潘子瑶
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：辽宁大学生命科学院更多>>
- 发文基金：辽宁省科学技术计划项目国家自然科学基金沈阳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- PTD-Apoptin原核表达载体构建及可溶性表达被引量：2
- 2013年
- 目的:可溶性表达PTD-Apoptin融合蛋白。方法:亚克隆Apoptin基因并人工合成PTD序列,构建原核表达载体pGEX-6p-1-PTD-Apoptin,使载体在E.coli BL21(DE3)中表达并优化。GST亲和纯化天然状态的融合蛋白,并通过MTT实验验证活性。结果:最佳表达条件是25℃、0.1mmol/mL IPTG过夜诱导表达,经GST亲和纯化得到天然状态的单一组分融合蛋白,与胃癌823细胞共孵育后细胞存活率为10.86%,与对照组相比具显著差异。结论:成功获得高生物活性的原核可溶性表达融合蛋白PTD-Apoptin,使胃癌823细胞存活率降至10.86%。
- 贲松彬潘子瑶刘雪梅崔剑谷海峰李其久陈长兰
- 关键词：APOPTIN可溶性表达BL21(DE3)MTT
- 果蝇硒蛋白dSelK基因重组腺病毒构建与表达
- 2014年
- 目的:利用AdEasy腺病毒载体系统构建果蝇硒蛋白dSelK基因重组腺病毒并在AD-293细胞中包装扩增。方法:PCR扩增dSelK目的片段连接到穿梭载体pShuttle-CMV上,用电转化法将线性化的pShuttle-CMV-dSelK穿梭载体转入含腺病毒骨架质粒AdEasy1的BJ5183大肠杆菌电感受态细胞中,构建重组腺病毒载体AdEasy-dSelK,线性化后转染AD-293细胞进行包装,并传代扩增,TCID50法测病毒滴度,Western blot鉴定。结果:成功构建腺病毒载体AdEasy-dSelK,经AD-293细胞包装扩增得到重组腺病毒,滴度为107.5。Western blot鉴定AdEasy-dSelK成功表达。结论:成功构建重组腺病毒载体pAdEasy-dSelK,为硒蛋白功能研究奠定基础。
- 娄虹许鑫潘子瑶张保华贲松彬陈长兰
- 关键词：硒蛋白腺病毒病毒滴度
