徐文凯
- 作品数：8 被引量：5H指数：2
- 供职机构：西北民族大学生命科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 细胞受体介导的免疫信号通路研究进展
- 2017年
- 免疫系统的细胞是通过其表面多样化受体来实现感知外界环境的变化和其与其他细胞信息交流的。在这些细胞中,淋巴细胞抗原受体已经得到深入研究。目前,其他免疫细胞受体与淋巴细胞上其他受体的分子机制也已经被研究得很清楚了。细胞表面受体所运送的细胞外界信息是通过细胞膜来产生一系列的胞内生物化学事件。信号传输的形式多种多样,这种过程被称为信号转导,它可以将信号传输到细胞的特定部位,并且将其作用维持和调控至特定的部位。大多数信号的终点是细胞核和细胞骨架。信号到达细胞核就改变基因表达,产生一些新的蛋白质,像细胞因子、化学增活素和细胞黏附因子,从而使免疫细胞在机体免疫系统的正确调控下发挥免疫学功能。
- 周小凯徐文凯徐文凯李林杰马晓霞
- 关键词：免疫系统受体细胞膜信号传导信号分子
- 意大利蜜蜂amPGI基因的克隆与表达分析被引量：2
- 2021年
- 葡萄糖-6-磷酸异构酶(PGI)是糖酵解和几丁质合成途径中一种发挥重要作用的蛋白酶,为了探究意大利蜜蜂amPGI基因的分子特征及其在不同品级、不同发育时期的表达情况,采用RT-PCR技术克隆意大利蜜蜂葡萄糖-6-磷酸异构酶基因(amPGI),应用生物信息学方法分析其序列特征;进一步通过RT-qPCR技术检测amPGI基因在意大利蜜蜂不同品级、不同发育时期的表达模式。结果显示,克隆获得amPGI基因序列全长1 674 bp,共编码557个氨基酸。序列分析发现,amPGI与大蜜蜂PGI氨基酸序列相似度达到96.3%,蛋白结构以α-螺旋为主,且含有2个保守结构域和9个磷酸化位点,是一种结构稳定的非分泌型的亲水性胞内蛋白。表达模式显示amPGI基因在意大利蜜蜂不同品级、不同发育时期均有表达,且差异显著(P<0.05),工蜂中幼虫期5日龄表达量最高,雄蜂中成虫期表达量最高,蜂王中幼虫期6日龄表达量最高,不同品级卵前期和蛹期表达量均较低,且卵的孵化和蛹的羽化过程中amPGI基因表达量都急剧增加。综上推测amPGI基因在意大利蜜蜂精巢和卵巢的发育及几丁质的合成过程中具有重要作用。
- 欧阳霞辉徐文凯郑相相彭帅刘丽霞
- 关键词：意大利蜜蜂葡萄糖-6-磷酸异构酶分子特征
- 意大利蜜蜂amPFK基因的克隆与表达分析被引量：1
- 2021年
- 【目的】本研究旨在明确意大利蜜蜂磷酸果糖激酶(amPFK)基因的序列特征及表达模式,为进一步研究amPFK在生殖和发育中的功能奠定理论基础。【方法】采用RT-PCR技术克隆了amPFK基因,并对其氨基酸序列和蛋白结构进行了分析;通过RT-qPCR检测了amPFK基因在意大利蜜蜂不同品级不同发育时期的表达模式。【结果】克隆获得了意大利蜜蜂amPFK的全长cDNA序列,其中开放阅读框(ORF)2486 bp,编码757个氨基酸。序列分析表明,amPFK在进化过程中具有较高的保守性,可能存在两个磷酸果糖激酶结构域;amPFK蛋白主要由α-螺旋构成,是一个稳定的亲水性蛋白,具有1个可能的互作蛋白Vha44。表达模式显示,amPFK基因在意大利蜜蜂不同品级、不同发育时期的表达量差异显著(P?0.05);雄蜂、蜂王不同时期amPFK的表达量均呈现出先升高后降低再升高的趋势,羽化成虫后表达量最高;不同品级的幼虫第一日龄amPFK的表达量明显较高,而且羽化成虫后蜂王和雄蜂的表达量明显高于工蜂。【结论】意大利蜜蜂amPFK在蜂王、雄蜂的幼虫初期和成虫期的高表达量可能与其胚后发育初期和生殖发育中细胞增殖的能量代谢有关。
- 郑相相徐文凯刘丽霞欧阳霞辉
- 关键词：意大利蜜蜂分子特征生殖调控
- 意大利蜜蜂amLDH基因的克隆与表达分析被引量：1
- 2021年
- 乳酸脱氢酶(LDH)是糖酵解和葡萄糖异生途径中一种发挥重要作用的蛋白酶。本研究以意大利蜜蜂为研究对象,RT-PCR和生物信息学方法克隆并分析了意大利蜜蜂乳酸脱氢酶基因及其表达产物的分子特征和结构功能,并利用qRT-PCR技术对amLDH基因在意大利蜜蜂不同级型、不同发育阶段的表达模式进行了分析。序列特征结果表明,意大利蜜蜂amLDH基因包含一个1008 bp的开放阅读框,编码335个氨基酸,该氨基酸序列与中华蜜蜂高度相似(96.4%),并存在13个磷酸化位点、2个乳酸脱氢酶功能域,是一种稳定的疏水性蛋白。qRT-PCR结果表明,amLDH基因在不同级型、不同发育时期的表达差异显著(P<0.05)。工蜂卵期3日龄、雄蜂卵期3日龄、蜂王幼虫期4日龄表达最高,蜂王和雄蜂预蛹期至红眼蛹期表达均高于工蜂。本研究结果推测,amLDH基因在意大利蜜蜂的生长发育以及糖酵解中发挥重要作用,该研究结果能够为进一步探讨amLDH在意大利蜜蜂生殖发育中的功能提供理论依据。
- 欧阳霞辉郑天宇徐文凯郑相相
- 关键词：乳酸脱氢酶生物信息学分析意大利蜜蜂荧光定量
- 外源双链RNA与抗病毒效应的研究进展
- 2017年
- 对于大多数病毒来说,只要其侵染宿主细胞往往会在复制自身子代基因序列的过程中产生一种中间产物,双链RNA。起初,研究人员认为双链RNA是一种毒素,但是随着研究的深入进行,发现双链RNA是一种高效的干扰素诱导剂,可以作为免疫调节因子或者相应病毒的模拟分子来抵抗病毒的侵染。这就使得双链RNA具有病原体相关分子模式的特点,而且可以作为机体产生主动免疫来抗击病毒侵染的"信号灯"。双链RNA是在病毒侵染细胞后产生的,随着受感染细胞的崩解而释放到细胞外环境,从而刺激周围正常细胞产生相应的抗病毒效应。
- 徐文凯欧阳霞辉常秋燕张德荣马晓霞
- 关键词：病毒双链RNA干扰素抗病毒
- 意大利蜜蜂大龄幼虫总RNA提取方法优化被引量：2
- 2018年
- 本研究通过优化Trizol法提取了意大利蜜蜂蜂王大龄幼虫的总RNA,并利用1%琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计检测RNA质量和完整性,结果表明优化后的方法提出的总RNA质量高、完整性好。
- 徐文凯郑相相刘丽霞朱雅雯郑天宇彭小帅欧阳霞辉
- 关键词：意大利蜜蜂总RNA提取完整性
- 意大利蜜蜂amPGAM2基因的克隆、序列特征及表达分析被引量：1
- 2020年
- 【目的】磷酸甘油酸变位酶(PGAM)是糖酵解和葡萄糖异生途径中一种发挥重要作用的蛋白酶,本研究拟明确amPGAM2基因的序列特征及表达模式。【方法】以意大利蜜蜂Apismellifera为研究对象,克隆了amPGAM2基因的cDNA序列,分析了其序列特征及其在工蜂、雄蜂、蜂王的不同发育时期的表达模式。【结果】序列特征分析表明,克隆所得序列全长976 bp,包含1个完整的开放阅读框,共编码254个氨基酸。该基因核苷酸序列与中华蜜蜂Apiscerana(98.4%)高度相似,并存在15个潜在抗原表位、9个磷酸化位点和5个组氨酸磷酸酶域活性部位,属于组氨酸磷酸酶超家族,是一种二磷酸甘油酸依赖性的可溶中性稳定蛋白。荧光定量PCR结果表明,amPGAM2基因在不同品级、不同发育时期的表达差异显著(P<0.05)。工蜂卵期3日龄、幼虫期5日龄表达最高,雄蜂成虫期表达最高,蜂王幼虫期4日龄表达最高,且工蜂、雄蜂及蜂王由卵孵化成幼虫阶段和由红眼蛹羽化至成虫阶段,其表达都呈上升趋势。【结论】本研究结果推测amPGAM2基因在卵的孵化及精卵发生过程中具有重要作用,为进一步认识意大利蜜蜂生殖发育过程中的能量代谢提供理论基础。
- 欧阳霞辉彭帅徐文凯朱雪蕾郑相相陈红
- 关键词：意大利蜜蜂糖酵解荧光定量
- 意大利蜜蜂甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因amGAPDH2的cDNA克隆与序列分析被引量：1
- 2020年
- 应用RT-PCR技术克隆了意大利蜜蜂(Apis mellifera)甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因amGAPDH2,利用MEGA5.1、DNAMAN、PredictProtein和I-TASSER等软件对该基因进化关系以及其所对应的蛋白的同源性、理化性质和结构进行了预测和分析。从意大利蜜蜂cDNA文库中克隆得到了长1188 bp的amGAPDH2序列,GenBank登录号为MH152402。该序列具有完整的开放阅读框(ORF,114~1115 bp),其编码333个氨基酸。该基因编码的氨基酸序列与其它昆虫的GAPDH有较高的序列相似性(80%以上),系统进化分析表明amGAPDH2与中华蜜蜂、小蜜蜂的序列相似性最高。利用ProtParam等软件对amGAPDH2编码的蛋白质分析结果显示,amGAPDH2属于不稳定、亲水性蛋白;二级结构属于混合型,Helix占25.53%、Strand占24.62%、Loop占49.85%;am GAPDH2具有两个保守结构域:一个是N端的NAD(P)结合结构域,另一个是C端的催化结构域Gp_dh_C。该研究为后期amGAPDH2基因的生理功能研究提供了理论依据。
- 欧阳霞辉徐文凯刘丽霞臧荣鑫罗前罗鹏辉
- 关键词：意大利蜜蜂甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因克隆
