张爱琼 作品数:29 被引量:109 H指数:6 供职机构: 贵州大学动物科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
PCV-3/CN/Guizhou/ASXX/2017321株全基因组克隆与序列分析 2019年 为了获得猪圆环病毒3型(PCV-3)全基因组克隆及序列,试验采用PCR技术,应用PCV-3全基因组特异性引物,对PCV-3阳性的腹泻仔猪肠内容物进行了PCV-3基因组的扩增和克隆测序,并运用DNAStar、MEGA5等软件对该PCV-3基因组序列进行了比对分析。结果表明:扩增克隆得到1株PCV-3分离株,命名为PCV-3/CN/Guizhou/ASXX/2017321株,全基因组大小为2 000 bp,其ORF2大小为645 bp,且存在多处碱基突变。与国外PCV-3毒株相比,全基因组核苷酸序列相似性为98. 7%~99. 0%;与国内毒株相比,全基因组核苷酸序列相似性为97. 3%~99. 7%;与PCV-2毒株相比,全基因组核苷酸序列相似性仅为47. 3%~48. 3%,差异性较大。基于PCV-3基因组核苷酸序列的遗传进化分析结果表明,PCV-3/CN/Guizhou/ASXX/2017321株与国内PCV-3 Chongqing-147/2016株(KY075990)、Jiangxi-62/2016 (KY075989)株、Jiangxi-3/2016 (MF589106)株,与国外US/SD/2016(KX966193)株处于同一独立的进化分支,亲缘关系较近;与其他国内外PCV-3毒株则处于不同的进化分支,亲缘关系较远。根据PCV-3 Cap蛋白第24位和第27位氨基酸序列特征可知,PCV-3/CN/Guizhou/ASXX/2017321株属于PCV-3c基因型。说明贵州省猪群中存在PCV-3,且分离得到的PCV-3/CN/Guizhou/ASXX/2017321株属于PCV-3c基因型。 曾智勇 张爱琼 梁海英 何小莉 咸文 陈娟 吴好叶 黄二素关键词:CAP蛋白 PCR技术 一例仔猪渗出性皮炎的诊断与防治 被引量:8 2018年 2017年3月份,贵州省铜仁市某猪场产房仔猪发生渗出性皮炎,为确定致病菌,从病猪病变皮肤分离并纯化细菌,经形态学观察、显微镜镜检、生化特性鉴定及PCR扩增鉴定,确定为猪葡萄球菌感染。药敏试验结果表明该菌株对庆大霉素高度敏感,对新生霉素、头孢唑啉、万古霉素等中度敏感,对青霉素、阿莫西林、磺胺类药物等耐药。根据试验结果对该猪场采取治疗防控措施,1个月后未发生新病例,且发病猪痂皮基本完全脱落,皮肤破裂处逐渐愈合且可见新生毛发长出。 徐国 胡玲玲 梁海英 曾智勇 王彬 叶百川 张爱琼 咸文 何小莉关键词:仔猪 渗出性皮炎 葡萄球菌 药敏试验 某猪场CSFV、PRRSV、PCV2和PRV多重感染病例的报道 被引量:1 2017年 贵州省某种猪场一周内连续发生30余头母猪早产和(或)产死胎症状,猪场工作人员向笔者实验室送检同窝流产死胎4只。根据流行情况和临床特征,初步判断与病毒感染有关。为筛查具体病原,本实验室将送检死胎组织混合样品分别对CSFV、PRRSV、PCV2、PRV、PPV和JEV六种常见病毒进行病原核酸检测,结果显示该猪场发病猪存在CSFV、PRRSV、PCV2和PRV的多重感染。 徐国 代振江 曾智勇 叶百川 张爱琼 咸文 何小莉关键词:CSFV PRRSV PCV2 PRV 泰国在有猪呼吸道疾病综合征农场中检出猪圆环病毒3型 被引量:2 2019年 荐语:猪圆环病毒3型(PCV3)为一种新型的圆环病毒,自2016年首次发现至今,已经在许多国家检出并报道,但其致病性和致病机理尚不清楚,亟待研究。PCV3与猪皮炎肾病综合征、母猪繁殖障碍、先天性震颤和心脏多系统衰竭相关,临床特征与PCV2极为相似。为帮助养猪从业者更好地了解PCV3的相关信息,特对相关研究文献进行摘译以飨读者,并期待能有越来越多的相关研究来尽快揭示PCV3遗传特征、致病性和致病机制机理。 张爱琼 梁海英 曾智勇 Kedkovid关键词:猪圆环病毒 猪呼吸道疾病综合征 猪皮炎肾病综合征 母猪繁殖障碍 先天性震颤 致病机理 猪场疫苗免疫效果监测评估 被引量:2 2019年 猪场养殖过程中猪病的防控至关重要,疫苗免疫是综合防控的中重要环节,疫苗免疫中疫苗的质量、免疫剂量、饲养管理等因素都会影响疫苗的免疫效果。疫苗免疫效果如何,能否起到刺激机体产生有效免疫保护都需要进行免疫效果的评估,积极有效的评估方法对检验猪场的疫苗免疫效果十分重要,文章对疫苗免疫效果评估的方法进行综述,旨在为养猪从业者提供参考。 张爱琼 曾智勇 梁海英 王彬 咸文 何小莉 陈娟 吴好叶 黄二素关键词:免疫效果 ELISA检测 酶联免疫斑点检测 一例猪轮状病毒感染引发仔猪腹泻的诊断 被引量:5 2018年 为了查明贵州省黔西县某猪场仔猪持续腹泻、消瘦死亡的病因,试验采用RT-PCR法对送检样品进行猪轮状病毒、猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒检测,并对RT-PCR产物进行测序分析。结果表明:送检仔猪腹泻为猪轮状病毒感染所引起,经序列分析发现该毒株属猪A群轮状病毒,并与G10血清型位于同一遗传进化分支。说明近年来在普遍发生的猪腹泻病例中,除猪流行性腹泻病毒和传染性胃肠炎病毒外,还存在猪轮状病毒感染的情况。 张爱琼 梁海英 曾智勇 汤德元 王彬 黄涛 徐国 叶百川 咸文 何小莉关键词:猪轮状病毒 腹泻 RT-PCR 贵州省PCV2流行株的分型及遗传变异分析 被引量:3 2018年 为了解贵州省猪圆环病毒2型(PCV2)的分子流行病学及遗传变异情况,本文收集2012~2016年间16株贵州PCV2流行毒株和NCBI上报道登录的35株PCV2序列作生物信息学分析。分析结果显示,在本次所分析的各PCV2毒株之间核苷酸变异率较大的分别为ORF6(32. 22%)、ORF10(29. 63%)、ORF2(24. 11%)、ORF5(21. 60%)、ORF7(20. 00%);遗传进化表明,贵州省16株PCV2序列中3株为PCV2a型,5株为PCV2b型,8株为PCV2d型;其中PCV2d型已经逐渐过渡成为贵州省的主要流行毒株,且同种基因型之间ORF2所编码的氨基酸序列保守性相对较高。表明PCV2流行毒株之间由于基因型的不同,可能会导致免疫力或致病力的改变。该结果以期为贵州省PCV2的防控、流行病学的研究提供一定的参考。 吴好叶 徐国 梁海英 曾智勇 汤德元 王彬 黄涛 张爱琼 何小莉 咸文 陈娟关键词:基因型 ORF 生物信息学 猪血清中PCV-2全基因组的克隆与序列分析 被引量:1 2018年 为研究从猪血清中分离的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)与从发病猪组织中分离的PCV-2之间的差异、了解贵州地区PCV-2遗传变异情况、丰富贵州PCV-2全基因组序列库,试验采用来自贵州省毕节市金沙县、遵义市绥阳县、毕节市黔西县和贵阳市修文县的PCV-2抗体阳性猪血清,通过PCR扩增及通过T克隆获得了4株PCV-2全基因,分别命名为GZ-JS2015、GZSY2016、GZ-QX2014和GZ-XW2014,并进行测序;将测序结果与笔者收集的38株PCV-2的核苷酸序列进行比对分析。结果表明:在病毒血症期间猪血清中分离的PCV-2与从发病猪组织中分离的PCV-2并无太大差异;笔者收集的血清中贵州省为10株,其中8株为PCV-2b型、2株为PCV-2a型,说明在贵州地区流行的主要是PCV-2b型;来自贵州省同一地区的2株PCV-2处于不同的进化树分支上,与省外的PCV-2分离株亲缘关系较近,提示在贵州省流行的部分PCV-2可能由引种时流入。 徐国 梁海英 曾智勇 汤德元 王彬 黄涛 代振江 叶百川 张爱琼 咸文 何小莉关键词:猪血清 PCV-2 全基因组 猪圆环病毒2型疫苗的研究进展 被引量:15 2018年 猪圆环病毒2型(PCV-2)是引起猪圆环相关疾病(PCVAD)的主要病原,临床上常与其他病毒混合感染或继发细菌性感染,给养猪业造成巨大的经济损失。目前,对于PCV-2的感染,疫苗预防是最主要手段,商品化疫苗在防控上具有重要作用,但各自存在一定弱点,均不能有效清除病毒血症,疫苗效果的评价方式尚待完善。近年来,研究者在PCV-2疫苗研究方面不断探索,又有了新的研究成果。目前,临床上PCV-2d基因亚型已逐渐占据主导,现有的商品化疫苗对其免疫是否切实有效,亟待进一步研究证实。文章综述了疫苗的最新研究成果和基因型转变后的商品化疫苗免疫效果,旨在为新型疫苗的开发与利用提供参考。 张爱琼 梁海英 曾智勇 汤德元 王彬 黄涛 徐国 叶百川 咸文 何小莉关键词:猪圆环病毒2型 灭活疫苗 亚单位疫苗 免疫效果 携带分子标记的PCV1-2嵌合病毒的构建及其生物学特性的初步分析 被引量:1 2018年 为构建携带分子标记的PCV1-2嵌合病毒,本研究通过基因工程技术将V5标签引入PCV2的ORF2末端,以ORF2-V5替换PCV1的ORF2后克隆于pcDNA3.1(+)载体中,构建pcDNA-PCV1-2m-V5。为检验pcDNA-PCV1-2m-V5的体外感染性,将其转染PK-15细胞后,采用IPMA、RT-PCR等技术进行检测,结果显示:pcDNA-PCV1-2m-V5具有感染性。采集已注射pcDNA-PCV1-2m-V5质粒的小鼠血清接种于PK-15细胞,应用细胞试验、PCR技术、IFA、western blot及电镜等试验对嵌合病毒进行鉴定。结果显示:在小鼠体内拯救出PCV1-2m-V5嵌合病毒,且V5标签的引入能够很好地区分嵌合病毒和亲本病毒产生的Cap蛋白。本实验可为PCV2的感染性DNA (iDNA)疫苗研发提供素材和参考。 徐国 代振江 曾智勇 梁海英 汤德元 王彬 黄涛 叶百川 张爱琼 何小莉 咸文关键词:拯救