刘仲凤
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：首都医科大学宣武医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 临床级脐带间充质细胞制备及鉴定方法研究
- 目的：在GLP 实验室中制备并鉴定临床级脐带间充质细胞(Umbilical Cord-Mesenchymal Stromal Cells,UC-MSC)。方法：新鲜获取的脐带去除血管并进行充分清洗,获得的华通胶(Whar...
- 袁艳鹏王淑艳唐玺和刘仲凤张愚陈志国
- 关键词：胶原酶无血清培养基
- 一种miRNA在制备降低神经干细胞中ascl2表达的药物中的应用
- 本发明提供了一种miRNA在制备降低神经干细胞中ascl2表达的药物中的应用，属于神经干细胞研究领域，所述miRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，还提供了降低神经干细胞中ascl2表达的试剂，包括所述的miR...
- 陈志国刘仲凤
- 文献传递
- 临床级脐带间充质细胞制备及鉴定
- 目的：在GLP实验室中制备脐带间充质细胞(Umbilical Cord-Mesenchymal Stromal Cells,UC-MSC),进行体外扩增及质检,获取临床级可移植的脐带间充质细胞。方法：新鲜获取的脐带去除血...
- 袁艳鹏王淑艳唐玺和刘仲凤张愚陈志国
- 关键词：无血清培养基分化能力
- 临床级脐带间充质细胞制备及鉴定方法研究被引量：1
- 2017年
- 目的在GLP实验室中制备并鉴定临床级脐带间充质细胞(UC-MSC)。方法新鲜获取的脐带去除血管并进行充分清洗,获得的华通胶(Wharton’s jelly)机械分离后分别进行直接贴壁法和不同的酶消化法,比较获取UC-MSC的数量差别;用不同的无血清培养基进行培养比较细胞形态是否良好,得到最佳形态的UC-MSC。体外培养第3代后进行UCMSC质检,包括细胞活性,生长曲线,无菌检测,人类相关病毒、支原体、内毒素检测,染色体核型分析,FACS免疫表型检测及分化能力检测。不同消化方法获取细胞数之间比较采用两样本配对t检验。结果胶原酶Ⅱ消化获得的UC-MSC数(5.3×10~6±0.58个/ml)与胶原酶Ⅰ+0.25﹪胰酶消化法(2.53×10~5±0.03个/ml)及直接贴壁法(2.6×10~5±0.05个/ml)之间差异有统计学意义(P<0.05),与胶原酶Ⅰ消化法获取细胞数(5.1×10~6±0.57个/ml)之间差异无统计学意义(P=0.07),但培养视野最干净;Mesen Cult-ACF Medium培养获得的UC-MSC形态最佳;UC-MSC质检细胞活性冻存前达99.8﹪,冻存复苏后达99﹪;无细菌、支原体、乙肝病毒、丙肝病毒、梅毒螺旋体、艾滋病毒、肺炎支原体、EB病毒、巨细胞病毒污染;内毒素检测结果均<1 EU;CD73/CD90/CD10~5阳性率达98﹪,CD34/CD45/HLA-DR呈阴性,阳性率<2﹪;染色体核型分析无突变或缺失;UC-MSC具有成脂、成骨或成软骨方向分化的能力。结论通过优化分离和培养条件,采用无血清及无动物来源的培养系统,在GLP实验室内可获得临床级UC-MSC。
- 袁艳鹏王淑艳唐玺和刘仲凤张愚陈志国
- 关键词：脐带间质细胞胶原酶类细胞分化
- 一种miRNA在制备降低神经干细胞中ascl2表达的药物中的应用
- 本发明提供了一种miRNA在制备降低神经干细胞中ascl2表达的药物中的应用，属于神经干细胞研究领域，所述miRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，还提供了降低神经干细胞中ascl2表达的试剂，包括所述的miR...
- 陈志国刘仲凤
- 文献传递
