郑帮
- 作品数:11 被引量:6H指数:2
- 供职机构:上海大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:上海市浦江人才计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 拟南芥翻译延伸因子EF1A的亚细胞定位研究被引量:3
- 2015年
- 探讨了拟南芥的翻译延伸因子EF1A的亚细胞定位.以Col野生型拟南芥的cDNA为模板,通过高保真KOD扩增酶获得2 363bp的拟南芥转录延伸因子EF1A基因片段,将其与GFP融合后共同连入p1300表达载体,利用农杆菌侵染法将p35S∶GFP和p35S∶EF1A∶∶GFP转入野生型拟南芥中,观察转基因植物细胞中GFP的表达情况.结果显示:p35S∶GFP转基因植物中,细胞核中GFP荧光强度显著高于细胞质中荧光强度,但是在p35S∶EF1A∶∶GFP转基因植物中,细胞核中荧光强度与细胞质中荧光强度无显著差异,说明在进行蛋白翻译时细胞质中的EF1A含量显著高于细胞核中,这也为翻译延伸因子EF1A的亚细胞定位提供了实验依据.
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- 关键词:拟南芥GFP
- 拟南芥HSP70基因启动子表达载体的构建及在烟草BY2细胞中的应用被引量:2
- 2013年
- 探讨了拟南芥的HSP70基因在液体悬浮培养的烟草BY2细胞中的表达及应用.用PCR扩增的方法从拟南芥col生态型基因组中扩增获得HSP70基因启动子序列,将其连入p1300表达载体且以GFP为报告基因,将该表达载体采用农杆菌转基因转入液体悬浮培养的烟草BY2细胞中,观察转基因细胞中报告基因GFP的表达情况.结果显示:HSP70:GFP转基因液体悬浮培养的烟草BY2细胞中有GFP的表达.该表达载体可在液体悬浮培养的BY2细胞中正常表达,且可在较短时间内获得大量实验材料,对拟南芥的HSP70基因启动子的进一步研究提供理论依据和丰富的实验材料,且可明显缩短实验周期.
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- 关键词:拟南芥GFP
- 拟南芥ACOS5基因表达模式分析被引量:1
- 2013年
- 探讨了拟南芥ACOS5基因的表达模式.采用PCR方法对拟南芥col生态型基因组进行扩增,获得ACOS5基因启动子序列,将其连入p1300植物表达载体中以GFP作为报告基因,并将该载体通过农杆菌转基因转入拟南芥col生态型中,观察转基因植物花药中GFP的表达情况.结果:ACOS5::GFP转基因植物从花药发育第四期到十二期均有GFP表达,GFP的表达峰值在第八期.结论:该表达载体可用,且ACOS5基因从花药发育第四期开始有微弱表达,且随着时期发展逐渐增强,至第八期达到表达最高峰值,随后随时期发展表达量逐渐减弱.
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- 关键词:拟南芥花药GFP
- 带有荧光标签的植物表达载体及其构建方法
- 本发明涉及一种带有荧光标签的植物表达载体及其构建方法。该载体为SEQIDNO.1所示的碱基序列。本载体采用在植物体内不同组织器官和不同的发育时期表达最为稳定的UBQ10启动子作为表达载体的启动子,并添加GFP为本载体的报...
- 张卫郑亚杰郑帮司英语
- 文献传递
- 拟南芥脂酰辅酶A合成酶温敏特性研究
- 温敏雄性不育(temperature sensitive male sterility,MS)在现代杂交水稻培育方面起着举足轻重的作用。为了探究植物温敏雄性不育的分子机制,我实验室通过EMS诱变野生型拟南芥col-0,获...
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- 关键词:拟南芥雄性不育
- 文献传递
- 外源基因转化烟草悬浮细胞方法的改进
- 2014年
- 烟草悬浮培养细胞作为一种重要的实验材料已有较多的研究,将外源基因通过克隆进行载体构建,转化入悬浮培养的烟草细胞并进行表达,在带有相应筛选抗性的抗生素固体培养基中进行培养,再将愈伤组织转入液体培养基中进行培养,得到转入外源基因的液体悬浮培养烟草细胞.我们通过对此法作一些改进,使其便于操作、省时,适合在一般实验室条件下进行操作,且烟草悬浮培养细胞传代培养快,取材方便的特性对实验的开展也有很大的促进.
- 郑帮陈燕周树敏张卫
- 关键词:外源基因烟草悬浮培养细胞
- 拟南芥ACOS5基因启动子的克隆和表达载体构建
- 2014年
- 花药组织特异性启动子在花药发育的分子遗传学中有重要的研究价值.采用PCR方法克隆了1kb长度的ACOS5基因启动子,并将其连入含有GFP基因的拟南芥表达载体p1300中.电激转化农杆菌GV3101后,通过农杆菌介导转化拟南芥,获得转基因植株.显微观察显示,转基因植物花药只在绒毡层中有荧光表达.这说明ACOS5基因启动子可以在拟南芥花药中驱动外源GFP基因的特异性表达.
- 李亚琴陈燕郑帮孙虎林周树敏张卫
- 关键词:拟南芥花药
- 拟南芥脂酰辅酶A合成酶温敏特性研究
- 温敏雄性不育(temperature sensitive male sterility,MS)在现代杂交水稻培育方面起着举足轻重的作用。为了探究植物温敏雄性不育的分子机制,我实验室通过EMS诱变野生型拟南芥Col-0,获...
- 孙虎林孙亚梅郑亚洁褚艳霞郑帮司英语张卫
- 关键词:拟南芥雄性不育
- 花药特异性表达载体及其构建方法
- 本发明涉及一种花药特异性表达载体及其构建方法。该表达载体为SEQIDNO1所示的碱基序列。本载体可以在拟南芥花药中特异表达,且表达部位为花药绒毡层。利用该载体表达特点可以为花药绒毡层发育、基因表达模式、基因花药特异性表达...
- 孙虎林褚艳霞郑帮郑亚杰张卫
- 文献传递
- 活性氧对DA1/DA1m转基因BY2细胞活性的影响
- 已知拟南芥中DA1基因通过调控细胞的分裂活动,影响器官组成细胞的数量,从而控制了种子和器官最终的大小。细胞在代谢过程中会产生一系列活性氧簇reactive oxygen species (ROS),不同浓度的ROS作为信...
- 褚艳霞周树敏郑帮孙虎林郑雅洁司英语张卫
- 关键词:ROS