张凯
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家科技部农业科技成果转化资金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一株H5N2亚型禽流感病毒细胞适应株的培育及免疫原性研究被引量：1
- 2014年
- 为获得可在MDCK细胞上高水平复制的H5N2亚型禽流感病毒(AIV)疫苗候选株,将1株H5N2亚型AIV在MDCK细胞上进行传代驯化,检测各代次病毒的血凝(HA)效价以及组织培养半数感染量(TCID50),选取细胞培养病毒液与鸡胚培养病毒液分别制备油乳剂灭活疫苗,免疫4周龄SPF鸡,于免疫后不同时间检测抗体效价,免疫后第21天测定疫苗的免疫保护情况。结果显示,病毒经过传代后逐步适应了MDCK细胞,其HA效价趋于稳定,最高时与鸡胚传代病毒(9lb)一致,TCID50接近亲本毒株,HA、NA基因序列与亲本毒株基本保持一致,免疫后第21天细胞毒免疫组的HI抗体平均效价(8.5lb)与鸡胚毒株免疫组的效价(9lb)基本相当,而且细胞毒免疫组能对H5N1亚型AIV毒株产生良好的免疫保护作用,抑制免疫鸡排毒。结果表明,该细胞适应株的培育为H5N2亚型AIV细胞疫苗的研制奠定了基础。
- 张凯高瑞娟黄武黄永兴吕嘉敏罗开健
- 关键词：禽流感病毒H5N2亚型细胞疫苗
- 禽源空肠弯曲杆菌的分离鉴定及其致病性的初步研究被引量：10
- 2013年
- 本研究对广东部分地区不同品种家禽空肠弯曲杆菌的流行状况进行了调查。通过菌落和菌体形态、生化特征、培养特性等生物学特性和多重PCR方法对所分离菌株进行鉴定,结果表明广东地区鸡、鸭和鹅空肠弯曲杆菌的带菌率分别为7.93%、2.46%和4.16%。从分离株中选取10株进行了致病性试验,结果表明禽源空肠弯曲杆菌对雏鸡的主要病理变化是腹泻便血,肝脏出现白色坏死灶,盲肠充血、膨大充满气泡和红色内容物。
- 黄武饶雷张凯高瑞娟罗开健
- 关键词：空肠弯曲杆菌
- 鹅细小病毒SS/10株VP3蛋白的原核表达及鉴定被引量：3
- 2012年
- 根据GenBank收录的鹅细小病毒(GPV)基因序列,设计并合成了一对VP3基因扩增引物。采用PCR技术对SS/10株的VP3基因进行扩增,将目的基因和原核表达载体PET-32a分别经HindⅢ和BamHⅠ双酶切后进行连接,获得重组质粒PET-32a-VP3,并将其转化表达菌BL21(DE3)pLysS。经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,结果获得了72ku左右的融合蛋白,大部分以包涵体的形式存在于菌体中。Wesern blot结果表明,该蛋白能与GPV阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。
- 胡自立刘海玲张光明张凯高瑞娟罗开健
- 关键词：鹅细小病毒VP3基因原核表达
- 空肠弯曲菌和沙门菌双重实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：1
- 2014年
- 为建立一种空肠弯曲菌和沙门菌的双重实时荧光定量PCR检测方法,根据空肠弯曲菌的保守基因hipO和沙门菌的保守基因invA分别设计合成引物和TaqMan探针,分别使用FAM、JOE作为探针报告基团,TAMRA作为探针淬灭基团。优化反应体系及条件,建立适用于检测食品中空肠弯曲菌和沙门菌的双重实时荧光定量PCR方法。结果显示,该检测方法特异性强,灵敏度高,空肠弯曲菌检测限可达10CFU/mL,沙门菌检测限达230CFU/mL。表明建立的双重实时荧光定量PCR可为实现食品中空肠弯曲菌和沙门菌的同时检测提供新方法。
- 高瑞娟张凯吕嘉敏黄永兴罗开健
- 关键词：空肠弯曲菌沙门菌TAQMAN探针
