熊熙 作品数:5 被引量:27 H指数:3 供职机构: 上海交通大学附属儿童医院 更多>> 发文基金: 上海市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
甲基强的松龙激活肝细胞自噬改善脂多糖诱导的肝损伤 被引量:3 2017年 目的探讨甲基强的松龙(methylprednisolone,MP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肝损伤及肝细胞自噬的影响和机制。方法48只8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、LPS组(分LPS注射后1h、2h、4h、8h、24h、48h处死组)和LPS+MP组。LPS组小鼠腹腔注射LPS(10ms/kg)制作内毒素血症模型,LPS+MP组腹腔注射LPS(10ms/kg)+MP[20ms/(kg·d)],对照组腹腔注射等容量生理盐水。石蜡病理切片经苏木精-伊红(HE)染色观察各组肝组织病理学变化。检测各组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)水平;荧光实时定量PCR检测肝组织TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA水平;Western-blot分析肝组织自噬蛋白P62、LC3Ⅱ/Ⅰ的表达。结果(1)病理观察LPS+MP组肝小叶结构比LPS处理组相对完整,肝细胞空泡样变、嗜酸样变较轻;(2)LPS+MP组血清ALT、TBIL和TBA[(63.40±11.55)U/L,(0.37±0.08)μmol/L,(4.67±2.58)μmol/L]水平显著低于LPS组[(104.50±29.34)U/L,(0.52±0.12)μmol/L,(10.33±2.34)μmol/L,P=0.009;P=0.032;P〈0.001];(3)肝组织TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA相对表达量[(4.18±0.81),(0.31±0.14),(0.17±0.05)]显著低于单纯LPS组[(10.09±4.73),(1.06±0.68),(1.22±0.50),P=0.002;P=0.008;P=0.001];(4)LPS注射后,肝组织自噬活性呈2h内激活而后抑制的变化趋势,而LPS+MP组自噬活跃,肝脏内自噬蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著增强。结论甲基强的松龙能减轻LPS对自噬的抑制作用,激活肝细胞自噬,降低炎症细胞因子表达,改善脓毒症肝损伤。 熊熙 任玉倩 王春霞 崔云 张育才关键词:自噬 内毒素血症 肝损伤 小鼠 内毒素对小鼠胆汁酸转运体Ntcp mRNA和Bsep mRNA表达及肝功能的影响 被引量:3 2017年 目的探讨脂多糖(LPS)建立内毒素血症小鼠模型中,LPS剂量和作用时间对肝脏胆汁酸转运体钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白(Ntcp)和胆盐输出泵(Bsep)mRNA表达,以及肝功能的影响。方法128只雄性C57BL/6小鼠,腹腔注射LPS(剂量分别是5、10、20、40mg/kg),制作内毒素血症模型;并设生理盐水(NS)对照组、健康对照组;按给药后取材时间进一步分为24h、48h、72h组,每组8只。留取小鼠血液样本测定血清TBIL、TBA、ALT、AST水平,留取肝脏标本,实时荧光定量聚合酶链反应技术(RT-qPCR)测胆汁酸转运体NtcpmRNA和BsepmRNA表达量,苏木精.伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化。各组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验进行统计。结果(1)内毒素血症各组小鼠NtcpmRNA、BsepmRNA相对表达量在24—72h内下降,24h表达最低[LPS5、10、20、40ms/kg组NtcpmRNA相对表达量分别为(0.64±0.02)、(O.53±0.14)、(0.25±0.09)、(0.15±0.07),BsepmRNA相对表达量分别为(0.74±0.12)、(0.58±0.11)、(0.41±0.09)、(0.27±0.11)],并随着LPS剂量增加逐渐降低,24h各组差异均有统计学意义(NtcpmRNA、BsepmRNA对应F=5.29、F=9.31,P=0.04、P=0.02)。(2)内毒素血症小鼠各组总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)较对照组均升高(P〈0.05),24h达峰值;其中40mg/kgLPS处理后72h较24h均有显著降低,TBIL浓度为(1.29±0.25)μmol/L和(1.71±0.22)μmol/L,TBA浓度为(6.97±0.98)μmol/L和(8.96±1.01)μmol/L,ALT水平为(120.17±21.08)u/L和(179.22±16.57)U/L,AST水平为(360.34±35.31)U/L和(510.97±34.70)U/L,均P〈0.05。(3)5、10ms/kgLPS组小鼠24h见肝组织疏松淡染,间质炎性细胞浸润,48h及 李江 崔云 张育才 任玉倩 李芮 熊熙 王春霞关键词:内毒素血症 小鼠 心型脂肪酸结合蛋白在儿童严重脓毒症及脓毒性休克中的意义 被引量:7 2018年 目的探讨心型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid-binding protein,H-FABP)对儿童严重脓毒症及脓毒性休克患者心肌损伤和预后的预测价值。方法前瞻性观察2016年10月至2017年9月上海交通大学附属儿童医院重症医学科(pediatric intensive care unit,PICU)收治的严重脓毒症及脓毒性休克患儿共78例。其中,严重脓毒症33例(42.3%),脓毒性休克45例(57.7%)。依据28d生存情况分为死亡组(14例)与存活组(64例)。收集患者性别、年龄、体质量指数、儿童死亡危险评分(PRISMⅢ)等基本资料,测定人PICU6h内血浆H-FABP,N末端脑钠利肽(B-type natriuretic,NT-BNP)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes,CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cardiac troponinI,cTnI)、乳酸脱氢酶(1actate dehydrogenase,LDH)、血乳酸(1actic acid,Lac)等指标。采用受试者特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线及Kaplan-meier生存曲线分析以上指标患者心肌损伤及预后的关系。结果脓毒症休克组H-FABP和NToBNP显著高于严重脓毒症组(P〈0.05)。死亡组血浆H-FABP、NT-BNP、LDH、CK-MB[分别为(49.10±65.14)ng/mL,2498.5(615.58,13075.75)pg/mL,(2403.88±415.97)U/L,(131.63±130.91)pg/mL]均明显高于存活组[分别为(5.06±4.29)ng/mL,672(279.5,1453.5)pg/mL,(37.30±29.24)U/L,(1656.86±2715.73)pg/mL],两组间差异有统计学意义(P〈0.05)。受试者工作曲线(ROC曲线分析H-FABP、BNP、LDH和CK-MB预测儿童严重脓毒症和脓毒症休克患者的28d死亡风险,结果提示H-FABP(AUC=0.858,P=0.002,95%CI:0.716~1.0)优于CK-MB(AUC=0.841,95%CI:0.696-0.986;P=0.003),LDH(AUC=0.818,95%CI:0.610~1.000;P=0.005)和NT-BNP(AUC=0.728,95%CI:0.535.0.921;P=0.045)。H-FABP预测儿童严重脓毒症� 周益平 熊熙 王春霞 缪惠洁 崔云 张育才关键词:心型脂肪酸结合蛋白 严重脓毒症 脓毒性休克 儿童 甲基强的松龙抑制STAT3-ERK1/2通路改善脂多糖诱导急性肺损伤 被引量:10 2019年 目的探讨甲基强的松龙(methylprednisolone, MP)对脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)诱导急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中STAT3-ERK1/2的影响和作用。方法8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机(随机数字法)分为4组(每组8只):健康对照组(Control组)、LPS造模组(LPS组)、单纯MP给药组(MP组)、MP干预组(LPS+MP组)。经肺组织湿/干质量比(W/D)测定、苏木精-伊红(HE)染色、酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫印迹(Western Blotting)检测,分析肺组织病理变化,血清及肺组织中炎症因子含量及表达水平,STAT3和ERK1/2信号通路表达水平。多组比较采用单因素方差分析,均数间两两比较采用LSD-t检验。结果(1)LPS+MP组小鼠肺组织的W/D显著低于LPS组[(3.01±0.84) vs (3.87±0.17),P = 0.038);(2)LPS+MP组小鼠肺组织较LPS组炎症细胞浸润少,肺泡结构基本完整;(3)LPS+MP组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平较LPS组显著下降[分别为(3.17±1.64)pg/mL vs ( 6.61±1.27) pg/mL,P = 0.003;(1.42±0.35) pg/mL vs (3.80±1.35) pg/mL, P = 0.008);肺组织TNF-α mRNA和IL-6 mRNA较LPS组显著降低[分别为(5.10±0.81) vs (12.2±5.05),P = 0.03;(1.62±1.00) vs (11.12±6.56),P = 0.026];(4)MP干预显著抑制STAT3和ERK1/2信号通路,表现为磷酸化STAT3(p-STAT3)和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达水平降低[(0.26 ±0.05) vs (0.86 ±0.06), P < 0.001,(0.24±0.02) vs (1.34±0.32), P < 0.001]。结论甲基强的松龙对LPS诱导的急性肺损伤具有保护作用,其机制与抑制STAT3-ERK1/2信号通路、下调TNF-α和IL-6表达有关。 宋佳 王春霞 熊熙 任玉倩 张育才关键词:STAT3 ERK1/2 脂多糖 急性肺损伤 成纤维细胞生长因子19预测儿童脓毒症合并胃肠功能障碍的临床价值 被引量:4 2020年 目的·探讨成纤维细胞生长因子19(fibroblast growth factor 19,FGF19)预测脓毒症患儿胃肠功能障碍的潜在价值。方法·前瞻性纳入2018年1月至2018年12月上海交通大学附属儿童医院儿童重症监护病房(pediatric intensive care unit,PICU)收治的101例脓毒症患儿,排除11例血清FGF19值缺失患儿,共90例患儿纳入分析。根据是否存在胃肠道功能障碍,将其分为脓毒症合并胃肠道功能障碍组(n=32)和脓毒症未合并胃肠道功能障碍组(n=58)。入PICU时检测血清FGF19水平,采用非参数检验(Mann-Whitney U检验)比较2组患儿间FGF19水平的差异,多因素Logistic回归分析脓毒症合并胃肠功能障碍的相关因素。结果·PICU患儿病死率为12.2%(11/90)。脓毒症合并胃肠功能障碍组的PICU患儿病死率高于未合并胃肠道功能障碍组,但差异无统计学意义(18.8%vs 8.6%,P=0.160)。脓毒症合并胃肠功能障碍组患儿血清FGF19水平显著低于未合并胃肠功能障碍组,差异有统计学意义[48.4(27.7,95.6)μg/mL vs 77.6(45.8,151.2)μg/mL,P=0.046]。受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)分析结果显示:FGF19预测儿童脓毒症合并发生胃肠功能障碍的ROC曲线下面积(area under ROC curve,AUC)为0.636(95%CI 0.515~0.757),其效能与降钙素原[AUC=0.683(95%CI 0.562~0.804),P=0.597]相似;入PICU时血清FGF19<60μg/mL提示患儿发生胃肠功能障碍风险增加。结论·血清FGF19可作为儿童脓毒症合并胃肠功能障碍的新型预测指标。 唐晓梦 任玉倩 熊熙 缪惠洁 缪惠洁 崔云 崔云 张育才关键词:胃肠功能障碍 脓毒症 儿童