于丽
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 亚甲基四氢叶酸还原酶的纯化及催化性质研究被引量：2
- 2011年
- 对亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)的体外酶促反应性质进行研究。通过盐析、DEAE-Sepharose fast flow柱层析纯化猪肝中的MTHFR,采用荧光法分析测定该酶纯化结果和酶促动力学性质。结果表明,MTHFR的纯化倍数可达20倍以上;测得最适酶促反应条件为pH 6.8,37℃;NADPH浓度1.2 mmol/L;以5,10-亚甲基四氢叶酸为底物测得米氏常数km=70.3μmol/L。研究发现,别构抑制剂S-腺苷甲硫氨酸(AdoMet)可使MTHFR的体外活性降到原活性的60%以下。本文初步探讨了MTHFR的催化性质,对MTHFR催化活性的主要影响因素进行研究,为酶促法合成5-甲基四氢叶酸的进一步研究奠定了基础。
- 于丽许激扬卞筱泓刘琳刘娅梅
- 关键词：亚甲基四氢叶酸还原酶酶促反应荧光
- 亚甲基四氢叶酸还原酶的纯化及催化性质研究
- 对亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)的体外酶促反应性质进行研究.通过沉淀法,DEAE-Sepharose fast flow柱层析纯化猪肝中的MTH...
- 于丽许激扬刘琳卞筱泓刘娅梅
- 关键词：合成工艺亚甲基四氢叶酸还原酶分离纯化
- 文献传递
- 高产L-5-甲基四氢叶酸基因工程菌的构建与表达被引量：1
- 2011年
- L-5-甲基四氢叶酸是叶酸最具生物活性的形式,也是唯一可以穿透血脑屏障的叶酸类药物,有极大的应用价值。为提高菌体内L-5-甲基四氢叶酸的含量,将5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因metF插入载体质粒,并将重组质粒pET-22b-metF转化至E.coliBL21(DE3),乳糖诱导蛋白表达。成功构建的重组菌经诱导后,L-5-甲基四氢叶酸量比原始菌株中提高28%,达到66μg/g菌体。本研究成功的为生物合成L-5-甲基四氢叶酸寻找到一种新的途径。
- 刘琳许激扬卞筱泓于丽刘娅梅
- 关键词：5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶克隆
