张立功
- 作品数：12 被引量：40H指数：3
- 供职机构：蚌埠医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：安徽省教育厅重点项目国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 四君子汤对胃癌细胞株SGC-7901侧群细胞增殖的影响被引量：11
- 2014年
- 目的对胃癌细胞株SGC-7901侧群(side population,SP)细胞、非侧群(non-side population,NSP)细胞及未分选(Total)细胞进行四君子汤药物血清干预,观察药物血清干预后胃癌细胞株SGC-7901的SP、NSP及Total细胞增殖能力的变化。方法 16只纯种新西兰家兔按随机数字表法分为对照组及四君子汤低[7 mL/(kg·d)]、中[14 mL/(kg·d)]、高[28 mL/(kg·d)]剂量组,每组4只,每组动物给予对应等体积灌胃,每天2次,持续2周。提取兔血清,应用高效液相色谱法对药物血清进行鉴定;应用流式细胞仪对人胃癌细胞株SGC-7901的SP细胞进行检测并分选出SP及NSP细胞;应用CCK-8法检测SP、NSP及Total细胞的增殖曲线及药物血清干预后的SP、NSP及Total细胞增殖能力变化。结果在制备的药物血清中检测到四君子汤的有效成分人参皂苷Rg1;胃癌细胞株SGC-7901 SP细胞的增殖能力明显高于NSP及Total细胞(P<0.05),药物血清对胃癌细胞株SGC-7901 SP、NSP及Total细胞的增殖具有抑制作用,但对SP细胞的增殖抑制作用明显低于NSP及Total细胞(P<0.05)。结论四君子汤可以明显抑制胃癌细胞株SGC-7901的SP、NSP及Total细胞增殖,但对3组细胞抑制程度存在明显差异。
- 李靖钱军贾建光金鑫喻大军谢波钱立宇张立功郭晨旭
- 关键词：四君子汤胃癌侧群细胞细胞增殖
- 长链非编码RNA ATB对三阴性乳腺癌细胞的增殖、凋亡及上皮间充质转化的影响
- 2022年
- 目的探索三阴性乳腺癌细胞(triple negative breast cancer,TNBC)中长链非编码RNA ATB(long non-coding RNA activated by transforming growth factorβ,lncRNA ATB)对其增殖、凋亡、侵袭及上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用。方法收集2020年1月至2020年12月蚌埠医学院第一附属医院肿瘤外科行手术治疗的18例TNBC患者的癌组织,以对应的癌旁组织作为对照。qRT-PCR检测lncRNA ATB在TNBC癌组织及癌旁组织中的表达。qRT-PCR检测lncRNA ATB在TNBC细胞MDA-MB-231与人乳腺上皮细胞MCF-10A中的表达情况。下调MDA-MB-231细胞中lncRNA ATB的表达为si-ATB组,并检测沉默效率,阴性小干扰RNA作对照,为si-NC组。CCK-8、流式细胞仪、划痕实验、Transwell实验分别检测下调lncRNA ATB对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力的影响。Western blot检测下调lncRNA ATB对MDA-MB-231细胞中上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-cadherin、vimentin、N-cadherin的影响。结果相比癌旁组织,lncRNA ATB在TNBC组织中的表达明显增加(P<0.05)。相比人乳腺上皮细胞MCF-10A,TNBC细胞MDA-MB-231中lncRNA ATB的表达明显增加(P<0.05)。CCK-8结果显示相比si-NC组,si-ATB组MDA-MB-231细胞的增殖能力在48,72,96 h时明显减弱(均P<0.05)。流式细胞仪结果显示相比si-NC组,si-ATB组MDA-MB-231细胞的凋亡率明显增加(12.24%±1.52%vs 24.33%±2.15%,P<0.05)。相比si-NC组,划痕实验结果显示si-ATB组MDA-MB-231细胞的迁移能力明显减弱(61.0%±5.0%vs 31.7%±3.3%,P<0.05)。相比si-NC组,Transwell实验结果显示si-ATB组MDA-MB-231细胞的侵袭能力明显减弱(40.33±3.51 vs 15.67±2.52,P<0.05)。Western blot结果显示,相比si-NC组,si-ATB组E-cadherin蛋白在MDA-MB-231细胞中的相对表达量明显增加(0.42±0.04 vs 0.63±0.05,P<0.05);相比si-NC组,si-ATB组vimentin蛋白在MDA-MB-231细胞中的相对表达量明显减弱(0.55±0.05 vs 0.32±0.04,P<0.05);相比si-NC组,si-ATB组
- 郭晨旭刘静波许睿朱超张立功钱军
- 关键词：三阴性乳腺癌上皮间充质转化增殖凋亡
- VCAN通过PI3K/AKT信号通路调控乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖
- 2020年
- 目的探讨多能蛋白聚糖(VCAN)通过PI3K/AKT信号通路对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响。方法利用Western Blot和qRT-PCR检测VCAN在正常人乳腺细胞MCF-10A和三株乳腺癌细胞中的表达水平。选取VCAN高表达细胞株MDA-MB-231为实验对象,实验分组为NC组、siRNA1-VCAN组和siRNA2-VCAN组。采用MTT法及克隆形成法检测转染后的乳腺癌细胞增殖变化。Western Blot检测p-AKT、AKT、p-PI3K、PI3K的蛋白相对表达水平。结果与正常人乳腺细胞相比,VCAN在乳腺癌细胞中的表达量显著上升(P<0.05)。下调VCAN表达量,MDA-MB-231细胞的增殖显著被抑制(P<0.05)。同时,下调VCAN表达量,p-AKT、p-PI3K蛋白水平显著下降(P<0.05)。结论VCAN在乳腺癌MDA-MB-231细胞中,可能通过PI3K/AKT信号通路调控细胞增殖能力。
- 谢强钱军张明亮张立功郭晨旭许睿
- 关键词：乳腺癌细胞增殖PI3K/AKT
- KDM6A在乳腺癌中的表达及其对相关恶性细胞生物学行为的研究
- 2023年
- 目的研究赖氨酸去甲基化酶6A(Lysine demethylase 6A,KDM6A)在乳腺癌组织中的表达并检测其对乳腺癌细胞恶性生物学行为的研究。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot检测18例乳腺癌患者新鲜癌组织及癌旁正常组织中KDM6A表达差异;构建pcDNA3.0-KDM6A载体,建立KDM6A过表达的乳腺癌细胞株,qRT-PCR进行验证;采用CCK-8实验及流式细胞术检测KDM6A过表达后乳腺癌细胞增殖和凋亡变化;Transwell及细胞划痕愈合实验检测KDM6A过表达后乳腺癌细胞侵袭及迁移变化;Western blot检测凋亡信号通路蛋白(Bcl-2、Bax、Caspase-3)表达水平。结果乳腺癌组织中KDM6A表达量较癌旁正常组织显著降低(P<0.001)。与正常乳腺细胞MCF-10A相比,KDM6A在SKBR3、MDA-MB-231、MCF-7乳腺癌细胞系中的表达明显降低(P<0.05)。过表达乳腺癌细胞中KDM6A后,细胞增殖、侵袭及迁移能力显著下降(P<0.05),凋亡率明显上升(P<0.05),并且细胞中的Bcl-2蛋白表达量显著降低(P<0.05),Bax、Caspase-3表达量显著增加(P<0.05)。结论KDM6A在乳腺癌组织中低表达,过表达KDM6A可抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移,并提高细胞凋亡率,这可能与KDM6A调控凋亡相关蛋白具有相关性。
- 谢强钱军张立功殷发祥储云绵许睿
- 关键词：乳腺癌增殖迁移凋亡
- 长链非编码RNA MEG3对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响被引量：1
- 2021年
- 目的:研究长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)MEG3对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响并探究其机制。方法:通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7、SKBR-3中LncRNA MEG3表达,选取表达水平较低的MCF-7细胞株,构建pcDNA3.1-MEG3重组质粒,过表达MCF-7中的LncRNA MEG3,再通过qRT-PCR检查细胞miRNA-21变化情况。其次,通过划痕实验检测MCF-7细胞迁移变化;Transwell实验检测MCF-7细胞侵袭变化;Western blot检测上皮间质转化(EMT)相关分子(E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin)的表达量变化。结果:在MEG3过表达的MCF-7细胞株中,miRNA-21表达量降低,且细胞的侵袭及迁移能力也下降,细胞中的E-Cadherin蛋白表达量增高,而N-Cadherin及Vimentin表达量降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:LncRNA MEG3通过调控miRNA-21影响乳腺癌细胞侵袭及迁移能力,这种改变可能与E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin的表达逆转EMT进程有一定相关性。
- 许睿钱军张明亮张立功郭晨旭谢强
- 关键词：乳腺癌长链非编码RNAMIRNA-21上皮间质转化
- 染料法腋窝反向淋巴作图与前哨淋巴结活检在乳腺癌术中应用研究被引量：5
- 2015年
- 目的 研究染料法腋窝反向淋巴作图（axillary reverse mapping,ARM）结合前哨淋巴结活检（sentinel lymph nodebiopsy,SLNB）在乳腺癌术中的应用。方法 回顾性分析2011年6月至2013年6月蚌埠医学院第一附属医院肿瘤外三科收治的共363例乳腺癌病人资料,均行乳腺癌腋窝淋巴结清扫术（ALND）,其中联合行ARM＋SLNB者78例（ARM＋SLNB组）,单纯行ALND者285例（ALND组）,比较两组术后疗效。结果 ALND组病人术后带管时间为（12.3±1.5）d,而ARM＋SLNB组为（9.6±1.9）d,二者差异有统计学意义（t=11.74,P〈0.05）。ARM＋SLNB组术后第1-7天的引流量均较ALND组明显减少,差异有统计学意义（P〈0.05）。随访12个月,两组均未发现Ⅲ级水肿,第12个月ALND组与ARM＋SLNB组水肿发生率差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 ARM可保护患侧上肢淋巴通道,减少术后上肢水肿的发生。
- 钱立宇钱军李德群王亚国喻大军李靖张立功
- 关键词：前哨淋巴结乳腺癌上肢淋巴水肿
- FOLR1表达对乳腺癌患者预后价值及相关生物学行为的影响研究
- 2023年
- 目的研究叶酸受体1(Folate-receptor 1,FOLR1)在乳腺癌患者中的表达情况及预后价值,并检测FOLR1的表达对相关细胞系增殖的影响。方法收集10例新鲜乳腺癌及癌旁正常组织,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组FOLR1蛋白表达差异,同时收集80例乳腺癌患者临床病理学资料及预后情况,免疫组化检测80例癌组织及癌旁正常组织蜡块表达情况,并分析FOLR1表达与临床病理学特征及预后之间的相关性。通过siRNA转染乳腺癌细胞MCF7,敲低FOLR1表达量,qRT-PCR验证转染效率。其次,通过CCK8实验检测MCF7细胞增殖变化;Western blot检测PI3K/Akt信号通路的蛋白表达量变化。结果与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织中FOLR1表达量明显增高(P<0.05),FOLR1在乳腺癌中的表达量与肿瘤大小(P=0.027)、Ki-67(P=0.031)、TNM分期(P=0.041)有关。并且FOLR1表达量越高,患者生存率越低。敲低MCF7细胞FOLR1蛋白表达量后,细胞增殖能力明显降低(P<0.05),并且p-PI3K和p-Akt在细胞中表达量均明显降低(P<0.05)。结论FOLR1在乳腺癌中表达明显升高,并且FOLR1表达影响乳腺癌患者的预后,这可能与调控PI3K/Akt信号通路改变乳腺癌细胞增殖具有一定相关性。
- 朱超张立功郭晨旭殷发祥许睿钱军
- 关键词：乳腺癌预后增殖
- 青蒿素诱导胆囊癌细胞的细胞周期阻滞和抑制细胞凋亡的体外实验研究被引量：22
- 2016年
- 目的 探讨青蒿素对胆囊癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响.方法 体外培养胆囊癌细胞株（GBC-SD和NOZ）.采用MTT法检测不同浓度青蒿素对两株细胞增殖的影响;通过流式细胞仪检测20 μmol/L青蒿素处理24h对细胞周期的影响;通过FITC-Annexin V双染法检测20 μmol/L青蒿素处理24 h对细胞凋亡的影响;通过免疫印迹法检测20 μmol/L青蒿素处理24 h后p-ERK1/2、CDK4、cyclin D1、p16、cytochrome C、caspase-3在细胞内的表达水平变化.两组间比较采用t检验,两组以上比较采用单因素方差分析.结果 WST-1实验结果显示,青蒿素可以抑制GBC-SD和NOZ细胞增殖,且该抑制作用具有浓度依赖性,青蒿素对GBC-SD和NOZ细胞的半数抑制浓度分别为14.05 μmol/L和12.42 μmol/L.细胞周期分析结果显示,GBC-SD细胞[（74.60＆#177;2.24）％]和NOZ细胞[（78.86＆#177;2.02）％]G1期比例高于对照组[（54.26＆#177;1.61）％、（58.44＆#177;1.83）％]（F=0.658,P=0.000;F =0.055,P=0.000）.免疫印迹法检测结果显示,青蒿素作用24 h后,细胞周期调控相关蛋白CDK4和cyclin D1蛋白表达水平显著降低,而p16蛋白表达水平显著增高（P值均＜0.05）.Annexin V/PI双染凋亡检测结果显示,GBC-SD细胞[（15.67＆#177;2.40）％]和NOZ细胞[（16.51＆#177;2.20）％]的凋亡比例高于对照组[（6.28＆#177;1.18）％、（6.94＆#177;1.23）％]（F=1.110,P=0.004;F=1.273,P=0.003）.免疫印迹法检测结果显示,20 μmol/L青蒿素处理24h后,细胞色素C在线粒体中的含量显著降低,而在胞质中的含量显著增高（P值均＜0.05）.结论 青蒿素可能通过抑制ERK1/2信号转导通路干扰细胞增殖,通过抑制CDK4和cyclin D1,诱导p16表达造成G1期阻滞,通过激活线粒体途径介导细胞凋亡.
- 贾建光张立功郭晨旭王亚国陈邦领王益民钱军
- 关键词：胆囊肿瘤青蒿素类细胞凋亡
- miR-491-5p靶向FOLR1对乳腺癌细胞增殖及侵袭的影响
- 2023年
- 目的探讨miR-491-5p对乳腺癌增殖及侵袭的影响及相关机制。方法收集本科室30例有明确病理诊断的新鲜乳腺癌及相对应的癌旁正常组织,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-491-5p及叶酸受体1(folate-receptor 1,FOLR1)基因表达量。选取MCF-7细胞,分为:control组、NC-mimics组、miR-491-5p mimics组、NC inhibitor组和miR-491-5p inhibitor组,克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测AKT/mTOR信号通路p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR蛋白表达情况。双荧光素酶实验检测分析miR-491-5p与FOLR1间的靶向关系。选取MCF-7细胞进行回复实验,分为NC inhibitor组、miR-491-5p inhibitor组、miR-491-5p inhibitor+si-NC组和miR-491-5p inhibitor+si-FOLR1组,克隆形成实验及Transwell实验分别检测细胞增殖及侵袭变化,Western blot检测AKT/mTOR信号通路p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR蛋白表达情况。结果与癌旁正常组织相比,癌组织中miR-491-5p的基因表达量明显降低(P<0.05),FOLR1基因表达量明显升高(P<0.05)。与control组及NC-mimics组相比,miR-491-5p mimics组细胞增殖及侵袭能力均降低(P<0.05),p-AKT和p-mTOR蛋白表达量减少(P<0.05);与control组及NC inhibitor组相比,miR-491-5p inhibitor组细胞增殖及侵袭能力均升高(P<0.05),p-AKT和p-mTOR蛋白表达量增高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测证明FOLR1是miR-491-5p的靶标。回复实验表明,与miR-491-5p inhibitor组及miR-491-5p inhibitor+si-NC组相比,miR-491-5p inhibitor+si-FOLR1组细胞增殖及侵袭能力明显降低(P<0.05),p-AKT和p-mTOR蛋白表达量显著减少(P<0.05)。结论miR-491-5p靶向FOLR1抑制乳腺癌细胞增殖及侵袭,可能与改变AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达具有一定相关性。
- 朱超张立功郭晨旭殷发祥许睿钱军
- 关键词：乳腺癌增殖
- MDT联合PBL教学模式在乳腺外科临床教学中的应用及效果探讨
- 2023年
- 探讨多学科讨论决策(MDT)联合以问题为基础启发教学模式(PBL)在乳腺外科临床规培医师教学中的应用效果。方法 以2021年7月-2022年7月期间在蚌埠医学院第一附属医院肿瘤外科甲乳病区进行住院医师培训的24名学员作为观察对比对象,采用随机分配的原则将以上学员分成两组,试验组和对照组,分别采用不同的教学模式,试验组应用MDT结合PBL教学模式,对照应用传统教学模式,在学员出科时统计两组的理论和技能操作的成绩,调察同学对教学方式的满意率。结果 MDT结合PBL教学模式的试验组技能操作成绩(92.56±1.34)分,理论考核成绩(91.76±2.38)分。采用传统教学的对照组分别为技能操作成绩(83.72±1.48)分和理论考核成绩(81.23±2.34)分,试验组分值显著高于对照组(P<0.05)。满意度调查中试验组统计数据也高于对照组(P<0.05)。结论 MDT联合PBL的教学方式在乳腺外科的规培培训中,能显著提高学员的基本理论和操作成绩,在今后的教学中适宜进一步推广,更好的服务于教学培养优秀人才。
- 张立功耿海燕
- 关键词：教学MDTPBL乳腺外科
