沈秋云
- 作品数：6 被引量：6H指数：1
- 供职机构：江南大学食品学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- β-半乳糖苷酶转糖苷反应及反应产物结构解析
- 本文对来源于乳酸克鲁维酵母的β-半乳糖苷酶的转糖苷反应进行了研究,以果糖作为半乳糖基受体合成益生元低聚糖。本研究发现,除了目前已知的乳果糖外,另一种二糖也是主要反应产物,并首次对其特性进行表征。反应液进行分离纯化后,根据...
- 沈秋云杨瑞金华霄赵伟
- 关键词：Β-半乳糖苷酶乳果糖
- 纤维二糖差向异构酶在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究被引量：5
- 2016年
- 首先将来源于Caldicellulosiruptor saccharolyticus的纤维二糖差向异构酶基因CsCEm进行密码子优化,然后进行全基因合成,再将其引入到载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-Cs CEm并转化入毕赤酵母GS115,得到酵母工程菌株。经微孔板筛选、摇瓶筛选得到酶活最高的重组工程菌GS115-4-19。该菌株经甲醇诱导144 h后,摇瓶发酵液上清酶活达到0.42 U/m L。酶学性质研究结果表明：该酶的最适pH为7.5,且在pH 6.0~8.0范围内相对酶活都在80%以上;在pH 4~9的缓冲液中放置24 h后仍保持原酶活力的80%以上;最适温度为80℃,在60℃~80℃保温30 min后,相对酶活在80%以上。动力学研究结果表明该酶对底物乳糖的Km和Vmax分别为（120.27±9.96）mmol/L和（1.035±0.05）mmol/L/min。纤维二糖差向异构酶在毕赤酵母中的成功表达为生物酶法合成乳果糖提供了重要参考。
- 韩亮杨瑞金赵伟沈秋云张文斌华霄
- 关键词：毕赤酵母
- 透性化纤维二糖差向异构酶细胞催化乳糖生产乳果糖
- Caldicellulosiruptor saccharolyticus纤维二糖差向异构酶(CsCE)能够催化单一底物乳糖异构化生成乳果糖,是目前已知的酶法合成乳果糖中最为高效的酶。而全细胞生物催化剂相较于游离酶,在很多...
- 汪明明杨瑞金华霄沈秋云张文斌赵伟
- 关键词：乳果糖乙醇
- 文献传递
- 纤维二糖差向异构酶的固定化研究
- Caldicellulosiruptor saccharolyticus纤维二糖差向异构酶(CsCE)是目前乳果糖酶法生产中最高效的酶,但游离酶在工业生产中存在诸多不足。本文旨在建立一种快速、简单和经济的CsCE固定化方...
- 汪明明杨瑞金华霄沈秋云张文斌赵伟
- 关键词：絮凝固定化酶
- 文献传递
- 乳糖诱导纤维二糖差向异构酶的表达及热处理纯化被引量：1
- 2015年
- 以Caldicellulosiruptor saccharolyticus纤维二糖差向异构酶(Cs CE)高效表达菌株E.coli BL21(DE3)为表达载体,研究乳糖替代异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导Cs CE表达的效果。结果表明,在菌体培养至OD600=0.6时加入终浓度为10 g/L的乳糖,25℃下诱导20 h,最终发酵液中Cs CE酶活达801 U/L,较最优条件下IPTG诱导的酶活力提高1.4倍,粗酶液的比酶活提高37%。然后,根据Cs CE的热稳定性,采用热处理工艺对粗酶液进行纯化。经70℃、2 h热处理,绝大部分的杂蛋白变性沉淀,粗酶液中可溶性蛋白浓度降低85.9%,比酶活由0.89 U/mg提高到5.46 U/mg,纯化倍数达到6.14倍,酶活回收率为86.6%。乳糖诱导Cs CE的高效表达结合热处理的初步纯化工艺,为Cs CE的工业化生产提供有益的借鉴。
- 汪明明杨瑞金华霄沈秋云张文斌赵伟
- 关键词：乳果糖乳糖
- β-半乳糖苷酶转糖苷反应及反应产物结构解析
- 本文对来源于乳酸克鲁维酵母的β-半乳糖苷酶的转糖苷反应进行了研究,以果糖作为半乳糖基受体合成益生元低聚糖.本研究发现,除了目前已知的乳果糖外,另一种二糖也是主要反应产物,并首次对其特性进行表征.反应液进行分离纯化后,根据...
- 沈秋云杨瑞金华霄赵伟
- 关键词：Β-半乳糖苷酶乳果糖
