩海张达成叶涵
关键词:气道平滑肌细胞PTENAKT
吸入噻托溴铵干粉剂联合妥洛特罗贴剂治疗C、D级慢性阻塞性肺疾病稳定期的疗效与安全性被引量:3
2015年
目的:探讨吸入噻托溴铵干粉剂联合妥洛特罗贴剂治疗C、D级COPD稳定期的有效性和安全性。方法选取255例C、D级COPD稳定期患者按随机数表法分为研究组和对照组,研究组给予吸入噻托溴铵干粉剂(18μg/次),1次/d,并给予妥洛特罗贴剂(2 mg/贴),1次/d。对照组予吸入噻托溴铵干粉剂(18μg/次)1次/d。观察用药前后肺功能、临床症状评分的变化及吸入短效β2受体激动剂的使用、6 min步行实验、急性加重次数情况。结果两组患者治疗后肺功能指标、临床症状评分、吸入短效β2受体激动剂的使用、6 min步行实验、急性加重次数差异均有统计学意义(均P<0.05)。亚组分析研究组中肺气肿表型可见持续性疗效,慢性支气管炎表型、ACOS表型治疗初期有效,半年后疗效下降。两组药物不良反应发生率分别为19.7%、21.0%,两组不良反应发生率差异无统计学意义(χ2=0.071,P>0.05)。结论吸入噻托溴铵干粉剂联合妥洛特罗贴剂能改善部分C、D级COPD稳定期患者的临床症状和肺功能。
周毓吴诗华钟浩海陈中红苏惠清周仲志
关键词:肺疾病慢性阻塞性噻托溴铵妥洛特罗
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