刘海洋
- 作品数：15 被引量：47H指数：5
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目国家自然科学基金温州市科技局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学交通运输工程自动化与计算机技术更多>>
- 多粘菌素B联合不同抗菌药物对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的体外抗菌作用被引量：13
- 2017年
- 目的:评价多粘菌素B分别与美罗培南、利福平联合用药对临床分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的体外抗菌作用。方法:采用肉汤稀释法和棋盘稀释法测定多粘菌素B分别联用美罗培南和利福平对20株临床分离的CRKP的最低抑菌浓度,并计算部分抑菌浓度指数。结果:多粘菌素B与美罗培南联用后对CRKP有协同作用的占55%,表现出相加作用占45%,不存在无关和拮抗作用;多粘菌素B与利福平联用后对CRKP协同作用的占65%,相加作用占35%,不存在无关和拮抗作用。结论:多粘菌素B与美罗培南或利福平联用在体外对CRKP抗菌效应均主要表现为协同和相加作用。
- 吴正海刘海洋陈华乐段达荣周铁丽
- 关键词：肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶多粘菌素B美罗培南
- 碳青霉烯类药物对铜绿假单胞菌生物膜形成及其基因表达的影响被引量：4
- 2019年
- 目的研究碳青霉烯类药物对铜绿假单胞菌生物膜形成和基因表达的影响,为治疗铜绿假单胞菌引起的感染提供分子基础和理论依据。方法选取3株临床分离的对碳青霉烯类药物敏感,但对其他常用抗菌药物耐药的铜绿假单胞菌(TL1552、TL1728和TL947),采用琼脂稀释法检测3株菌对临床常用抗菌药物的最低抑菌浓度(mininal inhibotory concentration,MIC);结晶紫染色法及扫描电子显微镜观察不同浓度碳青霉烯类药物对铜绿假单胞菌生物膜形成能力和形态的影响;通过转录组测序分析生物膜相关的差异表达基因,并用qRT-PCR进行确认。结果亚胺培南和美罗培南均能有效抑制铜绿假单胞菌生物膜的形成,但对已经形成的生物膜影响较小;扫描电子显微镜显示美罗培南处理后的生物膜细胞数量、大小和形态均发生了显著改变,继续在不含抗菌药物的培养基上孵育6h后发现生物膜细胞的整体形态基本恢复正常;转录组测序分析及qRT-PCR表明碳青霉烯类药物可导致涉及蛋白质运输、代谢、生物膜形成等相关基因的改变,并能触发生物膜细胞的应激反应。结论碳青霉烯类药物对铜绿假单胞菌的生物膜形成有抑制作用,但对已经形成的生物膜影响甚微,去除药物后生物膜细胞的形态基本得到恢复,说明铜绿假单胞菌感染后早期治疗和足疗程治疗的重要性。
- 周蓓蓓王冲杜佳周翠刘海洋张艺之周铁丽
- 关键词：铜绿假单胞菌生物膜碳青霉烯类药物
- LuxS在肺炎克雷伯菌中对生理过程以及质粒转移效率的调控作用研究
- 目的 探讨LuxS介导的群体感应系统在肺炎克雷伯菌中对各种生理过程的作用。方法 使用卡那霉素耐药基因(Kan)等位基因通过采用"Gene gorging"的方法构建肺炎克雷伯菌(KP563和KP1979)luxS突变体,...
- 刘海洋Jonathan J Wilksch张肖肖Von Vergel L.Torres毕文姿Eric Mandela曹建明李佳慧Trevor Lithgow周铁丽
- 关键词：LUXS基因敲除肺炎克雷伯菌
- luxS基因对肺炎克雷伯菌生物膜形成的影响及其机制研究
- 目的: 1. 分析2014年1月~2016年8月温州医科大学附属第一医院临床分离的肺炎克雷伯菌的标本来源、科室分布以及耐药情况，为有效地控制肺炎克雷伯菌感染以及临床合理用药提供依据。 2. 通过基因敲除技术对肺炎克雷...
- 刘海洋
- 关键词：肺炎克雷伯菌生物膜
- 临床分离肠球菌生物膜的形成能力及毒力基因的相关性研究被引量：13
- 2016年
- 目的了解本院临床分离肠球菌的生物膜形成能力以及其与毒力基因的相关性。方法收集温州医科大学附属第一医院2013年6月至2014年9月临床分离的肠球菌348株,其中粪肠球菌156株,屎肠球菌192株。采用结晶紫染色法测定肠球菌的生物膜形成能力,PCR方法筛查4种常见的肠球菌毒力基因esp、gel E、agg和ace的存在情况,统计分析肠球菌生物膜形成能力与毒力基因的关系。结果 348株肠球菌毒力基因esp、gel E、agg和ace的检出率分别为80.5%、46.0%、46.6%和44.3%,除esp基因外(P=0.078),粪肠球菌中的其他3种毒力基因的携带率均显著高于屎肠球菌(P<0.01);肠球菌的生物膜形成阳性率为54.6%(190/348),其中粪肠球菌的生物膜形成阳性率为75.6%(118/156),屎肠球菌的生物膜形成阳性率为37.5%(72/192);粪肠球菌esp、gel E和agg基因的携带与其生物膜形成阳性率密切相关,而屎肠球菌中,只有esp基因的携带与其生物膜形成阳性率密切相关(P<0.01)。结论本院分离的肠球菌具有较高的毒力基因携带率和生物膜形成能力,肠球菌毒力基因esp、gel E和agg的携带与其生物膜形成密切相关。
- 张肖肖马传玲刘海洋毕文姿卢鸿周铁丽
- 关键词：肠球菌毒力基因生物膜
- 临床分离肺炎克雷伯菌生物膜形成能力及基因相关性研究
- 目的研究肺炎克雷伯菌生物膜形成能力及其与luxS、oqxB、rarA等基因的相关性。方法通过96孔板结晶紫染色法测定200株对亚胺培南、头孢他啶、环丙沙星和庆大霉素敏感的肺炎克雷伯菌(敏感组)和300株对上述药物耐药的肺...
- 田学斌刘海洋李佳慧董郭枫周铁丽陈栎江曹建明
- Antimicrobial of Tannic acid against Staphylococcus aureus and Anti-biofilm Activity of Tannic acid against Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus
- 董郭枫刘海洋张肖肖尉骁侯渊博周铁丽陈华乐李斌曹建明
- 临床分离肺炎克雷伯菌生物膜形成能力及基因相关性研究被引量：5
- 2019年
- 目的研究肺炎克雷伯菌生物膜形成能力及其与luxS、oqxB、rarA等基因的相关性。方法通过96孔板结晶紫染色法测定200株对亚胺培南、头孢他啶、环丙沙星和庆大霉素敏感的肺炎克雷伯菌(敏感组)和300株对上述药物耐药的肺炎克雷伯菌(耐药组)体外生物膜形成能力;采用扫描电镜观察不同生物膜形成能力肺炎克雷伯菌的生物膜形态特点;通过实时荧光定量PCR分析生物膜形成相关基因(luxS、oqxB、rarA、acrB、ramA、ompK36和micF)表达量。结果强生物膜形成能力组的平均生物膜形成量是弱形成能力组的16.8倍,敏感组和耐药组肺炎克雷伯菌生物膜OD590的平均值分别为0.783±0.642和0.672±0.534,差异无统计学意义;扫描电镜显示生物膜形成能力强的菌株团块内包含大量的生物膜,形态完整且细菌密集排列;强生物膜形成能力组中luxS表达水平分别为中等和弱形成能力组的5.98倍和3.37倍;外排泵、外膜蛋白编码基因及其调控基因的表达水平有统计学差异。结论肺炎克雷伯菌生物膜形成能力与luxS基因的表达量有关,luxS作为一个高阶调控基因,其与ramA、ompK36和micF等基因构成错综复杂的关系网,共同影响生物膜的形成。
- 田学斌刘海洋李佳慧董郭枫周铁丽陈栎江曹建明
- 关键词：肺炎克雷伯菌生物膜LUXS实时荧光定量PCR
- 肺炎克雷伯菌OqxAB外排泵与生物膜形成相关性研究被引量：7
- 2017年
- 目的分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKPs)的生物膜形成能力与OqxAB外排泵的相关性。方法收集2008—2013年间温州医科大学附属第一医院临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌37株。采用微量肉汤稀释法检测其对亚胺培南、厄他培南以及美罗培南的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),结晶紫染色法测定其生物膜形成能力,PCR方法筛查外排泵基因oqxA和oqxB的携带情况并分析亚抑菌浓度的外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)对生物膜形成的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CCCP存在与不存在条件下生物膜状态与浮游状态oqxB外排泵基因的表达量。用统计学软件SPSS 17.0分析实验数据。结果 37株肺炎克雷伯菌均对至少1种碳青霉烯类药物的敏感性降低,37株菌都具有不同程度的生物膜形成能力(A590范围为0.044~1.113);在所有菌株中,只有7株菌存在oqxA或oqxB外排泵基因的缺失,与外排泵基因完整的试验菌株相比,这7株菌形成生物膜的能力较低;外排泵抑制试验发现亚抑菌浓度的CCCP对实验菌株的生物膜形成能力都有不同程度的促进作用;qRT-PCR结果证明,生物膜状态下菌株的外排泵基因的表达量要高于浮游状态下的表达量。结论 OqxAB外排泵过表达可能会促进肺炎克雷伯菌生物膜的形成。
- 刘海洋张亚培侯渊博孙瑶徐春泉周铁丽
- 关键词：肺炎克雷伯菌生物膜实时荧光定量PCR
- 葡萄球菌激酶对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌混合生物膜的作用和机制研究
- 目的 为了评估葡萄球菌激酶(Sak)对白色念珠菌以及金黄色葡萄球菌混合生物膜的影响。方法 使用结晶紫染色法分析Sak对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌混合生物膜形成的影响，并通过在染色后用明视野显微镜观察浮游聚集体的存在来确定...
- 刘海洋陈华乐孙瑶张肖肖毕文姿卢鸿李佳慧曹建明周铁丽
- 关键词：金黄色葡萄球菌白色念珠菌QRT-PCR
