高金源
- 作品数：49 被引量：129H指数：7
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划广东省科技厅农业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- PRRSV HN-08株的分离鉴定及其部分生物学特性研究
- 2009年
- 【目的】对2008年河南省猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)流行株进行分离鉴定,并对其生物学特性进行研究,以了解免疫猪群发病的原因。【方法】从河南省猪场采集发病猪的血清和组织,采用Marc-145细胞对其中的PRRSV进行分离及初步鉴定。应用RT-PCR法对分离株进行扩增,并构建克隆载体,对阳性质粒测序后进行ORF5基因核苷酸及推导氨基酸序列分析,同时对分离毒株进行非免疫猪人工感染试验,确定其致病性。【结果】从发病猪组织和血清中分离到1株PRRSV(HN-08株),其可引起Marc-145细胞产生细胞病变(CPE),可在Marc-145细胞中稳定传代,能被PRRSV高免血清特异性中和;从人工感染发病猪组织和血清中均分离到PRRSV。RT-PCR得到与预期大小相符的特异片段,提交NCBI鉴定为HN-08株,属美洲型PRRSV。【结论】从河南省发病猪体内分离的HN-08株属美洲型PRRSV,对猪具有很强的致病力,可引起Marc-145细胞产生CPE,病毒滴度TCID50为105.1/mL。
- 薛青红张彦明郎洪武王晶钰温肖会高金源刘湘涛邓永
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征PRRSV生物学特性
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗病毒含量测定能力比对的实践
- 本文详细介绍了高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗病毒含量测定能力比对实施的全过程，比较了参考值评价法和稳健统计技术在本次能力验证结果评价中的应用情况，为进一步有效开展兽用生物制品行业能力比对工作提供了有益的参考。
- 陈晓春吴华伟高金源郎洪武邓永孟画诗孙海燕
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征
- 兔病毒性出血症病毒毒种的保存期试验
- 2002年
- 本试验对 3个不同代次的兔病毒性出血症病毒进行了最小致死量测定 ,并对经兔病毒性出血症病毒F1代毒种繁殖冻干的 1批兔病毒性出血症病毒F3 代毒种 (1998.4 .6冻干 )进行了血凝性、特异性、最小致死量、免疫原性鉴定。结果表明 ,三个不同代次的兔病毒性出血症病毒在 -70℃条件下分别保存 15年、10年、15年 ,其最小致死量均可达到 10 - 4稀释 ,家兔 3/ 4死亡 ,符合规程要求 ;
- 高金源张存帅吴涛
- 关键词：病毒性出血症病毒保存期
- 两种消毒剂对猪瘟病毒的杀灭试验
- 2001年
- 采用培养的林氏管 PK15细胞和荧光抗体染色法对灭毒净 (有机酸类消毒剂 )和毒菌清(过硫酸盐消毒剂 )杀灭猪瘟病毒的效能进行了试验 ,结果 60 0倍稀释的灭毒净和 40 0倍稀释的毒菌清分别与 50倍稀释的猪瘟石门系强毒等量混合 ,室温作用 30
- 张存帅高金源刘桂芳
- 关键词：消毒剂猪瘟病毒杀灭试验
- 高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒NASBA-ELISA检测方法的建立被引量：11
- 2009年
- 针对猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF1中编码Nsp2的基因序列设计引物,建立了核酸序列依赖性扩增(NASBA)方法,并结合微孔板中液相杂交和酶标显色反应检测NASBA扩增产物,建立了检测高致病性PRRSV的NASBA-ELISA。琼脂糖凝胶电泳显示,NASBA方法扩增出了特异性的目的条带。将NASBA产物RNA系列稀释后同时进行了ELISA和Northern杂交。结果显示,ELISA和Nor-thern杂交最高可分别检测到1∶50和1∶30稀释的产物RNA。采用建立的NASBA-ELISA可检测到101.83TCID50/mL的HuN4株PRRSV。该方法只对3株高致病性PRRSV的检测结果为阳性,对经典株PRRSV和其他猪源病毒的检测结果均为阴性。结果表明,NASBA-ELISA能够敏感并特异地检测高致病性PRRSV。
- 梁海霞薛青红高金源邓永陈晓春吴华伟郎洪武
- 关键词：酶联免疫吸附试验
- 鸡传染性法氏囊病病毒BC6/85株VP2基因的原核表达、纯化及鉴定被引量：5
- 2015年
- 为获得可用于鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体检测的重组抗原VP2蛋白,根据GenBank中发表的IBDV VP2序列设计一对特异性引物,应用RT-PCR技术克隆IBDV经典标准攻毒株(BC6/85株)的VP2基因,插入质粒pET-32a中构建重组表达质粒pET-32a-VP2,经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组蛋白。重组蛋白纯化后,Western-blot检测表明具有良好的反应原性。本研究为下步建立IBDV抗体的间接ELISA方法及新型疫苗的研制奠定了基础。
- 刘丹杨承槐吴华伟李启红高金源陈建郎洪武
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因克隆原核表达
- 兔出血症病毒RT-PCR方法的建立及在猪瘟活疫苗检测中的应用
- 目前我国生产的猪瘟活疫苗分为两类,一类为组织毒疫苗,另一类为细胞毒疫苗。猪瘟组织苗是将猪瘟兔化弱毒接种家兔,收获感染家兔的脾脏和淋巴结,制成乳剂,加入适当稳定剂,冷冻真空干燥而制成。由于猪瘟组织苗直接采用家兔生产,而兔出...
- 高金源
- 关键词：RT-PCR兔出血症病毒
- 文献传递
- 猪轮状病毒阳性血清(G5型)制备及初步鉴定
- 2023年
- 采用常见猪病毒抗体阴性仔猪制备了猪轮状病毒G5型阳性血清,经冻干鉴定,其性状、无菌检验、特异性检验、剩余水分测定、真空度测定结果均符合要求,效价高达1∶11482,为我国猪轮状病毒活疫苗或其联苗成分的外源病毒检验、鉴别检验提供阳性血清,以满足疫苗检验需求。
- 高金源高月异邓永王兆秦义娴李翠吴华伟薛青红
- 关键词：猪轮状病毒阳性血清
- 细胞源猪瘟活疫苗E2基因遗传稳定性和免疫原性分析
- 2023年
- 测定了中国4个细胞源猪瘟活疫苗(C株)E2基因全序列,将其与GenBank上13个猪瘟病毒的E2基因序列(含C株原始毒株、7个猪瘟病毒C株以及国际上5个主要猪瘟活疫苗毒株的E2基因全序列)进行了核苷酸序列、推导的氨基酸序列进行遗传变异分析,通过生物信息学手段对预测的E2蛋白N-糖基化位点、E2蛋白磷酸化位点和理化特性以及模拟的蛋白空间结构进行了比较,并通过免疫攻毒试验对4个细胞源猪瘟疫苗(C株)的免疫效果进行了验证。结果表明,与猪瘟病毒C株原始种毒相比,尽管中国4个细胞源猪瘟活疫苗的E2基因核苷酸序列、推导的E2蛋白氨基酸序列或模拟的三维结构等发生个别核苷酸变异、个别氨基酸位点突变或缺失,但均不影响猪瘟C株的免疫原性,猪瘟疫苗C株仍然是防控猪瘟的最有效武器。
- 吴华伟陈晓春黄小洁刘丹邓永秦义娴高金源薛青红孙淼陈建陈延飞
- 关键词：猪瘟细胞源活疫苗E2基因同源性免疫原性
- 流行性乙型脑炎高免阳性血清的制备与应用
- 2024年
- 为满足乙型脑炎活疫苗的鉴别检验及外源病毒检验需求,以乙型脑炎活疫苗和灭活疫苗为免疫原,通过对SPF鸡进行反复免疫制备乙型脑炎特异性血清。当血清效价满足要求时,以心脏采血法采集血清,经分装、冻干后,开展纯净性检验、噬斑减少中和效价测定、特异性检验、剩余水分测定和均匀性检验,并对乙型脑炎活疫苗进行鉴别检验和外源病毒检验。结果显示:制备的乙型脑炎阳性血清无菌、支原体及外源病毒检验结果均为阴性,与口蹄疫病毒、猪圆环病毒、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒和牛病毒性腹泻病毒等均无交叉反应,噬斑减少中和效价大于1:1 000,剩余水分<3%,且10个样品的效价测定结果组内、组间均无明显差异(P<0.05)。结果表明,制备的乙型脑炎阳性血清效价高,剩余水分少,纯净性、特异性、均匀性均良好,可满足乙型脑炎活疫苗的检验需求。
- 李翠王兆王德丽高月异沈青春高金源
- 关键词：乙型脑炎阳性血清
