胡永乐
- 作品数：16 被引量：42H指数：5
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程农业科学医药卫生更多>>
- 近江牡蛎4种类型GST基因cDNA全序列的克隆与分析被引量：7
- 2009年
- 为从分子水平上研究不同类型谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-transferase,GST)基因在近江牡蛎(Crassostrea ariakensis)等贝类体内代谢去毒过程中的作用,采用RT-PCR及RACE法,分离、克隆得到近江牡蛎肝脏4种类型GST基因cDNA全序列.序列分析结果表明,mu、pi、omega、sigma4种类型GST基因cDNA全长分别为970bp、773bp、999bp、1277bp,分别编码215、207、242、203个氨基酸.构建系统进化树发现,除太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)pi型GST外,所有类型GSTs序列都能各自聚集成一簇.
- 林群梁旭方胡永乐王琳刘秀霞
- 关键词：基因克隆
- 叔丁基对苯二酚在作为激活鱼类去毒基因表达的饵料添加剂中的应用
- 本发明公开一种叔丁基对苯二酚在作为激活鱼类去毒基因表达的饵料添加剂中的应用。本发明将叔丁基对苯二酚添加到鱼类饲料中，叔丁基对苯二酚作为鱼类体内GST基因的表达诱导剂，诱导鱼类GST基因表达，从而使得鱼类自身增强去毒能力，...
- 梁旭方姚煜陈小佳王琳程伟轩李观贵何珊胡永乐郁颖陈亮
- 微囊藻毒素降解酶MlrA的全长cDNA序列、编码氨基酸和应用
- 本发明提供了一种微囊藻毒素降解酶MlrA的全长cDNA序列、编码蛋白和应用，该微囊藻毒素降解酶MlrA全长cDNA序列的核苷酸序列如SEQ IDNO：1所示，其编码氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。本发明的微囊藻毒...
- 梁旭方胡永乐陈小佳谢秋玲姚煜程炜轩曹亮何珊
- 文献传递
- 黄斑篮子鱼去毒相关基因的克隆与肝脏组成型表达分析被引量：1
- 2009年
- 从基因水平探讨海洋鱼类对海洋藻毒素的去毒分子机理。采用RT-PCR法成功克隆了黄斑篮子鱼Siganus oramin肝脏I时相代谢酶细胞色素P450 1A(CYP1A)、II时相代谢酶alpha型谷胱甘肽S-转移酶(GSTA)和rho型谷胱甘肽S-转移酶(GSTR)、热休克蛋白70(HSP70)、alpha 1型钠钾ATP酶(ATP1A1)及β-肌动蛋白(beta-actin,ACT)基因cDNA核心序列,序列分别长879 bp、582 bp、588 bp、660 bp、749 bp和554 bp。序列同源性分析发现,属鲈形目的黄斑篮子鱼CYP1A、GSTA和GSTR与同属鲈形目的牙鲆Paralichthys olivaceus、欧洲鲽Pleuronectesplatessa、真鲷Pagrus major、鲤形目的斑马鱼Brachydanio rerio相应氨基酸序列同源性较高,CYP1A和GSTA与非洲爪蟾(两栖类)、鸡(鸟类)、小鼠、大鼠和人(哺乳类)相应氨基酸序列同源性低,这可能与鱼类Ⅰ、Ⅱ时相去毒酶基因承担水环境毒素去毒代谢的特殊功能有关;而HSP70、ATP1A和β-肌动蛋白在鱼类、两栖类、鸟类、哺乳类中均有较高的同源性,这可能与这些基因在机体中承担的最基本的生命功能相关。应用半定量RT-PCR的方法,以β-肌动蛋白作为外参照,在指数期增长范围内分别得到了CYP1A、GSTA、GSTR、HSP70和ATP1A1 mR-NA与β-肌动蛋白mRNA(%)的比值,确定黄斑篮子鱼肝脏去毒相关基因的组成型表达水平。其中,黄斑篮子鱼肝脏CYP1A、GSTA和GSTR基因组成型表达相对较高,HSP70和ATP1A1基因组成型表达相对较低,这可能与不同基因在黄斑篮子鱼海洋藻毒素去毒分子机理中承担的作用相关,为海洋藻毒素在海洋鱼类中的积聚及代谢去毒分子机制的研究提供了相关数据。
- 王琳梁旭方林群李光照胡永乐
- 关键词：细胞色素P450谷胱甘肽S-转移酶热休克蛋白70钠钾ATP酶
- 真鲷去毒相关基因cDNA序列的克隆与肝脏组成型表达分析
- 2009年
- 赤潮发生时产生的一些海洋生物毒素对人类和海洋动物的安全形成潜在的威胁甚至导致死亡.为从分子水平探讨鱼类中海洋藻毒素的去毒分子机理,采用RT-PCR法克隆了真鲷(Pagrus major)肝脏芳香烃受体核转位蛋白(ARNT)和I时相异生素代谢酶细胞色素P4501A(CYP1A)基因cDNA核心序列,同时,应用半定量RT-PCR方法,以β-肌动蛋白作为外参照,在其指数期增长的范围内研究了芳香烃受体(AHR)、ARNT、CYP1A、II时相异生素代谢酶alpha型谷胱甘肽S-转移酶(GSTA1、GSTA2)、rho型谷胱甘肽S-转移酶(GSTR)、热休克蛋白70(HSP70)基因组成型表达水平.结果发现,真鲷ARNT、CYP1A基因cDNA核心序列片段分别长438bp和908bp,分别编码146和302个氨基酸.序列同源性分析发现,真鲷与门齿鲷(Stenotomus chrysops)、石首鱼(Micropogon undulatus)ARNT基因氨基酸序列同源性高达97.2%、95.2%,与斑马鱼(Brachydanio rerio)、人、大鼠、小鼠ARNT同源性较低(77.2%～79.3%).真鲷与门齿鲷、金头鲷(Sparus auratus)、欧洲川鲽(Rhombus maximus)、欧洲海鲈(Dicentrachus labrax)CYP1A基因氨基酸序列同源性较高,为84.8%～94.0%,与斑马鱼、人、小鼠CYP1A同源性较低,为59.6%～77.8%.真鲷肝脏AHR、ARNT、CYP1A、GSTA1、GSTA2、GSTR和HSP70基因组成型表达水平分别为(25.32±6.56)%、(26.22±4.24)%、(146.5±16.06)%、(55.42±3.75)%、(48.82±10.89)%、(79.47±3.13)%、(107.42±14.34)%.
- 王琳梁旭方黄燕胡永乐陈亮
- 叔丁基对苯二酚在作为激活鱼类去毒基因表达的饵料添加剂中的应用
- 本发明公开一种叔丁基对苯二酚在作为激活鱼类去毒基因表达的饵料添加剂中的应用。本发明将叔丁基对苯二酚添加到鱼类饲料中，叔丁基对苯二酚作为鱼类体内GST基因的表达诱导剂，诱导鱼类GST基因表达，从而使得鱼类自身增强去毒能力，...
- 梁旭方姚煜陈小佳王琳程伟轩李观贵何珊胡永乐郁颖陈亮
- 文献传递
- 斜带石斑鱼胰蛋白酶原和淀粉酶全长cDNA的克隆与序列分析被引量：9
- 2010年
- 采用RT-PCR及RACE法从斜带石斑鱼Epinephelus coioides肝胰脏克隆得到胰蛋白酶原(trypsinogen,TRY)与淀粉酶(amylase,AMY)基因cDNA全序列。斜带石斑鱼肝胰脏TRY基因cDNA全长911bp,其中5'非翻译区(5'-UTR)为55bp,3'-UTR为127bp,开放阅读框(ORF)为729bp,编码242个氨基酸,包含所有丝氨酸蛋白酶中共有的高度保守的催化活性中心。序列一致性分析发现,斜带石斑鱼与牙鲆Paralichthys olivaceus、金头鲷Sparus aurata、鳎Solea senegalensis、石鲽Pleuronectes bicoloratus的TRY序列相似性高达86.8%-89.7%,与人Homo sapiens、小鼠Mus musculus、斑马鱼Danio rerio的TRY相似性较低为59.9%-64.5%。斜带石斑鱼AMY基因cDNA全长1657bp,其中5'-UTR为41bp,3'-UTR为77bp,ORF为1539bp,编码512个氨基酸,包含与哺乳动物α-AMY二级结构相似的8个α螺旋和8个β折叠。序列一致性分析发现,斜带石斑鱼与澳洲肺鱼Neoceratodus forsteri、美洲拟鲽Limanda americanus、大西洋鲑Salmo salar、斑马鱼AMY基因序列相似性高达82.4%-91.8%,与人、小鼠、鸡G.Gallus的AMY基因相似性较低为70.1%-72.3%。斜带石斑鱼TRY和AMY基因cDNA全序列的成功克隆为进一步研究其表达调控机理及研发有效提高其表达水平的饲料添加剂奠定基础。
- 胡永乐梁旭方王琳李观贵刘秀霞王云新张海发
- 关键词：胰蛋白酶原淀粉酶基因克隆
- MlrA基因cDNA序列、编码氨基酸和水体中微囊藻毒素的检测方法
- 本发明提供一种MlrA基因cDNA序列、编码氨基酸和水体中微囊藻毒素的检测方法，该MlrA基因cDNA序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。本发明通过对不同季节不...
- 梁旭方胡永乐陈小佳谢秋玲姚煜程炜轩曹亮何珊
- 文献传递
- 斑鳢等鱼贝类去毒相关基因的克隆
- 2008年
- 采用RT-PCR和RACE法,克隆得到斑鳢、鲢鱼CYP1A与斑鳢HSP70基因cDNA的核心序列,序列长度分别为908bp、902bp、684bp,分别编码302、300、228个氨基酸;还克隆得到斑鳢、近江牡蛎GPX基因cDNA的部分序列,长度分别为720bp、727bp,分别编码119、232个氨基酸.多个重要养殖水生动物的去毒相关基因的成功克隆,为水产养殖动物去毒相关基因结构、功能、表达调控研究以及今后定向筛选高食用安全保障的水产品奠定基础.
- 林群梁旭方王琳胡永乐李光照
- 关键词：基因克隆水产养殖动物水产品安全
- 3种淡水鱼GSTR的cDNA克隆与肝脏组成型表达比较被引量：2
- 2008年
- 比较不同生态习性淡水鱼类微囊藻毒素去毒能力与其肝脏II相去毒酶Alpha-及Rho-谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因组成型表达之间的关系.采用RT-PCR及RACE方法成功克隆鲢鱼(Hy-pophthalmichthys molitrix)、尼罗罗非鱼(Oreochromis nilotica)、草鱼(Ctenopharyngodon idellu)肝脏Rho-GST(GSTR)基因cDNA全序列.应用半定量PCR方法以β-肌动蛋白为外参照,研究鲢鱼、尼罗罗非鱼、草鱼肝脏Alpha-GST(GSTA)及GSTR基因的组成型表达水平.结果表明,3种淡水鱼类微囊藻毒素去毒基因GSTR序列全长分别为1 078 bp、904 bp、1 104 bp.鲈形目鱼类的罗非鱼GSTR基因组成型表达相对较高,而鲤形目鱼类的鲢鱼、草鱼GSTA基因组成型表达相对较高.可见不同生态习性淡水鱼类GST基因组成型表达的高低可能与3种淡水鱼类生态习性及去毒能力有关,但对于不同生态习性淡水鱼类去毒能力的分子机制尚待进一步研究.
- 黄燕梁旭方王琳林群胡永乐
- 关键词：微囊藻毒素谷胱甘肽S-转移酶CDNA全序列淡水鱼类
