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宋云峰

作品数：1 被引量：8H指数：1
供职机构：广州军区广州总医院更多>>
发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇低氧
  • 1篇低氧诱导
  • 1篇低氧诱导因子
  • 1篇低氧诱导因子...
  • 1篇低氧诱导因子...
  • 1篇点突变
  • 1篇定点突变
  • 1篇血管
  • 1篇血管新生
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达载体
  • 1篇基因
  • 1篇核表达
  • 1篇Α基因

机构

  • 1篇广州军区广州...
  • 1篇南方医科大学...

作者

  • 1篇傅锐斌
  • 1篇吴平生
  • 1篇修建成
  • 1篇邱建
  • 1篇李建华
  • 1篇戴铁英
  • 1篇宋云峰

传媒

  • 1篇第一军医大学...

年份

  • 1篇2005
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
突变低氧诱导因子1_α基因真核表达载体的构建和表达被引量：8
2005年
目的构建人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α的两种突变体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala和pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala-803Ala,并检测它们在人肺微血管内皮细胞(HMVECs)中的表达。方法用定点突变的方法将pcDNA3.1+-HIF-1α的HIF-1α第564位脯氨酸(Pro)密码子CCC突变为丙氨酸(Ala)密码子GCC,构建成单个突变HIF-1α真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala。在第一次突变的基础上,仍然用定点突变的方法将pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala的HIF-1α-564Ala第803位天冬酰胺(Asn)密码子ATT突变为丙氨酸(Ala)密码子GCT,构建成双个点突变HIF-1α真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala-803Ala。将3种HIF-1α表达载体用脂质体法分别转入HMVECs,以RT-PCR、免疫荧光法和Westernblotting法分别对转染细胞进行表达分析。结果测序证实,定点突变成功,构建成重组真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala和pcDNA3.1+-HIF-1α-564Ala-803Ala;3种载体均能表达相应的蛋白和mRNA,但转化突变HIF-1α表达载体的细胞蛋白量比空白细胞和转化无突变HIF-1α载体的细胞显著增加。结论成功构建能够在HMVECs中表达的单个和双个点突变的HIF-1α基因的真核表达载体。
傅锐斌吴平生宋云峰邱建戴铁英李建华修建成
关键词：低氧诱导因子-1Α定点突变真核表达载体血管新生
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