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基因搜寻载体、随机基因突变调控方法及用途: 本发明涉及基因搜寻载体、随机基因突变调控方法及用途。具体而言，本发明涉及基因搜寻系统所用的载体、随机基因调控方法、筛选高转移人肿瘤细胞株的方法、筛选提高人肿瘤细胞株转移的基因的方法、利用所述随机基因调控方法获得的全基因组...; 李利民常德; 文献传递

β-淀粉样多肽的抗体及其用途: 本发明涉及β-淀粉样多肽的抗体及其用途。本申请的发明人发明了重链可变区序列为SEQ ID No：3，轻链可变区序列为SEQ ID No：4的β-淀粉样多肽的抗体；分泌上述抗体的杂交瘤；对上述抗体人源化后的抗体以及进一步改...; 梁平常德张建华

基因搜寻载体、随机基因突变调控方法及用途: 本发明涉及基因搜寻载体、随机基因突变调控方法及用途。具体而言，本发明涉及基因搜寻系统所用的载体、随机基因调控方法、筛选高转移人肿瘤细胞株的方法、筛选提高人肿瘤细胞株转移的基因的方法、利用所述随机基因调控方法获得的全基因组...; 李利民常德; 文献传递

应用锁式探针滚环扩增检测小鼠畸胎瘤分化过程中单细胞基因表达水平: 2011年; 目的应用锁式探针介导的滚环扩增技术(Padlock-RCA)原位检测干细胞分化过程中单细胞mRNA表达水平。方法利用维甲酸(RA)诱导小鼠畸胎瘤细胞F9分化模型,应用锁式探针滚环扩增原位基因检测技术检测Nanog在其分化前后单细胞mRNA表达水平,结合实时定量RT-PCR分析该方法的效果。结果锁式探针滚环扩增原位基因表达检测方法能够检测单个细胞mRNA表达水平,并能够有效的反映F9细胞分化前较分化后Nanog基因表达水平显著降低(P<0.05)。结论成功应用锁式探针滚环扩增原位基因表达检测技术分析Nanog基因在F9分化前后单细胞中表达水平,为进一步研究单细胞基因表达及细胞亚群功能分析提供了一种可靠的新方法。; 杜洪震常德李利民; 关键词：MRNA 分化

抗Aβ鼠源单克隆抗体的人源化改造及其表达鉴定被引量：1: 2010年; 目的将前期构建的抗Aβ人-鼠嵌合抗体进行可变区人源化改造,为抗Aβ抗体在临床人体中应用奠定基础。方法采用模板替换法对已构建的人-鼠嵌合抗体基因中的重、轻链可变区框架区进行人源化改造,构建抗Aβ人源化抗体的真核表达载体。用脂质体法将重、轻链共转染CHO细胞进行表达,采用ELISA法检测表达产物效价、表达量;同时用SDS-PAGE及Western blot检测表达产物分子质量;免疫组化法鉴定其生物学活性。结果重组改造后的抗Aβ人源化抗体基因重链约为1 500 bp,轻链约为750 bp,与预期一致。转染CHO细胞后获得表达,表达量为1.11 mg/L,抗体重链相对分子质量约为51 ku,轻链约为25 ku。ELISA结果显示能与Aβ特异性结合(细胞培养上清A值:2.24),与改造前的嵌合抗体比较效价基本相同。抗体人源化检测显示,只能被羊抗人抗体识别,不能被羊抗鼠抗体识别。免疫组化显示表达产物有结合Aβ抗原的活性。结论将抗Aβ人-鼠嵌合抗体进行可变区人源化改造后,基本保持了原嵌合抗体的生物学特性,为其今后应用于临床提供了可能性。; 李彦玮常德赵雪梅梁平; 关键词：阿尔茨海默病人源化抗体嵌合抗体 Β-淀粉样蛋白

β-淀粉样多肽的抗体及其用途: 本发明涉及B-淀粉样多肽的抗体及其用途。本申请的发明人发明了重链可变区序列为SEQ ID No：3，轻链可变区序列为SEQ ID No：4的β-淀粉样多肽的抗体；分泌上述抗体的杂交瘤；对上述抗体人源化后的抗体以及进一步改...; 梁平常德张建华; 文献传递

抗阿尔茨海默病Aβ人-鼠嵌合抗体基因的真核载体构建和表达被引量：2: 2010年; 目的通过基因工程抗体技术构建和表达抗β-淀粉样多肽（Aβ）人-鼠嵌合抗体,减低鼠源单克隆抗体在临床应用中引起的人体免疫排斥反应.方法从分泌抗Aβ1-42鼠单克隆抗体杂交瘤细胞株中提取总RNA,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增鼠源性抗体全长基因,并通过Blast对其序列进行分析;利用重组PCR技术拼接重轻链可变区及人IgG1的恒定区基因,并对重链Fc段进行定点突变以降低排斥反应;分别构建人-鼠嵌合基因重轻链表达载体,用脂质体法将其同时导入COS-7细胞中表达,并利用ELISA和免疫组织化学（SP法）对分泌的抗体功能和性质进行初步鉴定.结果 Blast比对分析结果显示克隆的基因序列符合小鼠抗体基因序列,将可变区基因与人IgG1的恒定区基因拼接以及Fc定点突变后,成功构建了嵌合抗体的真核表达载体,并实现真核表达;ELISA和免疫组织化学方法证实了所分泌抗体的人源性和与Aβ的结合特异性.结论成功地构建和表达了抗阿尔茨海默病Aβ人-鼠嵌合抗体,为其在阿尔茨海默病的临床诊治中应用和进一步改造奠定了基础.; 常德张建华赵雪梅梁平; 关键词：阿尔茨海默病淀粉样Β蛋白

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常德