张丽莎
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
- 供职机构：河北医科大学第一医院更多>>
- 发文基金：河北省科学技术研究与发展计划项目河北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- iNOS转基因诱导裸鼠移植瘤细胞凋亡及其与p53表达相关性的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的观察诱生型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)基因转染对人喉鳞癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响,研究在体人喉鳞癌细胞中iNOS与突变型p53基因的表达,探讨二者的相关性及促进肿瘤细胞凋亡的机制。方法将iNOS基因转染人喉鳞癌Hep-2细胞并筛选出阳性克隆细胞进行扩增,制备荷瘤细胞小鼠模型,致瘤小鼠随机分为3组,转染组,转染空载体组,未转染组。应用逆转录-聚合酶链反应检测各组喉鳞癌组织中iNOS与p53 mRNA的表达,免疫组织化学检测各组喉鳞癌组织中iNOS与p53蛋白的表达,流式细胞术检测各组喉鳞癌组织中iNOS与p53蛋白、细胞凋亡及细胞周期的变化。结果转染组iNOS与p53蛋白及其mRNA的表达明显高于转染空载体组和未转染组,且iNOS与p53的表达呈明显的正相关(P<0.01)。转染空载体组和未转染组iNOS与p53蛋白及其mRNA的表达无明显差别。同转染空载体组和未转染组相比,转染组喉癌细胞发生了明显的G0/G1期阻滞,同时出现了明显的凋亡峰,瘤体积出现了明显的减小,转移发生率明显降低。结论iNOS基因转染能明显增加iNOS mRNA的表达从而增加了iNOS蛋白的表达,iNOS蛋白的表达使瘤细胞内合成大量的一氧化氮,从而诱导p53基因的大量表达,促进了肿瘤细胞凋亡,推测p53基因诱导肿瘤细胞凋亡的机制可能同细胞发生G0/G1期周期阻滞有关。
- 王宝山宋冬梅张继华刘艳梅张丽莎
- 关键词：喉肿瘤一氧化氮合酶
- 低氧条件下γ射线对Hep-2细胞p53表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的模拟在体肿瘤细胞微环境,体外建立不同氧供状态下的细胞模型,探讨乏氧再氧合条件下^(60)Coγ射线照射对人喉鳞癌Hep-2细胞凋亡的影响。方法将体外培养的人喉鳞癌细胞分为3组:A组(常氧组)、B组(低氧组)、C组(低氧再氧合组)。流式细胞仪检测HIF-1α、p53蛋白表达及细胞凋亡;细胞爬片免疫组化检测各组细胞HIF-1α、p53蛋白表达;RT-PCR检测各组细胞HIF-1αmRNA。结果低氧能明显增加Hep-2细胞HIF-1α蛋白及其mRNA表达,同时p53蛋白表达相应上调。再氧合之后HIF-1α蛋白及其mRNA表达均呈现下调趋势,p53蛋白表达下调。同低氧(B组)相比再氧合之后(C组)Hep-2细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。结论低氧降低^(60)Coγ射线照射对Hep-2细胞的诱凋亡作用,再氧合之后其诱凋亡作用明显提高。但在Hep-2细胞凋亡率明显升高的同时却并未出现p53蛋白表达的增强,提示低氧再氧合之后^(60)Coγ射线诱导Hep-2细胞凋亡作用可能是通过p53以外的其它促凋亡途径实现的。
- 王宝山刘艳梅宋冬梅张继华张丽莎
- 关键词：HEP-2细胞低氧诱导因子-1ΑP53
- 人参皂苷Rg3对低氧条件诱导的Hep-2细胞作用机制的初步研究被引量：5
- 2008年
- 目的:研究人参皂苷Rg3对低氧条件下人喉鳞癌细胞Hep-2中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:通过体外低氧培养Hep-2人喉鳞癌细胞株,同时设立阴性对照组和阳性对照组(顺铂)。人参皂苷Rg3作用24 h后,应用免疫细胞化学技术和流式细胞技术检测Hep-2细胞HIF-1α和VEGF蛋白表达的变化;应用RT-PCR技术检测HIF-1α和VEGF mRNA表达的变化。结果:在低氧条件下,Rg3组和顺铂对照组的Hep-2细胞中的HIF-1α和VEGF蛋白表达低于阴性对照组(P<0.05);Rg3组的HIF-1α和VEGF mRNA水平明显低于阴性对照组(P<0.05),顺铂组的HIF-1α和VEGF mRNA水平无明显变化。结论:低氧条件下,人参皂苷Rg3抑制Hep-2细胞中的HIF-1α和VEGF蛋白和mRNA的表达,这可能是Rg3抗肿瘤作用的机制之一。
- 宋冬梅张丽莎王宝山张继华
- 关键词：人参皂苷RG3低氧
- 人参皂苷Rg_3在低氧条件下诱导人喉鳞癌细胞(Hep-2)凋亡及对HIF-1α表达的影响被引量：7
- 2009年
- 目的:研究在低氧条件下人参皂苷Rg3对人喉鳞癌细胞(Hep-2)生长的抑制作用以及可能的机制。方法:体外低氧培养Hep-2人喉鳞癌细胞株,同时设立阴性对照组与阳性对照组(顺铂),采用MTT法检测常氧和低氧条件下,人参皂苷Rg3对Hep-2生长的抑制作用;流式细胞术测定各组细胞周期分布及细胞凋亡情况;应用免疫细胞化学技术和流式细胞技术检测Hep-2细胞在人参皂苷Rg3作用下HIF-1α蛋白表达的变化;应用RT-PCR技术检测HIF-1αmRNA表达的变化。结果:不同浓度的Rg3对Hep-2细胞的生长均有抑制作用,且呈剂量依赖关系。常氧和低氧条件下Rg3处理后细胞均阻滞于G0/G1期,低氧Rg3组凋亡率增加。Rg3不同氧供条件下均能下调因缺氧增加的HIF-1α的蛋白表达,同时下调HIF-1αmRNA水平。结论:人参皂苷Rg3对人喉鳞癌细胞Hep-2生长有抑制作用,其抑制作用可能是通过抑制细胞周期进程,诱导细胞凋亡实现的。缺氧条件下Rg3抑制HIF-1α的表达,可能是Rg3抗肿瘤作用的机制之一。
- 王宝山张丽莎宋冬梅张继华刘艳梅
- 关键词：低氧凋亡HIF-1Α
- 低氧条件下人参皂甙Rg3诱导人喉鳞癌细胞凋亡及对HIF-1α和VEGF表达的影响被引量：3
- 2008年
- 目的研究人参皂甙Rg3对低氧条件下人喉鳞癌细胞(Hep-2)生长抑制作用以及可能的机制。方法通过体外低氧培养Hep-2人喉鳞癌细胞株,同时设立阴性对照组,阳性对照组(顺铂);采用TUNEL法(终末脱氧核苷酸末端转移酶介导缺口末端标记)检测细胞凋亡情况,计数凋亡细胞,计算凋亡率;流式细胞术测定细胞周期及细胞凋亡情况;应用免疫细胞化学技术和流式细胞技术检测Hep-2细胞在人参皂甙Rg3作用下HIF-1α和VEGF蛋白表达的变化;应用RT-PCR技术检测HIF-1α和VEGF mRNA表达的变化。结果TUNEL及流式细胞术检测Rg3组的凋亡率明显高于阴性对照组(P<0.05);在低氧条件下,Rg3组和顺铂对照组的Hep-2细胞中的HIF-1α和VEGF蛋白表达低于阴性对照组(P<0.05);Rg3组的HIF-1α和VEGF mRNA水平明显低于阴性对照组(P<0.05),顺铂组的HIF-1α和VEGF mRNA水平无明显变化。结论低氧条件下,人参皂甙Rg3诱导细胞凋亡,抑制了Hep-2细胞中的HIF-1α和VEGF蛋白和mRNA的表达,这可能是Rg3抗肿瘤作用的机制之一。
- 宋冬梅张丽莎王宝山张继华
- 关键词：人参皂甙RG3低氧HIF-1Α
