董海燕
- 作品数：11 被引量：38H指数：4
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- 携绿色荧光蛋白和调控元件的人胰岛素原基因在HepG2细胞的表达
- 2007年
- 目的研究含绿色荧光蛋白(GFP)和人胰岛素原基因的逆转录病毒表达载体在HepG2细胞中的表达。方法将IRES-EGFP片段克隆到含调控元件的人胰岛素原基因逆转录病毒表达载体(pLXSN-GI-Ins)中,构建得到表达质粒pLXSN-GI-Ins-EGFP,经脂质体介导转染HepG2细胞后,各孔分别加入含有不同浓度葡萄糖的培养液继续培养24 h,在荧光显微镜下观察GFP基因的表达,检测细胞上清液中的胰岛素值及考察细胞中胰岛素mRNA的表达量。结果成功构建逆转录病毒表达质粒pLXSN-GI-Ins-EGFP。转染HepG2细胞后48 h,葡萄糖浓度为4.0,12.0,24.0 mmol/L,表达GFP基因的细胞数目占总细胞数目的比值分别为(4.00±0.15)%,(10.00±0.07)%,(25.00±0.10)%;胰岛素分泌量分别为(4.05±0.82),(8.67±0.62),(30.70±1.55)mU/L,不同葡萄糖浓度诱导的胰岛素mRNA表达量明显不同。结论含GFP和调控元件的人胰岛素原基因逆转录病毒表达载体能够在HepG2细胞中成功表达,并且GFP基因的表达量反映了人胰岛素的分泌量。
- 邵敬伟董海燕王涛
- 关键词：绿色荧光蛋白质类逆转录病毒科转染细胞
- 一种检测哺乳动物血液中微量循环肿瘤细胞的特异性方法
- 本发明公开了一种检测哺乳动物血液中微量循环肿瘤细胞的特异性方法，依本方法设计的DNA纳米器件（PDN）可特异性的与循环肿瘤细胞表面高表达的蛋白特异性结合，并利用免疫磁珠分离技术将结合有PDN的循环肿瘤细胞从血液中分离。P...
- 贾力董海燕王杰韩龙宇
- 一种纳米‑双环状适配体探针及其应用
- 本发明公开了一种纳米‑双环状适配体探针及其应用。该纳米‑双环状适配体探针（G‑dApR）极其稳定，不会被体内DNA降解酶所降解。同时，可特异性识别并与血癌细胞表面高表达的生物标记物相结合，且能有效抑制目标细胞的生物活性。...
- 贾力董海燕张婷霞
- 文献传递
- 四种中药激活PXR及对大鼠肝细胞
- 董海燕
- 关键词：细胞色素P450CYP3A4孕烷X受体中药
- 中药莪术激活PXR及对大鼠肝细胞色素P450 3A的影响被引量：12
- 2008年
- 目的考察莪术能否通过体外激活PXR调节细胞色素P4503A4(CYP3A4)的转录表达及对大鼠肝脏CYP3A在酶活性及mRNA表达的诱导作用。方法在HepG2细胞中,采用瞬时共转染报告基因实验研究莪术对PXR介导的CYP3A4的转录调节作用;在大鼠体内,采用紫外分光光度法和RT-PCR技术检测莪术对大鼠肝脏CYP450含量及CYP3A同工酶红霉素N-脱甲基酶(ERD)的活性和CYP3A基因mRNA表达的影响。结果在体外报告基因实验研究中,莪术提取物及其有效成分能不同程度的诱导CYP3A4的表达;在大鼠体内实验中,莪术提取物能够增加CYP450蛋白含量和CYP3A酶活性;在mRNA水平上,莪术提取物能够明显诱导CYP3A1及CYP3A2的基因表达。结论莪术提取物及其有效成分能够明显激活PXR并诱导CYP3A4的转录表达;莪术提取物对大鼠体内CYP3A的酶活性及mRNA表达均有明显诱导作用。
- 邵敬伟董海燕王涛郭养浩
- 关键词：莪术CYP3APXR
- 茅苍术提取物诱导HepG2细胞凋亡的研究被引量：7
- 2006年
- 目的;探讨茅苍术提取物对体外培育人肝癌细胞株HepG2凋亡的影响。方法;采用MTT法考察茅苍术提取物对HepG2增殖的抑制作用,普通光镜观察、荧光染色法观察细胞形态的改变及细胞凋亡,流氏细胞仪(FCM)观察细胞周期变化和凋亡峰的出现。结果;0．4～1．6mg／mL茅苍术提取物对HepG2增殖产生抑制作用,且呈明显的时-效果、量-效关系(P<0．05)。光镜观察可见贴壁细胞数量明显减少,细胞碎片和悬浮细胞数目明显增加,荧光染色显示细胞核显著收缩,呈致密浓染。FCM结果表明1．6mg/mL茅苍术提取物处理细胞24h后使HepG2出现明显的凋亡峰,并将细胞周期阻滞于S期和G2／M期。结论;茅苍术提取物能诱导诱导HepG2细胞凋亡。
- 邵敬伟吴志香白锴凯董海燕郭养浩
- 关键词：茅苍术HEPG2凋亡
- 4种中药调节细胞色素P4503A4转录表达的研究被引量：12
- 2008年
- 目的:从中药中筛选通过激活人孕烷X受体(PXR)诱导细胞色素P450 3A4(CYP3A4)转录表达的中药;研究其诱导能力与药物浓度和作用时间之间的关系。方法:在HepG2细胞中,采用瞬时共转染报告基因试验筛选对CYP3A4转录表达有诱导作用的中药,研究其在不同浓度和不同作用时间下对PXR介导的CYP3A4的转录调节作用。结果:中药莪术、苍术、白术和茯苓均能通过激活PXR诱导CYP3A4的转录表达,且具有浓度-效应关系和时间-效应关系。在浓度-效应关系中,500 mg.L-1的莪术、苍术、白术和茯苓,在作用时间24 h时,其诱导倍数分别为0.1%DMSO处理细胞的(6.82±0.09),(6.76±0.20),(5.49±0.13),(4.97±0.07)倍。在时间-效应关系研究中,500 mg.L-1的莪术、苍术、白术和茯苓,在作用时间为48 h时,其诱导倍数分别为0.1%DMSO作用细胞的(7.74±0.54),(7.34±0.10),(5.54±0.11),(5.32±0.18)倍。结论:中药莪术、苍术、白术和茯苓均能够通过激活PXR诱导CYP3A4的转录表达。
- 董海燕邵敬伟陈剑峰王涛林凤屏郭养浩
- 关键词：莪术细胞色素P450
- 四种抗癌中药提取物对大鼠肝CYP3A酶活性及mRNA表达的影响被引量：11
- 2008年
- 目的:研究4种抗癌中药提取物对大鼠肝脏细胞色素P450 3A(CYP3A)酶在酶活性及mRNA水平的调节作用。方法:采用紫外分光光度法测定大鼠肝微粒体CYP450含量及CYP3A同工酶——红霉素N-脱甲基酶(ERD)的活性;采用反转录PCR(RT-PCR)技术检测CYP3A1、CYP3A2 mRNA的表达。结果:莪术、苍术、白术的提取物均可明显增加CYP450蛋白含量及CYP3A酶活性,而茯苓提取物无明显作用。在mRNA水平上,莪术、苍术、白术的提取物均能明显诱导CYP3A1的基因表达,茯苓提取物无明显作用;对于CYP3A2的基因表达,莪术和苍术的提取物均有明显的诱导作用,而白术和茯苓的提取物则有显著的抑制作用。结论:莪术、苍术、白术的提取物对CYP3A酶的调控均发生在酶活性水平和转录水平,而茯苓提取物对CYP3A酶仅存在转录水平的调控。4种抗癌中药提取物对CYP3A酶的诱导或抑制可能会影响其他药物的体内代谢。
- 董海燕邵敬伟王涛郭养浩严凌霞
- 关键词：抗癌中药CYP3ART-PCR
- 一种检测哺乳动物血液中微量循环肿瘤细胞的特异性方法
- 本发明公开了一种检测哺乳动物血液中微量循环肿瘤细胞的特异性方法，依本方法设计的DNA纳米器件（PDN）可特异性的与循环肿瘤细胞表面高表达的蛋白特异性结合，并利用免疫磁珠分离技术将结合有PDN的循环肿瘤细胞从血液中分离。P...
- 贾力董海燕王杰韩龙宇
- 文献传递
- 一种纳米-双环状适配体探针及其应用
- 本发明公开了一种纳米‑双环状适配体探针及其应用。该纳米‑双环状适配体探针（G‑dApR）极其稳定，不会被体内DNA降解酶所降解。同时，可特异性识别并与血癌细胞表面高表达的生物标记物相结合，且能有效抑制目标细胞的生物活性。...
- 贾力董海燕张婷霞
- 文献传递
