张培
- 作品数：14 被引量：44H指数：4
- 供职机构：淮海工学院更多>>
- 发文基金：江苏省普通高校研究生科研创新计划项目江苏省“青蓝工程”基金江苏省农业科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 三疣梭子蟹线粒体基因组单核苷酸多态性被引量：2
- 2018年
- 为获得三疣梭子蟹线粒体全基因组(mt DNA)SNP突变位点,本研究针对其mt DNA全序列设计了179对引物,采用高分辨率熔解曲线(HRM)检测技术对SNP进行了筛查。在179对引物中,有89对引物具有特异性扩增结果;进一步研究表明,89对引物中共有22对引物的扩增区域含有SNP突变位点,共包含24个SNPs。统计结果显示,三疣梭子蟹线粒体基因组中的SNP分布频率为0.15/100 bp,其中转换突变比例为79.1%、颠换突变比例为16.6%;C/T(G/A)突变比率为79.1%、G/T(C/A)突变比率为8.3%、A/T突变与G/C突变的比率均各占4.16%。本研究中所获得的SNP位点分布于三疣梭子蟹线粒体基因组的11个区域,且分布不均。其中COX1基因区域的SNP数目最多,其次在D-LOOP、ND1基因区域分别为3和4个SNP位点;而t RNA、12S r RNA等其他区域尚未发现突变位点。本研究所建立的三疣梭子蟹线粒体全基因组SNP的快速筛查方法及发现的SNPs,为进一步开展三疣梭子蟹种质遗传资源多样性、增殖放流标记等方面的研究提供了分析工具。
- 赵莲李志辉李志辉薛蓓张培高焕薛蓓
- 关键词：三疣梭子蟹线粒体基因组SNP高分辨率熔解曲线
- 重金属对甲壳类毒理效应的研究进展被引量：9
- 2017年
- 从重金属在甲壳类动物体内的毒性作用机制、富集规律及对机体生理代谢的影响等几个方面综合阐述了重金属对甲壳类毒性效应的研究进展,可为更深入地开展重金属对甲壳类的毒理学研究提供指导。
- 李志辉张培阎斌伦高焕
- 关键词：重金属甲壳类毒理学
- 脊尾白虾不同发育期线粒体基因组甲基化特征分析被引量：2
- 2017年
- 为研究不同发育阶段脊尾白虾线粒体基因组表观遗传学特征,本研究在筛选硫化测序引物的基础上,对不同发育期的脊尾白虾线粒体基因组甲基化特征进行了分析。经引物筛选验证,选取了4对引物在脊尾白虾的受精卵、幼体期、仔虾期和成虾期共4个发育期进行甲基化特征的分析,结果表明,除ND5基因3′端序列(21#引物扩增区)无甲基化现象外,COX3基因的起始区序列(13#引物扩增区)、COX3基因的3′端序列(16#引物扩增区)和ND5基因5′端序列(19#引物扩增区)均存在不同程度的甲基化现象。其中,COX3基因的起始区序列仅在受精卵孵化期和幼体期存在甲基化现象,COX3基因3′端序列在除受精卵外的其他3个时期均存在甲基化现象,且以上甲基化率随个体发育阶段的提高呈下降趋势;ND5基因5′端序列在4个不同发育期均存在甲基化现象,但甲基化率无显著差异。甲基化主要发生在COX3基因和ND5基因位点上,推测脊尾白虾在生长发育过程中通过调节线粒体基因组甲基化来调节机体能量代谢过程。本研究首次从整个发育周期角度探讨了线粒体基因组甲基化特征,以期为进一步揭示甲壳类生长发育相关遗传机制提供帮助。
- 薛蓓张培张培赵莲李志辉阎斌伦赵莲
- 关键词：脊尾白虾线粒体基因组不同发育期甲基化
- 脊尾白虾GAPDH基因的克隆及其内参基因稳定性分析被引量：8
- 2017年
- 为比较甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、18S rRNA和β-actin基因在脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)作内参基因的优劣,本研究采用同源克隆和RACE技术,克隆了脊尾白虾GAPDH基因全长cDNA序列(GenBank登录号:KX893516),通过实时荧光定量PCR(quantative real-time PCR,qPT-PCR)技术,检测3种基因在脊尾白虾不同组织及不同蜕壳后时间点的表达量变化,在此基础上进行内参稳定性分析。结果显示,脊尾白虾GAPDH基因全长1514 bp,开放读码框1002 bp,编码333个氨基酸,二级结构预测显示GAPDH蛋白具有一个高度保守的NAD^+结合功能域(NAD binding domain)和行使糖运输和代谢的催化功能域。分析qRT-PCR结果并结合ge Norm、Norm Finder和Best Keeper 3种软件的分析发现,在不同组织和不同蜕壳后时间点,3种内参基因的稳定性由高到低依次为18S r RNA、GAPDH、β-actin。因此,在脊尾白虾不同组织和不同蜕壳后时间点的定量分析中,选取单内参基因时,推荐使用18S rRNA为内参基因,双内参时推荐18S rRNA和GAPDH,而18S rRNA、β-actin和GAPDH在其他生理条件下作内参基因的稳定性还有待进一步研究。
- 薛蓓张培李志辉赵莲赖晓芳高焕李健阎斌伦
- 关键词：脊尾白虾GAPDH内参基因
- 一种脊尾白虾线粒体基因组拷贝数的定量检测方法
- 本发明公开了一种脊尾白虾线粒体基因组拷贝数的定量检测方法，包括如下步骤：分别选择腺苷酸转移酶基因(ANT)和ATP6基因作为脊尾白虾细胞核基因组和线粒体基因组的单拷贝基因，设计适于ANT和ATP6基因实时定量PCR反应的...
- 高焕张培赖晓芳李志辉薛蓓赵莲阎斌伦
- 文献传递
- 脊尾白虾不同发育期mtDNA拷贝数变化特征分析
- 2018年
- 为了解脊尾白虾(Exopalaemoncarinicauda)在不同发育期线粒体基因组(mtDNA)拷贝数的变化特征,本研究共采集其8个时期(受精卵期、溞状幼体Ⅰ期、溞状幼体Ⅱ期、溞状幼体Ⅲ期、溞状幼体Ⅳ期、溞状幼体Ⅴ期、仔虾期和成虾期)的DNA样品,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术,对上述各发育期单个细胞中的mtDNA拷贝数进行了测定。检测结果显示,脊尾白虾受精卵期、溞状幼体Ⅰ期、溞状幼体Ⅱ期、溞状幼体Ⅲ期、溞状幼体Ⅳ期、溞状幼体Ⅴ期、仔虾期和成虾期的mtDNA拷贝数的均值分别为2366、2648、2644、2873、3559、9948、6452和8872。进一步统计分析结果显示,mtDNA拷贝数与发育时间存在正相关性,相关系数为0.83。研究表明,随着脊尾白虾不断生长,其单个细胞中mtDNA拷贝数总体呈上升趋势。
- 张培徐莞媛李志辉李志辉张庆起高焕陈建华阎斌伦
- 关键词：脊尾白虾线粒体基因组不同发育期拷贝数
- 不同养殖密度对脊尾白虾生长和水体氨氮含量的影响被引量：9
- 2018年
- 为探讨不同养殖密度对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)生长、存活以及水体氨氮含量变化规律的影响,设置4个密度梯度(600尾·m^(-3)、900尾·m^(-3)、1 200尾·m^(-3)、1 500尾·m^(-3))对脊尾白虾进行养殖实验,测定脊尾白虾存活率、特定生长率及水体氨氮含量等指标。结果显示,4个养殖密度(600尾·m^(-3)、900尾·m^(-3)、1 200尾·m^(-3)、1 500尾·m^(-3))条件下水体氨氮含量均值分别为0.61 mg·L^(-1)、0.85 mg·L^(-1)、1.15 mg·L^(-1)、1.49 mg·L^(-1),即随养殖密度升高氨氮含量逐渐增加,且不同养殖密度条件下水体氨氮含量随养殖周期的延长呈现升高的趋势。4个养殖密度(600尾·m^(-3)、900尾·m^(-3)、1 200尾·m^(-3)、1 500尾·m^(-3))条件下脊尾白虾的特定生长率分别为5.40%、4.55%、4.01%及3.63%,存活率分别为86.11%、86.67%、81.82%及72.22%,特定生长率和存活率均与养殖密度成负相关关系,且两个指标各组之间大部分有显著性差异(P<0.05)。研究结果可为探索脊尾白虾的最适工厂化养殖条件提供理论指导。
- 李志辉马杭柯张培张培孙金秋阎斌伦张庆起阎斌伦
- 关键词：脊尾白虾养殖密度氨氮
- 一种网箱套养三疣梭子蟹装置
- 一种网箱套养三疣梭子蟹装置，包括等边梯形轮胎截断、通水网片、顶盖、投饵门、绳套，所述等边梯形轮胎截断设为具有左、右和上面开口的装置，所述通水网片固定在等边梯形轮胎截断的左侧和右侧，所述顶盖覆盖在等边梯形轮胎截断的上面，所...
- 阎斌伦赵莲李志辉张培薛蓓赖晓芳高焕
- 文献传递
- 三疣梭子蟹线粒体基因组SNP在增殖放流家系识别中的应用被引量：4
- 2018年
- 为开发三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)增殖放流分子标志技术,本研究在前期获得三疣梭子蟹线粒体基因组24个SNP位点的基础上,采用高分辨率熔解曲线(HRM)检测技术对4个用于增殖放流的家系(A、B、C和D)(代表约80~120万个放流个体)进行了鉴别工作。结果显示,含有SNP位点的22条PCR扩增序列中,有9条SNP位点扩增产物在亲代(母本)及其子代的28个个体之间具有基本一致的熔解峰,且子代个体间Tm的均一性较好,无明显差异;进一步以序列已知的野生型及其突变体作为同一SNP引物扩增片段,在各家系间分析HRM标准曲线,这9个SNP可以成功用于三疣梭子蟹4个放流家系的鉴别。在这9个SNP位点中,可鉴定C家系的有5个,可鉴定B家系的有2个,可鉴定A、D家系的各1个。该研究结果为三疣梭子蟹种质资源的鉴定及标志放流工作的开展提供了技术支持。
- 赵莲李志辉李志辉薛蓓张培张庆起薛蓓阎斌伦
- 关键词：三疣梭子蟹增殖放流分子标志SNPHRM
- 镉胁迫对脊尾白虾的毒性效应研究被引量：10
- 2016年
- 为揭示重金属镉对脊尾白虾的毒性效应,采用急性毒性实验方法,研究了不同浓度镉(Cd^(2+))对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)血清氧化应激相关生理指标的活性以及肌肉组织中腺苷酸转移酶基因(ANT)和热激蛋白70基因(HSC70)表达水平的影响。共设置4个Cd2+浓度胁迫(0、0.0002、0.001、0.005 mmol·L^(-1)),分别在0、3、6、9、12、24、36、48、72和96 h共10个时间点对相关指标进行测定。结果显示:不同浓度镉胁迫下,脊尾白虾血清中H_2O_2含量、MDA含量和GSH含量均表现为先升高后降低的趋势,H2O2含量在胁迫3 h时即出现明显的升高,而MDA和GSH则均在9 h时出现升高趋势,表现为一定的滞后性。H2O2含量在0.005 mmol·L^(-1)胁迫3 h时出现峰值,MDA含量在0.005 mmol·L^(-1)胁迫9 h时出现峰值,GSH含量在0.001mmol·L^(-1)胁迫48 h时出现峰值,且均与对照组存在显著性差异(P<0.05)。HSC70基因的表达量在不同浓度胁迫下均表现为先升高后降低的趋势,且均在24 h时达到峰值,具体表达量水平的顺序为:0.0002 mmol·L^(-1)>0.001 mmol·L^(-1)>0.005 mmol·L^(-1)。ANT基因的表达量在不同浓度下则均表现为明显的下调趋势。由此可见,急性Cd^(2+)胁迫不仅影响脊尾白虾的氧化应激相关生理指标,还影响机体内组成型HSC70及与能量传递有关的ANT基因的表达水平。
- 薛蓓张培李志辉赵莲赖晓芳陈建华高焕阎斌伦
- 关键词：镉脊尾白虾急性毒性ANT
