姜婷婷
- 作品数:3 被引量:0H指数:0
- 供职机构:河北农业大学更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金河北省高等学校科学技术研究指导项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 拟南芥AtSEC14基因反义RNA植株的获得及抗病性检测
- 2016年
- 为确定拟南芥抗灰霉病相关基因AtSEC14的功能,本试验构建了AtSEC14基因的反义RNA载体;通过农杆菌介导的遗传转化方法,将其转化拟南芥野生型Col-0中;利用潮霉素抗性筛选和PCR检测,获得了阳性转基因植株。利用半定量RT-PCR技术,在转基因株系中未检测到AtSEC14基因的表达,说明该基因反义RNA载体的转入能特异影响AtSEC14基因的表达,表明试验所获得的转基因植株是AtSEC14基因的反义RNA转基因植株。对所获得的反义RNA转基因植株进行抗病性鉴定,发现反义RNA转基因植株对灰葡萄孢的敏感性增强,表明AtSEC14基因在拟南芥抗灰葡萄孢过程中起正调控的作用。
- 瓮巧云黄聪聪赵亚婷姜婷婷周帆邢继红董金皋
- 关键词:拟南芥灰葡萄孢反义RNA
- 一种饲料发酵桶
- 本实用新型属于发酵器皿技术领域,尤其是涉及一种饲料发酵桶。所述的饲料发酵桶的底部设置有网格底座,网格底座的内部设置有数个卡接齿轮柱条;所述的卡接齿轮柱条的上端活动卡接有网格压缩板,网格压缩板的上端外侧设置有压缩齿轮,压缩...
- 姜婷婷王奕丁王全
- 文献传递
- 灰葡萄孢BcKMO基因的原核表达分析
- 2017年
- 为构建灰葡萄孢犬尿氨酸单加氧酶(Bc KMO)基因的原核表达载体并进行高效表达,获得纯化的Bc KMO蛋白。以灰葡萄孢野生型BC22为试材,通过反转录PCR扩增Bc KMO基因,回收Bc KMO基因片段克隆到p MD19-T载体中,测序正确后,酶切p MD19-T-Bc KMO和带有GST标签蛋白的p GEX4T-1质粒,将目的片段进行连接,构建Bc KMO基因的原核表达载体p GEX4T-1-Bc KMO-GST。经酶切和测序鉴定正确后,将构建好的原核载体转化大肠杆菌BL21。经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21菌株中成功表达了与GST标签蛋白融合的Bc KMO蛋白,大小约71 k Da。SDS-PAGE分析表明,该蛋白在0.2 mmol/L IPTG诱导12 h时高效表达;Western Blot结果发现目的蛋白能与GST特异性抗体起特异性反应,表明Bc KMO基因的体外诱导表达成功。
- 王敏刘媛媛周帆姜婷婷郑旭张靖时翠平邢继红董金皋
- 关键词:灰葡萄孢原核表达纯化PCR