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程晨
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室
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发文基金:
江苏省科技支撑计划项目
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相关领域:
生物学
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合作作者
张玲
江南大学生物工程学院工业生物技...
王武
江南大学生物工程学院工业生物技...
辛瑜
江南大学生物工程学院工业生物技...
杨海麟
江南大学生物工程学院工业生物技...
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胆固醇氧化酶
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江南大学
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杨海麟
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张玲
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程晨
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工业微生物
年份
1篇
2012
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His-tag对胆固醇氧化酶基因在大肠杆菌中表达的影响
被引量:1
2012年
为考察组氨酸标签(His-tag)对Brevibacterium sp.DGCDC-82中胆固醇氧化酶基因(Cho-A_b)在大肠杆菌中表达的影响,将PCR扩增后得到的结构基因与pET28a(+)连接,构建重组质粒pETChoA_b(不带His-tag),pETChoA_bn(His-tag位于N端)和pETChoA_bc(His-tag位于C端)并在大肠杆菌中进行表达。对重组酶进行酶活检测,结果表明His-tag位于ChoA_6的C端和N端,COD单位体积酶活由未带标签时的1.72 U/mL分别提高到4.03 U/mL和11.36 U/mL。利用软件QuantityOne对SDS-PAGE电泳条带进行灰度分析,结果显示与不带His-tag的COD相比,His-tag位于ChoA_b的C端和N端,COD表达量由8.8%增加到16.4%与72.3%。同时菌体浓度分别提高了1.2倍和3.2倍。作为纯化标签,该研究结果对His-tag用于诊断用酶COD的分离纯化可以提供一定的理论指导。
程晨
辛瑜
张玲
王武
杨海麟
关键词:
组氨酸标签
胆固醇氧化酶
大肠杆菌
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