陈立
- 作品数：5 被引量：4H指数：2
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- 人外周γδ T细胞不同亚群在活动性结核病患者的变化
- 研究背景:已知人γδ T细胞在抗结核分枝杆菌(Mtb)感染的免疫中承担重要作用。人γδT细胞可分为δ1至Vδ8八个亚群,以Vδ2亚群为主。根据细胞因子产生分为Tγδ1,Tγδ17细胞等亚群。但不同γδT细胞亚群在活动性肺...
- 李柏青唐洁梁友宝陈立陈策梁华刘震天钱中清夏惠
- 关键词：结核分枝杆菌结核病
- 文献传递
- 结核分枝杆菌蛋白抗原刺激人γδT细胞的活性单位的计算方法被引量：2
- 2013年
- 目的以检测和计算结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)蛋白抗原激活人γδT细胞增殖的活性单位为指标,比较不同提取分离方法制备的Mtb抗原制剂激活人γδT细胞的活性效价。方法培养的Mtb-H37Ra菌株通过高温和超声方法处理,分别获取Mtb耐热抗原(Mtb-HAg)和超声处理抗原(Mtb-SoAg),采用超滤离心管(3 K,10 K,30 K)和快速液相蛋白层析(FPLC)分组和分离,获取不同相对分子质量组分的抗原。采集健康成年人外周血分离获取PBMC,加入不同质量浓度梯度的Mtb蛋白抗原或其分离组分,并加IL-2培养12 d后荧光抗体染色,流式细胞仪检测和分析扩增T细胞中γδT细胞的比例,以扩增γδT细胞最高比例的50%(EC50)所对应的质量浓度计算为1个活性单位。结果用活性单位计算法分析发现,某批次的Mtb-HAg(591μg/ml)刺激γδT细胞扩增的EC50为1.4μg/ml,计算其活性单位为0.71 U/μg;某批次低分子Mtb-SoAg(3 K～10 K)(221μg/ml)的EC50为0.8μg/ml,其活性单位为1.25 U/μg。结论通过比较Mtb蛋白抗原不同批次及其不同组分在不同质量浓度下刺激γδT细胞扩增数量的活性,可以计算获得相应的活性单位,为检测Mtb蛋白抗原制剂刺激γδT细胞增殖活性建立了标准化的计算方法。
- 孙悝陈勇徐志庆陈立李柏青
- 关键词：结核分枝杆菌ΓΔT细胞活性单位
- 结核分枝杆菌抗原和TCRγδ抗体诱导人γδT细胞分化并产生IL-17被引量：3
- 2015年
- 目的探讨结核分枝杆菌耐热抗原（MTB—HAg）和抗T细胞受体γδ单克隆抗体（TCRγδ／5mAb）在刺激人γδT细胞诱导分化产生IL-17中的作用。方法健康人外周血单个核细胞经过免疫磁珠分选得到纯化的γδT细胞后，加入MTB-HAg或包被的TCRγδ 5mAb，再加或不加CD28mAb进行刺激，同时加或不加IL-17极化细胞因子组合（CK）（IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23），极化诱导培养10—12d。然后收集诱导极化培养的γδT细胞，经佛波醇酯和离子霉素再刺激6h后，用ELISPOT法检测产生IL—17的细胞数。结果经刺激和诱导分化培养的γδT细胞用ELISPOT法检测产生IL-17的细胞数发现，TCRγδ 8mAb联合CK组与TCRγδ／8mAb组相比明显增加，TCRγδ mAb联合CD28mAb组与TCRγδ mAb同时联合CD28mAb和CK组相比明显减少。TCRγδ 8mAb同时联合CD28mAb和CK组与TCRγδ mAb联合CK组相比明显增多。MTB—Hag同时联合CD28mAb和CK组与TCRγδ mAb同时联合CD28mAb和CK组相比显著减少，但与MTB—HAg联合CD28mAb组相比明显增多。结论诱导Th17分化的CK（IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23）也能诱导人γδT细胞分化产生IL-17，TCRγδ 8mAb刺激γδT细胞增殖后诱导分化产生IL—17的活性比MTB—HAg更强。另外，CD28在TCRγδ 8mAb激活γδT细胞诱导产生IL-17的过程中也有重要作用。
- 陈立夏惠汪洪涛盛玲玲徐志庆孙垚唐洁李柏青
- 关键词：结核分枝杆菌ΓΔT细胞IL-17
- 恶性疟原虫抗原对健康人外周血T细胞免疫功能的影响
- 2014年
- 目的探讨恶性疟原虫抗原对健康人外周血T淋巴细胞免疫功能的影响。方法健康成人外周血单个核细胞(PBMC)体外分别用恶性疟原虫(P.f)抗原(5μg/ml)和正常红细胞(nRBC)抗原(5μg/ml)进行刺激,同时给予IL-2维持细胞增殖,另外设立只加IL-2的阴性对照组进行培养。培养12 d时,刺激组细胞再用对应的抗原刺激20 h,用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群分泌IL-4和IFN-γ的情况,并用羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(Carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFSE)标记法检测T细胞增殖反应。结果健康人PBMC经P.f抗原刺激扩增后CD4+T细胞的增殖指数(PI)明显高于nRBC抗原刺激组和阴性对照组(P均<0.05),但3组γδT的PI差异无统计学意义(P>0.05)。P.f抗原组分泌IL-4的CD4+T细胞百分率明显高于nRBC抗原组和阴性对照组(P均<0.05),但3组分泌IFN-γ的CD4+T细胞百分率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 P.f抗原在体外可刺激健康人外周血CD4+T细胞增殖活化,后者通过优先分泌IL-4而发挥免疫调节作用。
- 陈立陶莉李倩陶志勇方强夏惠
- 关键词：恶性疟原虫抗原T细胞IL-4IFN-Γ
- 荧光定量RT-PCR技术检测健康人外周血γδT细胞细胞受体分子Vδ1～8亚群分布
- 2015年
- 目的：检测和分析健康成人外周血中γδT细胞的T细胞受体（ TCR）分子Vδ1~8亚群分布情况。方法：采集16名健康成人外周血，荧光定量反转录聚合酶链式反应检测其γδT细胞TCR分子Vδ1~8亚群的基因相对表达量，计算各亚群所占百分比。结果：健康成人外周血γδT细胞TCR分子Vδ1~8亚群的比例分别为：Vδ1（7.19±0.33）%、Vδ2（54.27±7.9）%、Vδ3（20.23±0.03）%、Vδ4（3.80±0.02）%、Vδ5（2.08±0.02）%、Vδ6（0.81±0.25）%、Vδ7（7.21±0.02）%、Vδ8（4.41±0.04）%。 Vδ2亚群均明显高于其他亚群（P〈0.01）。结论：我国健康成年人外周血γδT细胞TCR分子Vδ1~8亚群分布由多到少依次为Vδ2〉Vδ3〉Vδ1〉Vδ8〉Vδ7〉Vδ4〉Vδ5〉Vδ6。
- 孙垚汪洪涛陈立徐志庆宋传旺李柏青
- 关键词：ΓΔT细胞
