杨雪峰
- 作品数：10 被引量：29H指数：4
- 供职机构：辽宁医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金沈阳市科技攻关计划项目辽宁省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Beclin1表达在胃癌发生和演进中的临床病理意义及作用机制被引量：8
- 2015年
- 目的阐明胃癌发生和演进过程中Beclin 1表达的临床病理意义和分子作用机制。方法胃癌细胞MKN28转染Beclin 1表达质粒,利用CCK-8试剂盒和碘化丙啶染色检测细胞增殖和周期。利用原位杂交和免疫组化检测组织芯片上胃癌、癌旁黏膜和淋巴结转移灶中Beclin 1 m RNA和蛋白的表达,比较其与胃癌发生、临床病理特征和预后的关系。结果 Beclin 1过表达可以抑制胃癌细胞MKN28增殖并导致细胞周期G2期阻滞,胃癌中Beclin 1 m RNA表达高于癌旁黏膜(P<0.05),Beclin 1蛋白表达与胃癌远处转移呈负相关(P<0.05),Beclin 1表达病例多见于老年男性(P<0.05),弥漫型胃癌中Beclin 1表达低于肠型和混合型(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,Beclin 1表达与胃癌良好预后呈正相关(P<0.05)。结论 Beclin 1表达与胃癌发生、转移和分化关系密切,可以作为胃癌患者的预后因素和基因治疗的靶标。
- 郑华川申道福杨雪峰时帅高阳赵爽张文陆
- 关键词：胃癌BECLIN1疾病发生演进
- ING5基因表达对胃癌细胞生长抑制作用的研究
- 目的:探讨ING5基因表达对胃癌生长抑制作用。方法:构建pEGFP-N1-ING5重组质粒,获得ING5高表达SGC-7901细胞株,分别通过CCK-8、流式细胞术、划痕、Transwell、Real time PCR、...
- 杨雪峰勾文峰赵爽申道福吴亚州李军军郑华川
- 关键词：胃癌肿瘤发生基因治疗
- 文献传递
- ING5基因表达对胃癌细胞生长抑制作用的研究被引量：6
- 2016年
- 目的探讨ING5基因表达对胃癌生长抑制作用。方法构建p EGFP-N1-ING5重组质粒,获得ING5高表达SGC-7901细胞株,分别通过CCK-8、流式细胞术、划痕、transwell、real-time PCR、Western blot、裸鼠成瘤实验、免疫组化检测并比较SGC-7901细胞与克隆细胞增殖率、周期与凋亡、迁移与侵袭、m RNA、裸鼠成瘤大小以及相关蛋白表达。结果与SGC-7901组及Mock组比较,转染p EGFP-N1-ING5后,胃癌SGC-7901细胞增殖显著抑制(P<0.05),凋亡减少(P<0.05),G1期比例增加,G2期比例下降(P<0.05),迁移与侵袭能力减弱(P<0.05),NF-κB、PI3K、p-Akt1/2/3、Bcl-2、XIAP、β-catenin、c-myc m RNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05);Akt1/2/3、MMP9 m RNA及蛋白表达降低(P<0.05)。结论 ING5基因表达降低胃癌SGC-7901细胞株增殖、减少凋亡、发生G1期阻滞、抑制其迁移与侵袭、有效调控增殖、周期、黏附相关基因与蛋白的表达,从而抑制胃癌的演进与发展。
- 杨雪峰勾文峰赵爽申道福吴亚州李君君郑华川
- 关键词：胃癌肿瘤发生基因治疗
- 胃癌组织及细胞株细胞骨架蛋白Fascin-1表达临床意义分析被引量：5
- 2014年
- 目的:分析胃癌组织及细胞株中Fascin-1蛋白表达的临床病理及预后意义。方法:从日本理化研究所获得胃癌细胞株MKN28、AGS、MKN45和KATO-Ⅲ。收集日本富山大学医学部1993-02-01-2006-10-01胃癌组织455例。利用实时PCR、蛋白质印迹法杂交或免疫组化检测胃癌细胞株(MKN28、AGS、MKN45和KATO-Ⅲ)和胃癌组织中Fascin-1mRNA和蛋白的表达,分析胃癌组织中Fascin-1蛋白表达与临床病理特征和预后的关系。结果:Fascin-1蛋白主要定位在胃癌细胞株的细胞质中,在MKN28和MKN45细胞株中呈强表达,在AGS和KATO-Ⅲ细胞中弱表达。胃癌组织中Fascin-1mRNA表达水平显著高于癌旁正常黏膜组织,t=5.267,P<0.001;Fascin-1蛋白表达与胃癌肿块大小(rs=0.116,P<0.001)、侵袭深度(rs=0.177,P<0.001)、淋巴管侵袭(rs=0.190,P=0.005)、静脉侵袭(rs=0.131,P=0.003)、淋巴结转移(rs=0.141,P=0.013)和TNM分期(rs=0.174,P<0.001)呈正相关。Cox风险比率回归模型显示,年龄(P<0.001)、侵袭深度(P<0.001)、淋巴管侵袭(P<0.001)、淋巴结转移(P<0.001)、TNM分期(P<0.001)和Lauren分型(P=0.003)为独立的预后因素。结论:Fascin-1蛋白表达在胃癌细胞株的侵袭转移过程中发挥重要作用,Fascin-1蛋白表达上调参与胃癌发生和演进过程,可以作为胃癌恶性程度和预后判断的有效分子标志。
- 勾文峰杨雪峰赵爽宋来于爱鸣高野康雄郑华川
- 关键词：胃肿瘤FASCIN-1
- JC病毒T抗原诱发恶性上皮肿瘤组织特异性的研究
- 目的:JC病毒（JCV）是一种多瘤病毒,被证实参与进行性多灶性白质脑病及一些恶性肿瘤的发生。本研究旨在探讨JCV T抗原在恶性上皮肿瘤发生中的作用。方法:收集22例胃癌及癌旁组织、10例正常胃粘膜和103例肺癌组织及18...
- 勾文峰杨雪峰申道福赵爽常兴胜吴亚州李君君郑华川
- 关键词：JC病毒T抗原转基因鼠
- 文献传递
- 电动冻结破碎法提取组织蛋白和RNA的实验观察被引量：2
- 2014年
- 随着肿瘤分子生物学研究的不断深入，检测肿瘤组织中mRNA和蛋白的表达有助于揭示肿瘤的发生、分子机制和寻找相关分子标志物。转录水平上可利用RT—PCR或cDNA芯片技术检测基因表达、转录组改变以及克隆肿瘤相关基因。蛋白水平上可利用Western blot法、2D电泳和飞行质谱技术检测肿瘤组织中蛋白表达和蛋白质学改变。这对提高检测敏感度和增加结果可信性，获得高质量RNA或蛋白样品十分关键。
- 赵爽勾文峰杨雪峰宋来郑华川
- 关键词：冷冻粉碎WESTERNBLOT蛋白RNA
- 头颈部鳞癌中α-catulin表达的临床病理和预后意义被引量：2
- 2015年
- 目的细胞骨架连接蛋白α-catulin是Rho信号通路组件之一,在癌细胞凋亡、抗衰老、细胞骨架重组、迁移、侵袭和上皮细胞间质转化(EMT)过程中发挥重要作用。探讨头颈部鳞癌中α-catulin表达的临床病理和预后意义。方法采用免疫组化方法检测α-catulin在头颈部鳞状上皮癌(HNSCC)组织芯片中的表达,分析其和临床病理学特征及生存率的关系。结果α-catulin在HNSCC原发癌中的表达比正常和异型增生的鳞状上皮细胞显著增高(P<0.05),但是和HNSCC的恶性生物学行为和不良预后无明显相关(P>0.05)。Cox比例风险回归分析结果显示远处转移和TNM分期是HNSCC的独立预后因素(P<0.05)。结论上调α-catulin的表达在HNSCC病因学上具有重要意义,可作为研究HNSCC肿瘤发生的分子靶标。
- 邱波张卓申道福杨雪峰郑华川高野康雄黄克强
- 关键词：头颈部鳞癌肿瘤发生病理生物学行为预后
- 辛二酰苯胺异羟肟酸对人卵巢癌细胞恶性表型的抑制作用被引量：1
- 2016年
- 目的 探讨辛二酰苯胺异羟肟酸（SAHA）对人卵巢癌细胞恶性表型的作用及其可能的分子作用机制。方法（1）选取2组人卵巢癌细胞（SKOV3和SKOV3/DDP;HO8910和HO8910-PM）后,设置对照组和终浓度为1、3、5及7μmol/L SAHA组（SAHA 1~4组）,采用CCK-8法分别检测SAHA对细胞增殖的影响。（2）设置对照组和SAHA 1、2组（2和5μmol/L）,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术分别检测SAHA对细胞凋亡及周期的影响。（3）RT-PCR和Western blot检测SAHA 1~4组表型相关蛋白的表达水平。结果 （1）随着SAHA浓度的增加,SKOV3细胞株SKOV3/DDP及HO8910细胞株48 h光密度（OD）值均呈逐渐降低趋势（均P〈0.05）。（2）48 h SAHA 1、SAHA 2组凋亡率高于对照组（均P〈0.05）;SAHA作用48 h,细胞周期发生阻滞,与对照组比较,SAHA 1组和SAHA 2组SKOV3和SKOV3/DDP细胞S期和G2/M期比例增高,HO8910和HO8910-PM细胞G0/G1期比例增高（P〈0.05）。（3）SAHA 1、2组Cyclin B1和Cdc2（p34）的m RNA表达水平均低于对照组,Caspase-3、p21和p53的m RNA表达水平明显高于对照组（P〈0.05）;SAHA 1~4组Ac-Histone H3和Ac-Histone H4和p53蛋白的表达较对照组明显增强,Cyclin B1、Cdc2（p34）蛋白的表达减弱。结论 SAHA通过调节恶性表型相关蛋白Caspase-3、p53、Cyclin B1和Cdc2（p34）的表达水平,促进组蛋白乙酰化,抑制卵巢癌细胞增殖,阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡。
- 常兴胜郑华川赵爽勾文峰杨雪峰刘晓娟
- 关键词：卵巢肿瘤恶性表型组蛋白乙酰化
- 胃癌中BTG3表达的临床病理意义及抑瘤作用的机制被引量：6
- 2015年
- 目的研究胃癌中BTG3表达的临床病理意义,揭示BTG3对胃癌细胞恶性表型的逆转作用。方法采用联合组织芯片和免疫组化检测胃癌中BTG3表达,胃癌细胞MKN28和MGC803过表达BTG3,分别利用CCK-8、PI染色、碱性磷酸酶活性测定和GFP-LC-3B转染观察细胞增殖、细胞周期、分化和自噬。结果 BTG3过表达可以抑制胃癌细胞增殖、诱导细胞周期S/G2期阻滞、分化和自噬(P<0.05),胃癌组织中BTG3表达下调(P<0.05),BTG3表达与胃癌静脉侵袭和去分化呈正相关(P<0.05)。结论BTG3表达下调参与胃癌发生和演进过程,BTG3过表达可以逆转胃癌恶性表型,可以作为胃癌基因治疗的潜在靶点。
- 郑华川申道福杨雪峰勾文峰赵爽张文陆
- 关键词：胃癌肿瘤发生病理生物学行为基因治疗
- JC病毒T抗原诱发肺肿瘤转基因动物模型检测
- 2014年
- 目的:利用细胞角蛋白19(K19)启动子构建胃黏膜上皮细胞中JC病毒(John Cunningham virus,JCV)T抗原表达转基因鼠,试图建立胃黏膜自发肿瘤动物模型。方法:利用限制性内切酶NdeⅠ,酶切K19-JCV T抗原表达质粒,电泳分离带有K19启动子的T抗原核酸序列后,显微注射入C57BL/6J30只小鼠受精卵中。PCR检测转基因阳性鼠,组织学观察主要脏器的形态学表现及免疫组化检测T抗原表达。结果:显微注射K19-JCV T抗原(KT)DNA片段后成功获得11种转基因阳性鼠,其中2个月龄KT7的各脏器组织学检测显示,脑、肝、肾、食管、前胃、胃、小肠、大肠、胰腺、肺、心脏和脾组织未见异常形态学改变,JCV T抗原特异表达于胃黏膜上皮细胞和支气管上皮细胞的细胞核中,16个月龄的KT7转基因鼠13.3%(2/15)出现肺肿瘤和腺癌的病理学改变,T抗原定位于癌细胞细胞核中。结论:JCV T抗原直接诱发肺肿瘤动物模型的建立为JCV T抗原嵌入所致上皮肿瘤提供了直接的实验依据,为JCV所致上皮肿瘤发生和演进分子机制奠定基础,同时为抗肿瘤药物筛选及基因治疗监控提供了良好的动物模型。
- 勾文峰赵爽宋来杨雪峰郑鑫高野康雄郑华川
- 关键词：JC病毒T抗原转基因鼠肺肿瘤
