王凯
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 供职机构：南京农业大学动物医学院农业部动物生理生化重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪ACE2基因的克隆、表达、抗体制备及在猪小肠组织中的定位
- 血管紧张素转化酶2(Angiotensin Converting Enzyme 2,ACE2)是2000年从人淋巴瘤和心力衰竭cDNA文库中克隆出来的血管紧张素转化酶1(Angiotensin Converting En...
- 肖航王凯申正杰张源淑
- 血管紧张素转换酶2在仔猪空肠中的分布表达及其与物质转运的关系被引量：3
- 2019年
- 通过研究血管紧张素转换酶2(ACE2)与中性氨基酸转运载体B^0AT1和葡萄糖转运载体SGLT-1、GLUT-2在不同日龄仔猪肠道中的分布表达,探讨其相互关系。以断奶仔猪为研究对象,分别取21、35日龄仔猪空肠中段组织,采用免疫组化、Western blot和RT-qPCR、HPLC等方法,明确ACE2在仔猪空肠中的分布表达,以及B^0AT1及SGLT-1和GLUT-2的mRNA在不同日龄仔猪空肠组织中表达,并通过检测血浆中游离氨基酸的种类和含量,分析各指标之间的关系。结果表明,ACE2主要分布在小肠皱襞和绒毛处,空肠上皮细胞的刷状缘、浆膜层和肌层均有ACE2的显著表达;随着仔猪日龄的增加,ACE2与B^0AT1、SGLT-1的mRNA表达量及血液中性氨基酸的含量均随之上升,GLUT-2的mRNA表达量无明显变化。结果提示,仔猪空肠中有ACE2存在,且ACE2与肠道氨基酸等物质的转运有关,这为挖掘ACE2的新功能提供了理论依据。
- 李志强闫书平纪晓霞王凯张源淑
- 关键词：血管紧张素转换酶2断奶仔猪
- 肾素血管紧张素系统(RAS)两条轴相互负向调节与大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)肝损伤的关系研究被引量：5
- 2019年
- 探讨了肾素血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)两条轴对大鼠非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝脏损伤的相互负向调节作用。30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和用药组。除正常对照组外,其余2组饲喂高脂饲料,用药组另外给伐他汀50 mg/kg·d。3周后,宰杀大鼠,测定血清中甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量;测定肝组织匀浆羟自由基(·OH)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)酶活性;ELISA法测定组织匀浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素1-7(Ang1-7)及白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;Western blot分析肝组织血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素转化酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ受体1亚型(AT1R)、Mas受体(MasR)蛋白水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清TG、AST和ALT含量以及·OH和NOS活性均显著升高(P<0.05), T-AOC、SOD活性显著降低(P<0.05);IL-1β和TNF-α含量极显著升高(P<0.01);ACE、ACE2的蛋白表达水平与ACE/ACE2的比值均显著升高(P<0.05),AngⅡ、Ang1-7含量与AT1R表达升高(P<0.05),MasR表达有升高趋势(P>0.05)。结论:高脂饲料连续饲喂3周可诱导大鼠发生NAFLD,肝脏局部RAS两条轴均处于激活状态,ACE介导AngⅡ-AT1R经典轴促进肝损伤,而ACE2介导Ang1-7-MasR轴抵抗肝损伤;ACE2负性调节RAS作用,对大鼠NAFLD时肝脏氧化应激及炎性损伤有一定保护作用。
- 刘颖王凯纪晓霞张源淑
- 关键词：负向调节非酒精性脂肪肝病肝损伤
- 血管紧张素转化酶2(ACE2)在小鼠乳腺中的表达定位及在LPS诱导的乳腺炎症损伤中的作用及其机制
- 血管紧张素转化酶2(Angiotensin Converting Enzyme 2,ACE2)是新发现的肾素-血管紧张素系统(RAS)中ACE的同源物,其在心肌损伤、糖尿病肾损伤、肝脏纤维化及SARS引起的肺损伤等病理过...
- 王鲲刘小倩肖航王凯刘颖张源淑
- 高精料饲喂产生LPS对干奶山羊能量代谢和相关激素的影响被引量：1
- 2017年
- 为了探讨高精料饲喂产生的脂多糖(LPS)对干奶期山羊血浆能量代谢产物和激素水平的影响,选择处于干奶期的奶山羊12只,随机分为2组,分别饲喂精粗比为4:6和6:4的日粮。结果表明,精粗比6:4的日粮饲喂2周后成功诱导山羊处于亚急性瘤胃酸中毒(SARA)状态,此时外周血液中的LPS浓度极显著升高(P<0.01)。血浆NEFA含量显著升高(P<0.05),血糖含量有上升的趋势但差异不显著(P>0.05)。血浆胰岛素样生长因子1(IGF-Ⅰ)含量显著下降(P<0.05);胰高血糖素、瘦素、催乳素含量升高,胰岛素含量降低,但差异均不显著(P>0.05)。本研究结果显示,当干奶期山羊饲粮中精饲料水平提高时,易造成SARA,血浆高浓度LPS引起机体免疫能量代谢及激素水平均发生变化,这些变化与机体的免疫反应有关。
- 王凯赵兴凯刘颖申正杰张源淑
- 关键词：LPS能量代谢激素
- 真核表达质粒pcDNA.3.1(+)-ACE2的构建及其在CHO细胞中的表达被引量：4
- 2018年
- 为了构建pcDNA.3.1（＋）-血管紧张素转化酶2（ACE2）真核表达质粒并检测在中国仓鼠卵巢（CHO）细胞中的表达,从羊肾脏中提取总RNA,经RT-PCR扩增出ACE2基因,后将其与pcDNA3.1载体进行连接重组,构建pcDNA3.1（＋）-ACE2真核表达质粒,经HindⅢ、XhoⅠ限制性内切酶双酶切及DNA序列测序分析等方法验证后,通过Lipofectamine 3000脂质体介导转染至CHO细胞,Western blot法检验ACE2基因在蛋白质水平上的表达。结果显示：RT-PCR扩增出大小约为2 200 bp特异ACE2基因片段,连接获得的pcDNA3.1（＋）-ACE2重组体经HindⅢ、XhoⅠ酶切后分别出现约2 200 bp和5 000 bp片段,测序分析与Gen Bank上公布的结果完全一致,表明成功克隆了重组pcDNA3.1（＋）-ACE2真核表达质粒,Western blot检测显示该pcDNA3.1（＋）-ACE2能在CHO细胞中表达。本研究成功构建了pcDNA3.1（＋）-ACE2真核表达质粒,并证实其能在CHO中表达,为后续探究ACE2蛋白活性及其作用的研究奠定了基础。
- 肖航王凯王换换王鲲张源淑
- 关键词：真核表达质粒转染CHO细胞
