叶伟超
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
- 供职机构：中山大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 从唾液获取人体DNA的简易方法与应用被引量：8
- 2006年
- [目的]探索一种对人体无伤害、无痛苦的获取基因组DNA的方法。[方法]比对①获取口腔黏膜细胞的不同途径,②改进的微量血提取试剂盒和常规的碘化钾法提取唾液中的DNA的效果,③经过不同的储存条件、时间梯度所获得的DNA的得率和纯度,④分别以提取的DNA和唾液沉淀作为模板PCR扩增管家基因GAPDH、唾液特异蛋白基因PRB- 3、线粒体D-loop区。[结果]从0.1 mL的唾液中即可以提取出约4.5μg的基因组DNA。从新鲜唾液中获得的DNA得率和纯度最高,但即使唾液经过长时间的保存,直接使用唾液的细胞沉淀也同样能够扩增出各种正确大小的基因片段。[结论]唾液作为获取基因组DNA的简易来源,完全可以取代常规的取血采样,也比棉拭子刮取口腔细胞、滤纸唾液斑法、漱口水收集等方法简便、经济、快速。该法不会对被收集者造成任何不适,容易被接收,因而能最大限度的扩大复杂遗传疾病研究的取样范围,特别适合分子流行病学大面积调查。
- 陈嘉昌张红宇彭瑾瑜付艳艳叶伟超常弘
- 关键词：唾液基因组DNA遗传疾病
- 排除β-肌动蛋白假基因对反转录聚合酶链反应的干扰
- 2006年
- 目的筛选合适的β-肌动蛋白(β-actin)引物以排除RNA样本中残存的DNA对人类基因表达分析的干扰。方法利用EMBL、PSEUDOGENE等生物信息数据库,寻找β-actin的假基因。同时自行设计和从国内外文献中筛选了众多β-actin引物。选用其中具有代表性的5对跨过内含子的引物,分别将基因组DNA、未经逆转录的RNA、cDNA作为模板,对这5对引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增。结果生物信息学分析发现β-actin有37个假基因并且发现绝大多数的研究者所使用的引物都存在假基因干扰问题。当分别用DNA和cDNA作为模板时,5对引物中的1对跨过内含子的引物能扩增出大小不同的条带。结论使用该对引物能有效发现和排除RNA样本中所残存的DNA的干扰,令人类基因表达分析得出更准确的结果。
- 陈嘉昌李森华彭瑾瑜付艳艳叶伟超常弘
- 关键词：Β-肌动蛋白基因表达分析反转录聚合酶链反应
