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肠球菌TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用被引量：2: 2007年; 目的利用TaqMan荧光定量PCR方法,建立肠球菌实时荧光PCR检测方法,并初步应用于粪便中肠球菌的检测。方法根据GenBank发表的肠球菌23S rRNA基因序列的保守区域参考国外文献设计合成特异性的引物和探针[1];利用构建的质粒标准品优化Mg2+的浓度和引物探针浓度,并考核检测体系的保守性、灵敏性和重复性;初步应用于粪便标本的检测分析。结果Mg2+终浓度为4.5 mmol/L,上下游引物终浓度为0.4μmol/L,灵敏度为6拷贝数/反应;绘制两种标准曲线,构建了基因拷贝数、细菌数为分析指标的定量分析模型,检测粪便标本结果显示TaqMan荧光定量PCR方法较平板计数法敏感、快捷、简便。结论本研究建立了一种灵敏、特异、简便易行的肠球菌定量检测方法。; 任月袁杰利卢行安岳慧; 关键词：肠球菌荧光定量PCR 粪便

狐源犬瘟热病毒泰安株(CDV-FOX-TA)的分离与鉴定被引量：3: 2008年; 从具有疑似犬瘟热症状的病狐血液中分离到1株病毒,该病毒在MDCK细胞上生长良好,并能形成稳定的CPE。经电镜观察、理化特性、滴度测定、动物回归试验、RT-PCR和荧光定量RT-PCR鉴定,证实分离到的病毒为1株犬瘟热病毒强毒株,命名为CDV-FOX-TA。; 杨笃宝吕品胡传伟贾赟谢之景曹涤非任月刘海防; 关键词：狐狸犬瘟热病毒

Ⅱ型猪圆环病毒SYBR Green Ⅰ模式实时定量PCR检测方法的建立: 2007年; 登录GenBank下载猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV-2)的全基因组序列,根据其保守区域,设计1对特异性引物,采用SYBR Green Ⅰ随机结合渗入法,建立该模式的实时定量PCR检测方法,构建了检测PCV-2型的标准DNA模版,循环阈值(Ct)与标准DNA模板在1.0×102～1.0×107拷贝·μL-1浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.999。该方法用于猪圆环病毒2型的检测具有很高的特异性,其敏感性与常规PCR相比可以提高100倍,可以用于猪圆环病毒2型的快速检测。; 曹涤非贾赟胡传伟吴斌任月岳慧吕品杨玉英; 关键词：SYBR 实时定量PCR

应用实时荧光定量PCR方法检测肠球菌的研究: 目的:肠道菌群存在于宿主肠道之内,可以视为人体正常的器官,其数量之大/(1014/)、种类之多/(300-500种/),不容人们对其忽视,这些细菌直接参与宿主的物质代谢,是宿主正常生理活动中不可缺少的重要组成部分。肠球菌...; 任月; 关键词：肠球菌荧光定量PCR 粪便; 文献传递

粪便中肠球菌SYBR GreenI荧光定量PCR检测方法的建立被引量：6: 2007年; 目的利用SYBR GreenI荧光定量PCR方法,建立肠球菌实时荧光PCR检测方法,并初步应用于粪便中肠球菌的检测。方法根据GenBank发表的肠球菌23S rRNA基因序列的保守区域设计合成特异性的引物;利用构建的质粒标准品绘制两种标准曲线,构建基因拷贝数、细菌数为分析指标的定量分析模型并初步应用于粪便标本的检测分析。结果所建立的SYBR GreenI荧光定量PCR方法检测灵敏度可达7个拷贝数/reaction。粪便样本根据实时荧光定量PCR方法所得的理论数值与培养菌值之间差异无显著性(P>0.05)。非炎性腹泻标本中菌数与健康成人标本中菌数差异无显著性(P>0.05)。灵敏度曲线所得的数值大于菌数标准曲线,可能由于DNA提取过程中存在部分的损失。检测粪便标本结果显示SYBR GreenI荧光定量PCR方法较平板计数法敏感、快捷、简便。结论本研究建立了一种灵敏、特异、简便易行的肠球菌定量检测方法。; 任月袁杰利卢行安曹涤菲蔡竹; 关键词：肠球菌粪便

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任月