常笑君
- 作品数：13 被引量：61H指数：6
- 供职机构：福建农林大学园艺学院园艺植物生物工程研究所更多>>
- 发文基金：福建省科技重大专项福建省教育厅资助项目福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 茶树几丁质酶基因的克隆及其在干旱胁迫下的表达分析被引量：8
- 2017年
- 以铁观音茶树叶片为材料,利用逆转录PCR及RACE法,克隆了茶树几丁质酶基因Cs Chi(Gen Bank登录号为KR078345)。Cs Chi基因的c DNA全长为1 192 bp,包含972 bp的开放阅读框(ORF),编码323个氨基酸。生物信息学分析结果表明,Cs Chi蛋白的分子量为34.33 ku;理论等电点p I为8.44;原子组成为C1 519H2 285N413O464S18,总原子数为4 699;蛋白质结构分析显示该蛋白有6个蛋白的跨膜区域,属于跨膜蛋白;存在于细胞外;没有卷曲螺旋结构存在;Cs Chi基因编码的蛋白属于糖苷水解酶19家族,含有保守的Cht BD1结构域,与溶菌酶的保守结构域类似,可能兼具几丁质酶活性和溶菌酶活性,q PCR定量分析结果显示在不同干旱胁迫处理下茶树的Cs Chi基因的表达量,与对照组相比有所增加。推测Cs Chi基因在茶树干旱等逆境胁迫中起重要作用。
- 朱晨张舒婷常笑君赵姗姗王仲许长同张梓浩林玉玲赖钟雄郭玉琼
- 关键词：茶树几丁质酶基因克隆
- 茶树原位转化方法的建立
- 2022年
- 解决茶树缺乏高效、稳定的遗传转化体系问题,建立了一种基于根癌农杆菌介导的茶树原位转化转基因方法,为茶树基因功能研究和种质创新奠定坚实的基础。以茶树品种‘铁观音’、‘白叶1号’和‘龙井43’的实生幼苗为受体材料,进行去顶芽和腋芽处理。利用根癌农杆菌菌液侵染实生苗伤口,通过抗性筛选获得再生芽,经分子生物学鉴定后,采用短穗扦插法获得茶树转基因植株。结果表明,再生芽中GUS(β-glucuronidase)和HYG(hygromycin)标记基因经多次PCR检测均为阳性,经测序验证PCR产物序列与标记基因序列一致。‘铁观音’、‘白叶1号’和‘龙井43’的转化率分别为8.14%、2.99%和2.53%。建立了不依赖茶树组织培养的原位转化转基因体系,具有操作简便、转化率高、成本低、试验周期短的特点。
- 周承哲常笑君朱晨程春振程春振陈裕坤赖钟雄林玉玲
- 关键词：茶树根癌农杆菌
- 茶树CSD1基因及其启动子克隆与低温胁迫下的表达被引量：4
- 2018年
- 低温寒害严重影响茶树的生长发育状况及成品茶品质,Copper/zinc-superoxide dismutase（CSD）基因在植物抗胁迫响应中起着关键作用.为了解茶树CSD基因（CsCSD）响应低温胁迫的作用机制,以铁观音茶树叶片为供试材料,采用同源克隆结合RACE方法及染色体步移法,获得茶树CSD1基因的cDNA序列（GenBank登录号：KR078346）、gDNA序列及其启动子序列,并对其进行生物信息学分析,同时对低温胁迫处理下CsCSD1基因的表达模式也进行分析.结果显示,茶树CsCSD1基因cDNA全长860 bp,完整的开放阅读框（ORF）长度为459 bp,共编码152个氨基酸;gDNA基因结构分析发现CsCSD1基因由6个外显子和5个内含子构成;CpG岛预测发现启动子区域内存在1个CpG岛,CpG长度为219bp,GC含量为50.3%;CsCSD1启动子上还存在大量的顺式作用元件,包括光响应元件、激素响应元件、胁迫响应元件和其他响应元件;在低温胁迫下CsCSD1基因的表达模式显示,在低温胁迫前期,CsCSD1基因表达上调;随后CsCSD1基因的表达量不断下降.本研究表明,CsCSD1基因能够响应低温胁迫并在胁迫的不同时期发挥不同的作用,推测与低温胁迫密切相关.
- 郭玉琼王仲朱晨赵姗姗赵姗姗张舒婷李小桢常笑君林玉玲赖钟雄
- 关键词：茶树低温胁迫
- “工夫茶,两岸情”主题茶艺编创的思考被引量：6
- 2017年
- 茶艺是茶文化的载体,是茶文化的一种具象表现形式,将文学作品、社会热点问题等要素与茶艺表演相结合,能够起到传承传统文化、引人深思的作用。文章以第二届全国大学生茶艺技能大赛团体赛一等奖作品《工夫茶,两岸情》为例,从其创作背景、要素设计、意境营造等方面进行解析,总结了创作主题茶艺创编的经验与存在的问题,以期为茶文化工作者提供借鉴与参考。
- 谷禹秀邓婷婷林浥常笑君周子维张琪黄丹樨孙云
- 关键词：工夫茶
- 福建省53份茶树种质资源遗传多样性ISSR分析被引量：6
- 2017年
- 利用ISSR分子标记技术对福建省7个地区的茶树品种进行遗传多样性和遗传结构的分析。筛选出的12条引物共扩增出97条条带,其中多态性条带有92条,多态性谱带百分率为94.84%;53份供试材料可划分为5大类(GS=0.71),遗传距离介于0.66~0.99之间;Nei基因多样性指数为0.224,Shannon's信息指数为0.368,不同地区茶树的遗传多样性参数差异较大,其中宁德福安地区最高,福州鼓山地区最低;总变异系数为0.332,地区内个体间遗传多样性为0.154,而地区间为0.231,福州地区与其他地区之间的相似性较弱;研究认为,福建省茶树遗传多样性丰富,不同地区茶树存在高频率遗传变异,而缺乏遗传信息交流是造成福州地区遗传多样性较低的可能因素。
- 朱晨张舒婷常笑君王仲许长同张梓浩林玉玲赖钟雄郭玉琼
- 关键词：茶树种质资源ISSR
- 茶树修剪技术在茶园管理中的应用与展望被引量：9
- 2015年
- 综合介绍了茶树修剪时期的选择、修剪方式、与之配合的茶园管理措施,以及茶树修剪在近代茶树栽培综合管理中的应用,并对茶树修剪技术的发展趋势作了阐述与展望,旨在为茶树修剪技术的发展及其在茶园管理中的应用提供一定的参考价值。
- 朱晨赵珊珊常笑君王仲叶乃兴郭玉琼
- 关键词：茶树修剪茶园管理再利用
- 红茶发酵工艺研究现状与展望被引量：5
- 2015年
- 发酵是红茶加工的关键工序,对红茶品质产生重要影响。综合介绍了红茶发酵过程中多酚类物质、芳香物质、糖类物质等成分变化,分析发酵温度、发酵湿度、发酵时间等因子对红茶发酵的影响,并展望红茶发酵工艺的发展。
- 朱晨赵姗姗王仲常笑君郭玉琼
- 关键词：红茶发酵影响因素
- 铁观音茶树RING型E3泛素连接酶基因克隆及其干旱胁迫下的表达分析被引量：1
- 2016年
- 以铁观音茶树为试材,对其中E3泛素连接酶基因进行克隆和生物信息学分析,并采用qPCR进行不同干旱条件下的定量表达分析。研究结果表明,该序列全长为1 138bp,开放阅读框(ORF)为810bp,编码269个氨基酸(GenBank登录号KR819177)。生物信息学分析发现该铁观音茶树E3泛素连接酶基因不含跨膜结构以及信号肽,具有多个磷酸化位点,亚细胞定位于叶绿体中。经BLAST比对,该基因编码的氨基酸序列与烟草、亚麻荠、葡萄、醉蝶花、芜菁中的E3泛素连接酶基因编码的氨基酸序列分别有51%、50%、50%、50%和49%的同源性,且相关保守功能结构域翻译的蛋白质序列具有RING-finger结构,初步确定该基因为铁观音茶树的E3泛素连接酶基因。qPCR分析结果显示在不同干旱胁迫处理下铁观音茶树的E3泛素连接酶基因的表达量,与对照组相比显著增加。本研究认为铁观音茶树RING型E3泛素连接酶基因参与茶树抗旱响应机制。
- 常笑君郭玉琼王仲赵姗姗朱晨林玉玲赖钟雄
- 关键词：铁观音基因克隆干旱胁迫
- 铁观音茶树体胚发生及其内源激素变化被引量：8
- 2018年
- 以乌龙茶品种铁观音茶树的未成熟胚为供试材料,建立高效的茶树体胚发生再生体系,同时采用高效液相色谱法（HPLC）分析茶树体胚发生过程中各个不同发育阶段的内源激素含量变化趋势.结果显示,诱导茶树体胚发生的培养基为改良MS培养基＋2 mg/L苄基腺嘌呤（BA）＋0.2 mg/L吲哚丁酸（IBA）＋800 mg/L甜菜碱,体胚增殖系统维持途径的培养基为改良MS培养基＋3 mg/L肉桂酸＋20 g/L蔗糖＋10 g/L山梨醇.当3%蔗糖与2%山梨醇组合使用时,子叶形胚的诱导率明显提高.将诱导产生的子叶形胚转接至添加5%蔗糖与5%聚二乙醇（PEG）的无激素MS培养基中,经过40 d左右培养,体胚能正常成熟.成熟体胚接种在附加2 mg/L BA与0.1 mg/L IBA的MS培养基上可以萌发成苗.在体胚发生早期,玉米素（ZT）和赤霉酸（GA3）含量均是先下降,在子叶形胚时期降至最低值,到体胎发育后期的成熟胚与萌发阶段呈明显上升趋势;脱落酸（ABA）含量由球形胚到子叶形胚阶段一直呈现下降趋势,到成熟胚阶段时,出现一个明显的峰值;球形胚中的吲哚乙酸（IAA）含量显著高于其他阶段,之后迅速降低,波动变化.ABA/IAA的比值先增大,然后减小;ABA/GA3的比值体胚发育前期维持在较高水平,到成熟萌发阶段下降;球形胚阶段IAA/ZT的比值高于其他各个阶段.本研究表明茶树不同发育阶段胚胎的体胚诱导率不同,与生理状态及其内源激素动态变化有关;同时茶树中内源激素含量和比例在体细胞胚胎发育过程中有显著的变化,这种变化在不同胚胎发育阶段起着特定的调节作用.
- 郭玉琼黄道斌常笑君朱晨李小桢赖钟雄
- 关键词：铁观音茶树体胚发生内源激素
- 福建省53份茶树种质资源SSR-PCR反应体系的优化被引量：1
- 2018年
- [目的]优化茶树种质资源SSR-PCR反应体系。[方法]以福建省不同地区的53份茶树种质资源作为SSR-PCR体系优化的供试材料,通过L16(43)正交试验设计,对茶树SSR-PCR反应体系的3个影响因素:DNA模板浓度(ng/μL)、引物浓度(mmol/L)和Taq酶浓度(U)在4个水平上进行比较筛选,并进行PCR验证。[结果]优化后最佳的福建省茶树SSR-PCR反应体系为25μL体系,其中DNA模板浓度50 ng/μL、引物浓度0.25 mmol/L、Taq酶浓度1.25 U。并从23对茶树SSR引物中筛选出5对清晰、明亮、无杂带的引物,适用于福建省茶树SSR标记的进一步研究。[结论]该研究可为后续福建省茶树品种的亲缘关系分析、杂交品种的选育等研究提供依据。
- 朱晨田采云张舒婷张舒婷常笑君李小桢陈常颂林玉玲陈常颂
- 关键词：茶树SSR-PCR正交设计
