陈晓春
- 作品数：85 被引量：178H指数：7
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一株牛病毒性腹泻/黏膜病毒株的分离与鉴定被引量：1
- 2018年
- 从云南某牛场疑似BVDV感染的病料通过接种MDBK细胞分离到1株BVDV,为了解分离毒株的特性,进行了病原学和分子生物学研究。该分离毒株连传15代均不产生CPE,为NCP型BVDV。通过电镜检测可观察到直径为40~60 nm病毒粒子。该分离病毒能被牛病毒性腹泻标准阳性血清中和,且能被BVDV IFA荧光抗体识别;采用BVDV 5'-UTR基因特异性引物,经RTPCR可扩增出288 bp特异性片段。将该片段测序后与Gen Bank已发表的30株BVDV 5'-UTR序列进行同源性比较,同源性为68.7%~89.2%。与我国分离的BJ1202株(登陆号:KF925514.1)和Y2株(登陆号:KY964311.1)同源关系最近,均为89.2%。与2014年以来我国分离的BVDV毒株亲缘关系在88%左右。5'-UTR遗传进化分析证实该分离毒株为BVDV-1型。动物回归试验显示,该分离毒株可引起出现体温升高、腹泻、粘膜病等典型的BVD/MD症状。结果表明,分离的毒株为BVDV,命名为BVDV/W株。
- 范娟吴华伟郎洪武郝雪斌陈晓春刘国英高金源赵丽霞邓永范秀丽
- 伪狂犬病病毒双荧光标记5基因缺失株的构建
- 本发明涉及一种伪狂犬病病毒双荧光标记5基因缺失株的构建。该病毒株是以自行分离的一株伪狂犬病病毒(SX株)为母本，通过分子生物学手段，缺失伪狂犬病病毒的gE基因、gI基因、US9基因、UL49.5部分基因和TK基因，并以绿...
- 李俊平杨承槐陈晓春李慧姣孙莹张广川李启红曹明慧李岭
- 文献传递
- 副流感病毒5型荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：1
- 2021年
- 为建立检测副流感病毒5型(PIV5)的荧光定量RT-PCR方法,针对PIV5 L基因设计筛选出一对特异性引物和探针,对退火温度、引物浓度、探针浓度进行了优化,并进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果显示:最适退火温度为54.7℃,最适引物浓度为0.5μmol/L,最适探针浓度为0.1μmol/L。检测灵敏度为10 copies、0.8 TCID50,特异性结果显示与BPIV3等22种常见病毒及原辅材料均无交叉,重复性试验显示不同模板浓度重复检测变异系数均小于1.5%,重复性良好。
- 吴华伟秦义娴陈晓春高金源邓永刘丹苏佳薛青红陈延飞
- 关键词：荧光定量RT-PCR
- 高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒NASBA-ELISA检测方法的建立被引量：11
- 2009年
- 针对猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF1中编码Nsp2的基因序列设计引物,建立了核酸序列依赖性扩增(NASBA)方法,并结合微孔板中液相杂交和酶标显色反应检测NASBA扩增产物,建立了检测高致病性PRRSV的NASBA-ELISA。琼脂糖凝胶电泳显示,NASBA方法扩增出了特异性的目的条带。将NASBA产物RNA系列稀释后同时进行了ELISA和Northern杂交。结果显示,ELISA和Nor-thern杂交最高可分别检测到1∶50和1∶30稀释的产物RNA。采用建立的NASBA-ELISA可检测到101.83TCID50/mL的HuN4株PRRSV。该方法只对3株高致病性PRRSV的检测结果为阳性,对经典株PRRSV和其他猪源病毒的检测结果均为阴性。结果表明,NASBA-ELISA能够敏感并特异地检测高致病性PRRSV。
- 梁海霞薛青红高金源邓永陈晓春吴华伟郎洪武
- 关键词：酶联免疫吸附试验
- 猪圆环病毒病及其生物制品学的研究进展
- 结合国内外对猪圆环病毒病的研究结果，概述了猪圆环病毒病的主要临床类型及其流行病学特点，并对其病原学、免疫学及生物制品学方面的研究进展进行了综合论述，为认识该病并有效防控该病提供参考。笔者认为，猪圆环病毒2型的危害主要体现...
- 郎洪武陈晓春吴华伟邓永高金源杨汉春
- 关键词：猪圆环病毒病病原学免疫学生物制品学
- 猪传染性胃肠炎病毒的分离与鉴定被引量：7
- 2018年
- 将经胶体金试纸条和RT-PCR鉴定为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)阳性的内蒙古某猪场的粪便样品,经ST细胞分离培养后,得到一株能产生明显细胞病变的毒株。纯净性检测结果显示,该毒株无细菌生长,无支原体及无外源病毒污染。特异性检测结果表明:该分离株能被TGEV特异性阳性血清中和,且能被TGEV FA荧光抗体识别。采用TGEV N基因特异性引物,经RT-PCR可扩增出1215 bp特异性片段,将该片段测序后与GenBank中已发表的13株TGEV N基因的序列进行同源性比较,同源性为98.1%~100%,其中与我国分离的H16、JS2012以及Miller M6毒株同源性关系最近,均为100%。结果表明,分离到的毒株为TGEV,命名为TGEV NMG株。
- 李嘉琛吴华伟陈晓春邓永曹明慧韩爽夏业才
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒特异性
- 我国宠物用病毒类生物制品质量情况分析与建议被引量：1
- 2021年
- 对2008-2020年我国宠物用病毒类生物制品质量情况进行总结,分析了宠物用病毒类生物制品质量检验中发现的问题,提出了完善兽用狂犬病灭活疫苗效力检验方法、加强纯净性检验方法研究、建立以单抗为基础的宠物用标准物质库、加快宠物用制品重点品种研制等提升宠物用病毒类制品质量和研究的建议。
- 吴华伟秦义娴陈晓春高金源孙淼薛青红陈建陈延飞高月异李岭
- 关键词：宠物
- 伪狂犬病病毒双荧光标记缺失病毒的构建
- 本发明涉及一种伪狂犬病病毒双荧光标记缺失病毒的构建。该病毒以自行分离的一株伪狂犬病病毒(SX株)为母本，通过分子生物学、细胞生物学等手段，缺失gE基因、gI基因、US9基因和TK基因，并以绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光...
- 李俊平陈晓春杨承槐李启红李慧姣夏业才吴华伟邓永徐微蔡青秀
- 文献传递
- 表达猪瘟E2基因的重组伪狂犬病毒构建及其生物学特性分析被引量：4
- 2018年
- 以构建的TK、gI、gE、US9、部分gN基因缺失的绿色荧光标记猪伪狂犬病毒rPRV-BE为亲本株,通过同源重组构建了表达猪瘟病毒(CSFV C株)主要免疫原性基因E2的重组伪狂犬病毒rPRV-CSFV PE2SC。经PCR、间接免疫荧光试验(IFA)鉴定证实构建正确,并能成功表达E2蛋白。同时,对重组病毒在PK15细胞中的遗传稳定性、增殖特性等进行了研究,结果显示第5、10、15、20代重组病毒经PCR均能扩增出与原代重组病毒相同大小的约为3469 bp含猪瘟病毒E2基因的重组片段;第20代重组病毒感染细胞孔中出现明显的针对E2蛋白的荧光,表明重组病毒在体外连续传20代后仍能稳定遗传。一步生长曲线测定结果表明,与野毒PRV(SX株)、亲本毒rPRV-BE相比,重组病毒rPRV-CSFV PE2SC前期增殖速度较快,病毒滴度到达峰值的时间早,峰值病毒滴度低于野毒,与亲本毒相当,最高病毒滴度依次为10^(6.7)TCID_(50)/mL、10^(8.0)TCID_(50)/mL、10^(7.0)TCID_(50)/mL。结果显示构建的重组病毒具有良好的遗传稳定性及体外复制能力,为进一步对其免疫效果的评价以及PRV基因缺失重组疫苗的研制奠定基础。
- 韩爽陈晓春邓永吴华伟曹明慧李俊平夏业才
- 关键词：伪狂犬病毒猪瘟病毒基因缺失同源重组
- 一种检测禽呼肠孤病毒抗体的间接ELISA试剂盒
- 本发明属于生物技术检测领域，具体的涉及一种检测禽呼肠孤病毒的间接ELISA抗体检测试剂盒。本发明通过分析Sigma‑B蛋白序列信息进行二级结构、亲疏水性、抗原性等分析，选取抗原重组表位，构建至原核表达载体，纯化制备蛋白质...
- 侯力丹毛娅卿翟天舒陈晓春苏佳吴华伟
