刘亮
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：哈尔滨医科大学药学院更多>>
- 发文基金：哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高免疫原性骨桥蛋白的构建、表达及鉴定
- 2013年
- 目的重组及表达高免疫原性骨桥蛋白（OPN）的融合蛋白。方法使用Lasergene软件分析OPN基因，选取出免疫原性高的区域作为目的片段。提取总RNA，应用逆转录、PCR等技术扩增OPN基因目的片段，将其分别与带有His标签的pET-32a及GST标签的pGEX-4T-1载体连接。构建表达载体，诱导表达OPN融合蛋白（分别含有His，GST—Tag），并进行SDS—PAGE及Western blotting鉴定。结果扩增后获得一条351bp的DNA片段，经测序鉴定为目的片段序列，并实现了可溶性高表达，经Western blotting鉴定为高免疫原性OPN融合蛋白。结论采用原核表达经纯化后可获得高纯度高免疫原性的OPN融合蛋白，为进一步开发OPN诊断试剂打下基础。
- 汤伟松孟琴刘亮李淑珍唐晓波
- 关键词：骨桥蛋白肝癌
- 人结合珠蛋白cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达和鉴定
- 2014年
- 目的:克隆人结合珠蛋白(haptoglobin,Hp)cDNA,并在大肠杆菌中表达和鉴定。方法:从Hela细胞中分离总RNA,采用RT-PCR方法获得人Hp cDNA,分别克隆至原核表达载体pET-32a和PGEX-4T-1,转化至大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果:成功构建了高效原核表达质粒PET-32a-Hp和PGEX-4T1-Hp;Western印迹结果表明,经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达了分子量约30 kD和37 kD的目的蛋白;表达产物经Ni2+-NTA离子交换树脂纯化,纯度>90%。结论:在E.coli成功表达和纯化了人Hp融合蛋白,为进一步开发人Hp诊断试剂打下基础。
- 孟琴汤伟松刘亮李淑珍唐晓波
- 关键词：卵巢癌克隆纯化
- 12/15脂氧酶在脑卒中的作用研究进展被引量：1
- 2016年
- 脂氧合酶(LOX)是一类广泛存在于动植物中的非血红素铁蛋白,催化底物生成各种类花生酸物质,与人体的肿瘤、哮喘、炎症、动脉硬化等疾病密切相关。12/15脂氧酶(12/15-LOX)是一种脂质过氧化物酶,可以催化亚油酸,花生四烯酸等多不饱和脂肪酸生成具有生物活性的代谢产物,通过信号转导在许多病理生理过程中发挥着重要的作用,有研究表明,12/15-LOX通路可以刺激炎症因子的产生,参与多种炎性反应,而在脑卒中的发生发展以及病理过程中始终伴随的炎性反应,炎症及细胞因子等对脑卒中有一定的影响,在脑卒中炎症反应继发性脑组织损伤病理发展过程中起着重要的作用。因此,研究12/15-LOX与脑卒中炎症的关系,可以为临床治疗脑卒中提供新的靶点。本文就12/15-LOX在脑卒中后炎症反应中的作用做简要介绍。
- 刘亮王舒唐晓波
- 关键词：脑卒中炎症
