勾文峰
- 作品数：16 被引量：30H指数：4
- 供职机构：辽宁医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金沈阳市科技攻关计划项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ING5基因表达对胃癌细胞生长抑制作用的研究
- 目的:探讨ING5基因表达对胃癌生长抑制作用。方法:构建pEGFP-N1-ING5重组质粒,获得ING5高表达SGC-7901细胞株,分别通过CCK-8、流式细胞术、划痕、Transwell、Real time PCR、...
- 杨雪峰勾文峰赵爽申道福吴亚州李军军郑华川
- 关键词：胃癌肿瘤发生基因治疗
- 文献传递
- 胃癌组织芯片快速制备及Reg Ⅳ编码产物检测被引量：3
- 2014年
- 目的:建立快速胃癌组织芯片(tissue microarray,TMA)制作方法,探讨其在RegⅣ编码产物检测和研究中的应用。方法:收集日本富山大学医学部1993-04-20-2010-11-29胃癌石蜡标本372例和相应癌旁黏膜标本(距离癌组织>4cm)198例,应用AZUMAYA芯片机构建48阵列组织芯片,利用免疫组化和原位杂交检测RegⅣ蛋白和mRNA的原位表达。在Olympus BX41显微镜下选定切取部位,利用2mm的穿刺针切除供体蜡块,不用制备受体蜡块,直接将切除组织放入金属包埋皿的固定盒上制备48阵列芯片。结果:组织芯片经HE染色确定了组织病理学诊断,免疫组化和原位杂交均发现在肠上皮化生和黏液分泌性肿瘤细胞质中存在RegⅣ蛋白和mRNA表达。胃黏膜肠化生中RegⅣ蛋白表达为100%(63/63),高于胃炎的29.0%(27/93,χ2=73.67,P<0.001)、腺瘤的85.7%(36/42,χ2=9.54,P<0.005)和胃癌的45.2%(168/372,χ2=65.06,P<0.001)。胃癌组织中,印戒细胞癌阳性率为95.3%(41/43),高于低分化癌的27.4%(32/117),χ2=55.89,P<0.001。原位杂交发现,癌旁黏膜肠化生上皮细胞中RegⅣmRNA表达阳性率为95.2%(40/42),高于癌旁正常黏膜的38.6%(17/44,χ2=30.63,P<0.001)和胃癌的20.3%(14/69,χ2=55.74,P<0.001)。结论:制备TMA不需要制备受体蜡块,提高了TMA制作速度。异常RegⅣ表达与胃黏膜肠化生-球样异型增生-印戒细胞癌的发生途径关系密切。
- 陈说勾文峰牛哲峰赵爽郑鑫赵杨高野康雄郑华川
- 关键词：胃肿瘤组织芯片原位杂交免疫组织化学
- 胃癌组织及细胞株细胞骨架蛋白Fascin-1表达临床意义分析被引量：5
- 2014年
- 目的:分析胃癌组织及细胞株中Fascin-1蛋白表达的临床病理及预后意义。方法:从日本理化研究所获得胃癌细胞株MKN28、AGS、MKN45和KATO-Ⅲ。收集日本富山大学医学部1993-02-01-2006-10-01胃癌组织455例。利用实时PCR、蛋白质印迹法杂交或免疫组化检测胃癌细胞株(MKN28、AGS、MKN45和KATO-Ⅲ)和胃癌组织中Fascin-1mRNA和蛋白的表达,分析胃癌组织中Fascin-1蛋白表达与临床病理特征和预后的关系。结果:Fascin-1蛋白主要定位在胃癌细胞株的细胞质中,在MKN28和MKN45细胞株中呈强表达,在AGS和KATO-Ⅲ细胞中弱表达。胃癌组织中Fascin-1mRNA表达水平显著高于癌旁正常黏膜组织,t=5.267,P<0.001;Fascin-1蛋白表达与胃癌肿块大小(rs=0.116,P<0.001)、侵袭深度(rs=0.177,P<0.001)、淋巴管侵袭(rs=0.190,P=0.005)、静脉侵袭(rs=0.131,P=0.003)、淋巴结转移(rs=0.141,P=0.013)和TNM分期(rs=0.174,P<0.001)呈正相关。Cox风险比率回归模型显示,年龄(P<0.001)、侵袭深度(P<0.001)、淋巴管侵袭(P<0.001)、淋巴结转移(P<0.001)、TNM分期(P<0.001)和Lauren分型(P=0.003)为独立的预后因素。结论:Fascin-1蛋白表达在胃癌细胞株的侵袭转移过程中发挥重要作用,Fascin-1蛋白表达上调参与胃癌发生和演进过程,可以作为胃癌恶性程度和预后判断的有效分子标志。
- 勾文峰杨雪峰赵爽宋来于爱鸣高野康雄郑华川
- 关键词：胃肿瘤FASCIN-1
- 肺癌中JC病毒T抗原致瘤作用的实验研究
- 目的：研究肺癌中JC病毒T抗原的致瘤作用.方法：联合应用巢式PCR、Southern印迹杂交、RT-PCR、免疫组化、原位杂交以及原位PCR检测JCV T抗原的存在,同时免疫组化观察肺癌组织芯片的Ki-67、caspas...
- 高博文勾文峰郑华川
- 关键词：JC病毒肺肿瘤增殖细胞粘附
- ING5基因表达对胃癌细胞生长抑制作用的研究被引量：6
- 2016年
- 目的探讨ING5基因表达对胃癌生长抑制作用。方法构建p EGFP-N1-ING5重组质粒,获得ING5高表达SGC-7901细胞株,分别通过CCK-8、流式细胞术、划痕、transwell、real-time PCR、Western blot、裸鼠成瘤实验、免疫组化检测并比较SGC-7901细胞与克隆细胞增殖率、周期与凋亡、迁移与侵袭、m RNA、裸鼠成瘤大小以及相关蛋白表达。结果与SGC-7901组及Mock组比较,转染p EGFP-N1-ING5后,胃癌SGC-7901细胞增殖显著抑制(P<0.05),凋亡减少(P<0.05),G1期比例增加,G2期比例下降(P<0.05),迁移与侵袭能力减弱(P<0.05),NF-κB、PI3K、p-Akt1/2/3、Bcl-2、XIAP、β-catenin、c-myc m RNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05);Akt1/2/3、MMP9 m RNA及蛋白表达降低(P<0.05)。结论 ING5基因表达降低胃癌SGC-7901细胞株增殖、减少凋亡、发生G1期阻滞、抑制其迁移与侵袭、有效调控增殖、周期、黏附相关基因与蛋白的表达,从而抑制胃癌的演进与发展。
- 杨雪峰勾文峰赵爽申道福吴亚州李君君郑华川
- 关键词：胃癌肿瘤发生基因治疗
- 晶状体自发肿瘤转基因鼠脑横截面标本制备及鉴定被引量：4
- 2012年
- 目的确定JCV T抗原诱发晶状体肿瘤转基因鼠脑中肿瘤来源及路径。方法 18月龄转基因鼠麻醉后4%多聚甲醛灌流固定,EDTA脱钙颅骨软化后脑经横截制备石蜡标本并进行HE染色。免疫组化和免疫荧光确定脑组织T抗原表达。结果经过脱钙处理后颅骨组织非常软,横截后发现白色肿瘤组织蔓延至脑组织中,HE染色确定眼部和脑部白色组织均为晶状体肿瘤细胞,免疫组化和免疫荧光结果显示细胞核中存在T抗原强阳性表达。结论 JCV T抗原诱发晶状体肿瘤是经过视神经孔进入脑组织,鼠头横截面组织标本制备对研究头部肿瘤的毗邻关系和肿瘤组织在脑组织中侵袭部位极具应用价值。
- 王建平张梅英勾文峰高野康雄郑华川
- 关键词：转基因鼠T抗原
- JC病毒T抗原诱发恶性上皮肿瘤组织特异性的研究
- 目的:JC病毒（JCV）是一种多瘤病毒,被证实参与进行性多灶性白质脑病及一些恶性肿瘤的发生。本研究旨在探讨JCV T抗原在恶性上皮肿瘤发生中的作用。方法:收集22例胃癌及癌旁组织、10例正常胃粘膜和103例肺癌组织及18...
- 勾文峰杨雪峰申道福赵爽常兴胜吴亚州李君君郑华川
- 关键词：JC病毒T抗原转基因鼠
- 文献传递
- 电动冻结破碎法提取组织蛋白和RNA的实验观察被引量：2
- 2014年
- 随着肿瘤分子生物学研究的不断深入，检测肿瘤组织中mRNA和蛋白的表达有助于揭示肿瘤的发生、分子机制和寻找相关分子标志物。转录水平上可利用RT—PCR或cDNA芯片技术检测基因表达、转录组改变以及克隆肿瘤相关基因。蛋白水平上可利用Western blot法、2D电泳和飞行质谱技术检测肿瘤组织中蛋白表达和蛋白质学改变。这对提高检测敏感度和增加结果可信性，获得高质量RNA或蛋白样品十分关键。
- 赵爽勾文峰杨雪峰宋来郑华川
- 关键词：冷冻粉碎WESTERNBLOT蛋白RNA
- JC病毒T抗原诱发自发肿瘤转基因动物模型建立
- 目的：利用细胞角蛋白19 (K19)启动子构胃粘膜上皮细胞中JCV T抗原表达转基因鼠,试图建立胃粘膜自发肿瘤动物模型.方法：利用限制性内切酶NdeI酶切K19-JCV T抗原表达质粒,电泳分离带有K19启动子的T抗原核...
- 勾文峰郑华川
- 关键词：JC病毒T抗原转基因鼠肺肿瘤
- B细胞易位基因1在BGC823胃癌细胞株中的表达及其对细胞周期、凋亡及迁移的影响
- 2016年
- 目的检测B细胞易位基因(B-cell translocation gene 1,BTG1)在BGC823胃癌细胞中的过表达对其周期、凋亡及迁移的影响。方法采用脂质体法将pc DNA3.1-BTG1重组质粒转染细胞,经过筛选得到稳定表达细胞株后,分为含BTG1质粒组、空载体组和空白对照组,采用Western-blot检测BTG1蛋白在BGC823细胞株中的表达,采用流式细胞术及划痕实验观察BTG1对BGC823细胞周期、凋亡及迁移的影响。结果与空载体组、空白对照组相比,BTG1组蛋白表达增高(P<0.05);流式细胞术显示,BTG1组G2/M期细胞数明显高于其他组(21.38%、18.47%vs 8.57%、8.74%,P<0.05),同时早期凋亡和总凋亡率显著增高(3.41%、3.05%vs 1.32%、0.87%和6.12%、8.30%vs 3.17%、2.34%,P<0.05)。结论 BTG1高表达,诱导G2/M阻滞,抑制细胞增殖,提高凋亡率。
- 刘娜娜李静勾文峰安鼎伟
- 关键词：BGC823细胞周期细胞迁移
