何晓华
- 作品数：14 被引量：37H指数：2
- 供职机构：上海交通大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学石油与天然气工程医药卫生更多>>
- 食品中婴儿沙门氏菌PCR检测方法及其中的核酸和引物对
- 一种食品安全检验技术领域的婴儿沙门氏菌PCR检测方法及其中的核酸和引物对；该检测方法包括如下步骤：根据婴儿沙门氏菌的基因组DNA序列中的保守序列SEQ ID NO：1设计扩增引物；提取样品DNA，PCR法扩增；凝胶电泳检...
- 史贤明刘斌施春雷何晓华
- 文献传递
- 鼠伤寒沙门氏菌PCR检测方法及其中的核酸和引物对
- 一种食品安全检验技术领域的鼠伤寒沙门氏菌PCR检测方法及其中的核酸和引物对；该检测方法包括如下步骤：根据鼠伤寒沙门氏菌的基因组DNA序列中的保守序列SEQ ID NO：1设计扩增引物；提取样品DNA，PCR法扩增；凝胶电...
- 史贤明刘斌何晓华施春雷陈婧
- 副溶血弧菌分子检测靶点的筛选及其内标PCR体系的建立
- 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是引起食源性疾病的一种重要致病菌,它常污染海产品如蟹、牡蛎、虾、贝等,从而引起食物中毒。中国国家食源性疾病监控网络数据显示,近年来沿海地区副溶血弧菌感染事件和人...
- 何晓华
- 关键词：副溶血弧菌扩增内标常规PCR荧光定量PCR
- 添加有扩增内标的副溶血弧菌PCR检测方法被引量：20
- 2010年
- 【目的】发掘副溶血弧菌特异性更强的检测靶点,并人工构建扩增内标,建立可以有效避免假阴性的新PCR检测体系。【方法】利用生物信息学方法,从副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)基因组DNA中发掘特异性很高的序列,并设计相应的特异性引物,人工构建扩增内标,建立PCR检测体系。【结果】本研究发掘得到的序列vp1332特异性很强,经检索,该序列是编码ABC转运子接合蛋白组分的基因片段,根据此序列设计一对特异检测引物(vp1332L/vp1332R),同时,构建了扩增内标,并建立了PCR检测体系。利用该体系对296株副溶血弧菌和33株非副溶血弧菌进行检测,结果显示,所有以副溶血弧菌为模板的PCR反应均可扩增到一条343bp的特异片段,而模板来源于非副溶血弧菌的则只能扩增到一条499bp的扩增内标片段。灵敏度实验表明,该PCR反应体系的检测灵敏度为1.6×102cfu/mL。人工污染实验表明,起始染菌量为1.24cfu/25g样品时经8h增菌,即可检测到副溶血弧菌。实际样品检测结果也证实该方法的有效性。【结论】本研究建立的PCR反应体系能特异地检测副溶血弧菌,并可有效地排除假阴性,提高检测准确率。
- 何晓华余水静陈万义施春雷孟江洪史贤明
- 关键词：副溶血弧菌PCR检测扩增内标假阴性
- 食源性致病菌多重扩增内标序列及其制备方法
- 一种检疫技术领域的食源性致病菌PCR检测中的多重扩增内标序列及其制备方法；所述食源性致病菌PCR检测中的多重扩增内标序列的碱基序列如下：1054F-15bp-hlyAF-15bp-PrsF-15bp-PSF-15bp-S...
- 史贤明何晓华刘斌施春雷
- 肠炎沙门氏菌的PCR检测方法、核酸及引物对
- 一种食品安全检测技术领域的肠炎沙门氏菌的PCR检测方法、核酸及引物对。本发明涉及的PCR检测方法包括如下步骤：根据肠炎沙门氏菌的基因组DNA中碱基序列如SEQ ID NO：1所示的序列设计特异性扩增引物对；提取样品DNA...
- 史贤明刘斌施春雷何晓华陈婧
- 文献传递
- 鸡白痢-伤寒沙门氏菌PCR检测方法及其中的核酸和引物对
- 一种食品安全检验技术领域的鸡白痢-伤寒沙门氏菌PCR检测方法及其中的核酸和引物对；该方法包括如下步骤：根据序列SEQ ID NO：1设计扩增引物；提取样品DNA，PCR法扩增；凝胶电泳检测扩增产物，判断样品是否含有鸡白痢...
- 史贤明刘斌何晓华施春雷但现龙
- 文献传递
- 肠炎沙门氏菌的PCR检测方法、核酸及引物对
- 一种食品安全检测技术领域的肠炎沙门氏菌的PCR检测方法、核酸及引物对。本发明涉及的PCR检测方法包括如下步骤：根据肠炎沙门氏菌的基因组DNA中碱基序列如SEQ ID NO：1所示的序列设计特异性扩增引物对；提取样品DNA...
- 史贤明刘斌施春雷何晓华陈婧
- 鼠伤寒沙门氏菌PCR检测方法及其中的核酸和引物对
- 一种食品安全检验技术领域的鼠伤寒沙门氏菌PCR检测方法及其中的核酸和引物对；该检测方法包括如下步骤：根据鼠伤寒沙门氏菌的基因组DNA序列中的保守序列SEQ ID NO：1设计扩增引物；提取样品DNA，PCR法扩增；凝胶电...
- 史贤明刘斌何晓华施春雷陈婧
- 文献传递
- 扩增内标及其在食源性致病菌PCR检测中的应用被引量：17
- 2010年
- 虽然PCR技术不断地得到了发展和改进,但检测结果容易出现假阴性而影响检测准确性的现象一直没有得到很好的解决。现在大多数学者普遍认为,在PCR体系中加入扩增内标(即一段人工构建合成的DNA序列或者是一段致病菌的看家基因序列)能有效指示假阴性现象的出现,是PCR检测技术标准化的措施之一。本文将从PCR检测方法中假阴性出现的原因、扩增内标的构建以及扩增内标在PCR检测方面的应用三方面进行综合评述,并结合本实验室的工作基础,介绍扩增内标的简捷构建过程和应用要点,希望在不影响检测灵敏度的前提下,发挥扩增内标对假阴性的指示作用。
- 何晓华史贤明
- 关键词：扩增内标PCR检测假阴性
