国家自然科学基金(30300253) 作品数:10 被引量:74 H指数:4 相关作者: 姜勋平 陈秀萍 丁家桐 陈锋剑 刘桂琼 更多>> 相关机构: 华中农业大学 扬州大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 经济管理 更多>>
应用mRNA差异显示技术研究鸡贮精腺差异表达基因 用 mRNA 差异显示技术对鸡贮精腺中基因的差异表达进行研究,分离并筛选出两个差异表达片段 SST02和 SST03,经测序和 BLAST 比对,发现 SST02碱基序列与鸡第3号染色体上的丝裂素活化蛋白激酶基因的一部分... 朱金金 刘桂琼 王志跃 杨海明关键词:MAPKS GPC 文献传递 动物卵巢细胞凋亡及其调控机制 被引量:14 2004年 主要阐述了动物卵巢内细胞凋亡与卵泡发育的关系,以及卵巢内细胞凋亡的调控。 陈秀萍 姜勋平关键词:动物 卵巢 细胞凋亡 卵泡 发育 Bcl-2基因RNA干扰对体外培养的鹅卵泡颗粒细胞凋亡、增殖和孕激素分泌的影响 被引量:1 2008年 根据已发表的Bcl-2基因序列设计3对siRNA(Small interference RNA)序列,构建干扰表达载体,转染体外培养的鹅卵泡颗粒细胞,48h后利用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量、凋亡和增殖情况,收集细胞培养液用放射免疫分析法检测孕激素(P)的分泌水平;此外,还检测了F1~F4卵泡、最小的排卵前卵泡(The smallest preovulatory follicle,SPF)、小黄卵泡(Small yellow follicle,SYF)和闭锁卵泡(Atresic follicle)颗粒细胞Bcl-2蛋白表达和凋亡情况。结果表明:(1)各级卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白的表达存在着差异,正常卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量显著高于闭锁卵泡(P〈0.05),SPF颗粒细胞Bcl-2蛋白表达水平显著高于SYF(P〈0.05);(2)干扰组Bcl-2蛋白表达水平显著低于所有对照组(P〈0.05),而细胞凋亡指数(Apoptosis index,AI)、增殖指数(Proliferation index,PI)和P分泌水平均高于对照组。 陈秀萍 陈锋剑 姜勋平 李兆国 丁家桐关键词:BCL-2基因 RNA干扰 颗粒细胞凋亡 孕激素 抑制素α基因表达下调对鹅卵泡颗粒细胞凋亡和增殖的影响(英文) 被引量:2 2007年 抑制素α基因是控制家禽排卵率的一个重要候选基因。为研究抑制素α基因对体外培养的鹅卵泡颗粒细胞增殖凋亡的遗传作用,构建psiRNA-INHα1和psiRNA-INHα2两个抑制素α基因干扰载体,以降低抑制素α基因表达。体外培养鹅F1和闭锁卵泡的颗粒细胞,经抑制素α基因干扰48h后,荧光显微镜检测转染效率,同时用流式细胞术检测抑制素α基因表达水平,以及细胞生长周期、细胞凋亡指数和增殖指数的变化,用放免法测定细胞培养上清中雌激素和孕酮水平。结果表明,抑制素α基因干扰后卵泡颗粒细胞抑制素表达水平比对照组降低30%~40%(P<0.05);细胞凋亡指数和增值指数显著高于对照组(P<0.05);细胞分泌雌激素水平显著下降(P<0.05)。由此推断,抑制素α基因对颗粒细胞具有显著的抗凋亡效应。 陈锋剑 姜勋平 陈秀萍 刘桂琼 丁家桐关键词:RNA干扰 颗粒细胞凋亡 细胞增殖 猪FUT1基因对肉质和胴体性状的影响 被引量:36 2005年 测定139头杂交猪(大白猪和梅山猪)的14个肉质性状和8个胴体性状,用PCRRFLP方法检测FUT1基因型。分析猪FUT1基因型间肉质和胴体性状差异,发现AA基因型猪3个部位肌肉pH值均比AG基因型的高,其中pH(LD)达到显著水平(P<0.05)。AA基因型猪肌肉系水力显著高于AG猪的系水力(91.02%vs86.70%,P<0.05)。AA基因型猪的肉色值显著高于AG猪的(P<0.05)。AA基因型猪3个部位肌肉膘厚值均较低,其中最后肋骨膘厚和倒数三四肋骨膘厚分别比AG基因型猪的低4.26mm和3.96mm(P<0.05)。AA基因型猪瘦肉率比AG基因型猪的高3.31%(53.46%vs50.15%,P<0.05)。以上结果表明,FUT1基因的AA基因型对肉质和胴体性状具有显著的正遗传效应,这对于在抗病育种中应用该基因十分有利。 姜勋平 刘永刚 熊远著 邓昌彦关键词:FUT1基因 肉质 胴体 抗病 鹅卵泡颗粒细胞凋亡及其与生殖激素间的关系 被引量:6 2006年 采用正处于产蛋期的扬州鹅10只,取其卵泡分离颗粒层细胞,用70%乙醇固定后,应用流式细胞术分析颗粒细胞凋亡情况。同时,用连续采血的方法,每3h采血一次,分离血浆,用放射免疫分析法测定血浆促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌激素(Ez)水平,用以分析激素水平与凋亡间的关系。结果表明:(1)无论是健康卵泡还是闭锁卵泡,颗粒细胞90%以上均处于G1期,2%~6%处于G2期,S期比例最小;(2)闭锁卵泡颗粒细胞凋亡率极显著高于健康卵泡(P〈0.01);(3)随着健康卵泡直径的增加,颗粒细胞的凋亡呈降低趋势;(4)健康组鹅的FSH、E2水平要高于闭锁组,而LH水平要低于闭锁组。 陈秀萍 姜勋平 丁家桐关键词:扬州鹅 细胞凋亡 颗粒细胞 生殖激素 鹅bcl-2基因部分cDNA的克隆与序列分析 被引量:3 2005年 In order to amplify the partial bcl-2 gene of goose,we designed a pair of primers according to the reported chicken bcl-2 gene sequence in the GenBank,and obtained the gene by reverse transcript-polymerase chain reaction(RT-PCR).Then the gene was cloned into pMD-18T vector and identified by PCR.The nucleotide and amino acid sequences of goose partial bcl-2 gene were compared with the counterpart sequences of chicken,and the nucleotide homology was 92.49%.This is the first report of bcl-2 partial nucleotide sequence of goose. 陈秀萍 姜勋平 丁家桐关键词:BCL-2基因 克隆 鹅卵泡颗粒细胞凋亡与卵黄E2和P4水平关系的研究 被引量:4 2008年 以产蛋期扬州鹅为试验素材,取排卵前F1~F4卵泡、最小排卯前卵泡(SPF)、小黄卵泡(SYF)和闭锁卵泡,利用HE染色、透射电镜和流式细胞术分析鹅卵泡颗粒细胞凋亡,采用放射免疫分析法检测各级卵泡的卵黄雌激素(E2)和孕激素(P4)水平,探讨鹅卵泡颗粒细胞凋亡与卵黄E2和P4水平的关系。结果表明:①闭锁卵泡的颗粒细胞表现出明显的凋亡特征;②在卵泡选择过程中,E2水平显著上升,P4水平略有上升;③卵泡从排卵前阶段逐渐发育至F1卵泡的过程中,E2水平逐渐降低,而P4水平急剧升高;④闭锁卵泡的卵黄E2水平极显著低于各级正常卵泡,而P4水平极显著高于除F1卵泡外的其他各级卵泡;⑤正常卵泡的颗粒细胞凋亡指数与E2水平呈正相关(r=0.514),与P4水平呈负相关(r=-0.744)。 陈秀萍 陈锋剑 姜勋平 丁家桐关键词:颗粒细胞 凋亡 类固醇激素 鹅卵泡选择过程中差异表达基因的初步探索 被引量:3 2008年 采用银染mRNA差异显示技术筛选并克隆鹅卵泡选择过程中差异表达的基因片段,测序后在Genbank中进行Blast检索分析其同源性。共获得5个差异片段(EST,表达序列标签),经Blast同源性分析发现1个与人甲硫氨酸腺苷基转移酶Ⅱβ亚基(MATⅡβ)同源,同源性为95%,另一个与鸡mKIAA0840基因同源,同源性为94%,其余3个与已知基因或序列无任何同源性,可能是尚未发现的新基因。本研究结果显示鹅卵泡选择过程中的基因表达存在差异,筛选出的5个EST的全序列和功能有待于进一步深入研究。 陈秀萍 李波 陆艳凤 汪劲能 姜勋平 丁家桐关键词:基因 鸡贮精腺差异表达基因的研究 被引量:6 2007年 用mRNA差异显示技术对鸡贮精腺中基因的差异表达进行研究,分离并筛选出1个差异表达片段SST01,经测序和BLAST分析,发现SST01与鸡2号染色体上的neurexophilin基因高度同源(98%)。Neurex-ophilin是一种只在神经细胞中分泌的糖蛋白,说明神经系统参与贮精腺内精子的贮存或释放。Neurexophilin作为精液素的配体发挥功能,而精液素使细胞粘连,从而说明neurexophilin参与精子在贮精腺内的贮存过程。 朱金金 刘桂琼 王志跃 郭春燕 黄军 赖毓妍