徐国 作品数:21 被引量:115 H指数:6 供职机构: 贵州大学动物科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省科学技术基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
一例仔猪渗出性皮炎的诊断与防治 被引量:8 2018年 2017年3月份,贵州省铜仁市某猪场产房仔猪发生渗出性皮炎,为确定致病菌,从病猪病变皮肤分离并纯化细菌,经形态学观察、显微镜镜检、生化特性鉴定及PCR扩增鉴定,确定为猪葡萄球菌感染。药敏试验结果表明该菌株对庆大霉素高度敏感,对新生霉素、头孢唑啉、万古霉素等中度敏感,对青霉素、阿莫西林、磺胺类药物等耐药。根据试验结果对该猪场采取治疗防控措施,1个月后未发生新病例,且发病猪痂皮基本完全脱落,皮肤破裂处逐渐愈合且可见新生毛发长出。 徐国 胡玲玲 梁海英 曾智勇 王彬 叶百川 张爱琼 咸文 何小莉关键词:仔猪 渗出性皮炎 葡萄球菌 药敏试验 携带分子标记的PCV1-2嵌合病毒的构建及其生物学特性的初步分析 被引量:1 2018年 为构建携带分子标记的PCV1-2嵌合病毒,本研究通过基因工程技术将V5标签引入PCV2的ORF2末端,以ORF2-V5替换PCV1的ORF2后克隆于pcDNA3.1(+)载体中,构建pcDNA-PCV1-2m-V5。为检验pcDNA-PCV1-2m-V5的体外感染性,将其转染PK-15细胞后,采用IPMA、RT-PCR等技术进行检测,结果显示:pcDNA-PCV1-2m-V5具有感染性。采集已注射pcDNA-PCV1-2m-V5质粒的小鼠血清接种于PK-15细胞,应用细胞试验、PCR技术、IFA、western blot及电镜等试验对嵌合病毒进行鉴定。结果显示:在小鼠体内拯救出PCV1-2m-V5嵌合病毒,且V5标签的引入能够很好地区分嵌合病毒和亲本病毒产生的Cap蛋白。本实验可为PCV2的感染性DNA (iDNA)疫苗研发提供素材和参考。 徐国 代振江 曾智勇 梁海英 汤德元 王彬 黄涛 叶百川 张爱琼 何小莉 咸文关键词:拯救 猪食道口线虫与猪圆环病毒2型混合感染的诊断 被引量:1 2016年 食道口线虫病是由盅口科、食道口属的线虫寄生于反刍家畜和猪的大肠所引起的一类线虫病,由于某些种类的食道口线虫的幼虫可在寄生部位的肠壁上形成结节,故又称为结节虫病。重度感染食道口线虫幼虫可使仔猪发生持续性腹泻,粪便呈暗绿色,含有多量黏液, 徐国 曾智勇 代振江 叶百川关键词:猪圆环病毒2型 食道口线虫 寄生部位 结节虫病 线虫幼虫 反刍家畜 猪血清中PCV-2全基因组的克隆与序列分析 被引量:1 2018年 为研究从猪血清中分离的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)与从发病猪组织中分离的PCV-2之间的差异、了解贵州地区PCV-2遗传变异情况、丰富贵州PCV-2全基因组序列库,试验采用来自贵州省毕节市金沙县、遵义市绥阳县、毕节市黔西县和贵阳市修文县的PCV-2抗体阳性猪血清,通过PCR扩增及通过T克隆获得了4株PCV-2全基因,分别命名为GZ-JS2015、GZSY2016、GZ-QX2014和GZ-XW2014,并进行测序;将测序结果与笔者收集的38株PCV-2的核苷酸序列进行比对分析。结果表明:在病毒血症期间猪血清中分离的PCV-2与从发病猪组织中分离的PCV-2并无太大差异;笔者收集的血清中贵州省为10株,其中8株为PCV-2b型、2株为PCV-2a型,说明在贵州地区流行的主要是PCV-2b型;来自贵州省同一地区的2株PCV-2处于不同的进化树分支上,与省外的PCV-2分离株亲缘关系较近,提示在贵州省流行的部分PCV-2可能由引种时流入。 徐国 梁海英 曾智勇 汤德元 王彬 黄涛 代振江 叶百川 张爱琼 咸文 何小莉关键词:猪血清 PCV-2 全基因组 猪圆环病毒2型疫苗的研究进展 被引量:15 2018年 猪圆环病毒2型(PCV-2)是引起猪圆环相关疾病(PCVAD)的主要病原,临床上常与其他病毒混合感染或继发细菌性感染,给养猪业造成巨大的经济损失。目前,对于PCV-2的感染,疫苗预防是最主要手段,商品化疫苗在防控上具有重要作用,但各自存在一定弱点,均不能有效清除病毒血症,疫苗效果的评价方式尚待完善。近年来,研究者在PCV-2疫苗研究方面不断探索,又有了新的研究成果。目前,临床上PCV-2d基因亚型已逐渐占据主导,现有的商品化疫苗对其免疫是否切实有效,亟待进一步研究证实。文章综述了疫苗的最新研究成果和基因型转变后的商品化疫苗免疫效果,旨在为新型疫苗的开发与利用提供参考。 张爱琼 梁海英 曾智勇 汤德元 王彬 黄涛 徐国 叶百川 咸文 何小莉关键词:猪圆环病毒2型 灭活疫苗 亚单位疫苗 免疫效果 PCV-2 GZ-BJJS2015株感染性克隆质粒的构建 被引量:1 2018年 为了解贵州地区猪圆环病毒2型(PCV-2)的遗传变异情况,丰富贵州省PCV-2的病毒库,试验应用PCR反向遗传操作技术构建感染性克隆质粒,从送检的病毒血症样品中拯救获得1株PCV-2毒株,将其命名为PCV-2 GZ-BJJS2015,并进行测序及比对分析。结果表明:该病毒基因组大小为1 767 bp,属于PCV-2b型;与参考株pmws(AF027217)相比,其ORF5在1 042位缺失1个碱基T,ORF9在第92位发生基因突变,致使ORF9不能编码蛋白;ORF5与病毒毒力有一定关系,其变异可能会影响毒株毒力,ORF9不编码蛋白的意义有待考究。根据强弱毒株特征性氨基酸位点的差异比较结果,可初步推测该毒株为PCV-2强毒株。 咸文 梁海英 曾智勇 王彬 刘钊 徐国 叶百川 张爱琼 何小莉关键词:猪圆环病毒2型 反向遗传操作技术 病毒拯救 某猪场PRRSV与PCV2双重感染的诊断 被引量:2 2017年 2017年2月,贵州某猪场发生以仔猪皮炎和持续性腹泻为特征的临床病例。为查明病因,送检发病保育仔猪2头于实验室进行病原诊断。根据流行病学情况、临床症状、病理解剖与PCR/RT-PCR检测,确诊该猪场送检保育猪存在猪蓝耳病病毒与猪圆环病毒2型的双重感染。 徐国 曾智勇 代振江 叶百川 张爱琼 咸文 何小莉关键词:PRRSV PCV2 猪圆环病毒基因组结构与功能研究进展 被引量:22 2016年 猪圆环病毒(PCV)是单链环状DNA病毒,有PCV1和PCV2两种血清型,其中PCV2严重危害着世界养猪业。PCV2因其严重的危害性和精简而高效的基因组结构引起众多国内外专家学者的广泛研究,本文参考NCBI上公布的PCV2序列绘制了PCV2基因组结构图谱,就相关基因的结构和功能进行综述,并就与病毒复制、病毒免疫原性、病毒致病力等功能相关的基因进行了归纳和总结,以期能为PCV2分子生物学和新型疫苗的研究提供参考。 代振江 王伟丞 曾智勇 汤德元 梁海英 刘钊 徐国 叶百川关键词:猪圆环病毒 基因组结构 蛋白质功能 某规模化猪场急性巴氏杆菌感染的诊治 2017年 猪巴氏杆菌病又称猪肺疫,是由多杀性巴氏杆菌引起的急性或散发性传染病,俗称“锁喉风”、“肿脖瘟”,是一种人畜共患病。2017年1月某规模化猪场发生猪急性死亡,于是猪场工作人员送检有相同临床症状的保育猪1头于实验室检测。猪场现有保育猪600头,猪群突然发病,发病率为14.7%(88/600)。 徐国 胡玲玲 曾智勇 代振江 叶百川 张爱琼 咸文 何小莉关键词:规模化猪场 急性死亡 巴氏杆菌感染 诊治 猪巴氏杆菌病 散发性传染病 V5标记的猪圆环病毒2型Cap蛋白重组杆状病毒表达载体的构建 被引量:1 2018年 试验旨在利用真核表达系统构建V5标记的猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白的表达载体。采用基因工程技术将V5标签引入到PCV2 ORF2基因C末端,并将标记基因定向克隆入pFastBacHTA载体,将pFastBacHTA-ORF2-V5重组转移载体转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,使用脂质体介导法将鉴定后的重组杆状病毒质粒转染于Sf9细胞中;运用间接免疫荧光试验(IFA)、SDS-PAGE和Western blotting试验对Sf9细胞中V5标记Cap蛋白的表达进行验证。结果显示,本试验成功将V5标签引入到PCV2 ORF2基因末端,pFastBacHTAORF2-V5重组转移载体转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞后获得了Bacmid-ORF2-V5重组杆状病毒质粒;IFA、SDS-PAGE和Western blotting试验结果显示,在Sf9细胞中能检测到重组杆状病毒V5标记的PCV2Cap蛋白,具有良好的反应原性,说明本试验成功获得一株rAcMNPV Cap-V5重组杆状病毒。试验结果为PCV2标记亚单位疫苗的研制提供一定的理论依据。 徐国 梁海英 曾智勇 王彬 黄涛 汤德元 代振江 叶百川 张爱琼 何小莉 咸文关键词:重组杆状病毒