吴兰
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- Tat-p21融合蛋白的表达及其在A549细胞中的活性研究
- 2013年
- 在本研究中,通过分子克隆的手段,将编码Tat跨膜转运结构域的CDS与人野生型p21蛋白的CDS相连接,并通过原核表达系统表达纯化相应蛋白;然后用该蛋白按浓度梯度:100,200,400,800,1000nmol/L与A549细胞共同孵育,各浓度在10,60,120,240min终止反应,通过Western Blotting检测进入细胞的p21蛋白量,以此确定最佳的转导条件;接着检测了转导进入A549细胞的Tat-p21融合蛋白在细胞中稳定存在的时间.然后通过绘制细胞生长曲线的方法比较了转导Tat-p21的细胞与负对照实验组生长速度的区别.结果发现,融合Tat跨膜结构域的p21蛋白能够高效进入A549细胞,并在细胞内发挥相应生物学功能,使细胞的生长受到抑制,增殖减慢;而作为负对照的p21蛋白则无相应功能.
- 施慧敏吴兰赵梓亦吴传芳
- 关键词：TATP21蛋白A549细胞
- 融合蛋白TAT-p53-MTS的促细胞凋亡作用被引量：2
- 2015年
- 本研究首先构建了融合蛋白TAT-p53-MTS的原核表达质粒pET-22b(+)-TATp53-MTS,将表达纯化的融合蛋白与p53缺陷型人肺癌细胞NCI-H1299孵育,通过Western blot和免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,co-IP)检测融合蛋白的细胞穿膜以及与Bcl-2蛋白的相互作用,并通过流式细胞术检测融合蛋白对NCI-H1299细胞的促凋亡作用.结果显示,融合TAT和MTS的p53重组蛋白具有更强的细胞穿膜及线粒体定位能力;并且,融合蛋白能够通过与Bcl-2蛋白的结合显著诱导NCI-H1299细胞的凋亡.
- 吴兰赵梓亦李灵
- 关键词：P53细胞凋亡MTSTAT
