陈瑞勤
- 作品数：2 被引量：11H指数：1
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 北冰洋放线菌FADH2-依赖型卤化酶基因的筛选、克隆与异源表达
- 卤化物是次级代谢产物中重要的一类,已在医药和工农业生产领域中被广泛应用。卤素的引入通常能显著增加卤化物的生物活性。通过传统的化学合成法很难获得具有底物特异性和区域选择性的活性卤化物,而许多微生物体内的卤化酶是这些卤化物合...
- 陈瑞勤
- 关键词：放线菌克隆异源表达
- 文献传递
- 北极海洋链霉菌604F的卤化酶基因克隆及特征被引量：10
- 2014年
- 【目的】本研究旨在克隆来自北极海洋、具有合成卤化物潜力的链霉菌(Streptomyces sp.)604F中的一个卤化酶基因,为后续克隆卤化物合成基因簇、分离鉴定卤化物提供指导。【方法】利用琼脂块法初步测试抗菌活性,借助液相色谱-飞行时间串联质谱技术(LC-Tof MS)初步寻找Streptomyces sp.604F发酵粗提液中的卤化物,并以简并PCR扩增合成次级代谢产物的指示基因(I型、II型聚酮合酶及非核糖体多肽合成酶编码基因);根据依赖黄素腺嘌呤二核苷酸的卤化酶基因保守区设计的简并引物,扩增基因片段并测序分析;采用高效热不对称交错PCR(hiTAIL-PCR)技术扩增卤化酶基因全长。【结果】Streptomyces sp.604F具有较强的抗白色念珠菌活性,其基因组同时含有编码I型聚酮合酶、II型聚酮合酶和非核糖体多肽合成酶基因,以及卤化酶基因;通过染色体步移克隆该卤化酶基因全长,共1443 bp,编码一个新的非色氨酸卤化酶,在合成已知卤化物的卤化酶数据库中,与其同源关系最近的为一类参与合成糖肽类次级代谢产物的卤化酶。【结论】Streptomyces sp.604F具有新的非色氨酸卤化酶,且推测参与糖肽类化合物的卤化修饰,为后续寻找目的卤化物提供了指导,也为研究该合成基因簇奠定基础。
- 陈瑞勤廖丽张晓华陈波
- 关键词：放线菌
