吴华伟
- 作品数：85 被引量：151H指数：6
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家科技基础性工作专项河北省农业科技成果转化资金项目广东省科技厅农业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程医药卫生更多>>
- 人兽共患病原菌-猪链球菌2型的发病特点与防治对策被引量：6
- 2007年
- 猪链球菌病是我国规定的二类动物传染病,其2型菌对人和猪均有很强的致病性,对公共卫生安全构成威胁。结合国内外10多年来对猪链球菌2型的病原特点、流行病学、临床症状和毒力因子的相关研究情况,总结了猪链球菌2型的发病特点,提出了针对该病的防治对策,为有效预防和控制人兽共患病的发生提供参考意见。
- 张晶吴华伟陈征
- 关键词：猪链球菌2型发病特点
- 一株牛病毒性腹泻/黏膜病毒株的分离与鉴定被引量：1
- 2018年
- 从云南某牛场疑似BVDV感染的病料通过接种MDBK细胞分离到1株BVDV,为了解分离毒株的特性,进行了病原学和分子生物学研究。该分离毒株连传15代均不产生CPE,为NCP型BVDV。通过电镜检测可观察到直径为40~60 nm病毒粒子。该分离病毒能被牛病毒性腹泻标准阳性血清中和,且能被BVDV IFA荧光抗体识别;采用BVDV 5'-UTR基因特异性引物,经RTPCR可扩增出288 bp特异性片段。将该片段测序后与Gen Bank已发表的30株BVDV 5'-UTR序列进行同源性比较,同源性为68.7%~89.2%。与我国分离的BJ1202株(登陆号:KF925514.1)和Y2株(登陆号:KY964311.1)同源关系最近,均为89.2%。与2014年以来我国分离的BVDV毒株亲缘关系在88%左右。5'-UTR遗传进化分析证实该分离毒株为BVDV-1型。动物回归试验显示,该分离毒株可引起出现体温升高、腹泻、粘膜病等典型的BVD/MD症状。结果表明,分离的毒株为BVDV,命名为BVDV/W株。
- 范娟吴华伟郎洪武郝雪斌陈晓春刘国英高金源赵丽霞邓永范秀丽
- 喷雾-复凝聚法制备小反刍兽疫缓释微囊疫苗的研究
- 2010年
- 建立了喷雾-复凝聚法制备灭活PPR微囊疫苗的工艺方法,并对制备的疫苗进行了主要性能指标测定和动物试验。结果显示:三批微囊形态均呈不规则长囊状,平均包埋率为42%,包埋前后灭活PPRV抗原活性得到较好保持。制备的灭活PPR微囊疫苗在免疫绵羊后1个月,中和抗体滴度均能达到1∶20以上,均高于小反刍兽疫弱毒疫苗1∶10的质量标准,最高可达到1∶160;且中和抗体滴度至少能持续7个月,呈现出良好的缓释效果,是一种具有广阔应用前景的新型疫苗。
- 吴华伟支海兵王彬
- 关键词：小反刍兽疫微囊疫苗
- 副流感病毒5型荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：1
- 2021年
- 为建立检测副流感病毒5型(PIV5)的荧光定量RT-PCR方法,针对PIV5 L基因设计筛选出一对特异性引物和探针,对退火温度、引物浓度、探针浓度进行了优化,并进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果显示:最适退火温度为54.7℃,最适引物浓度为0.5μmol/L,最适探针浓度为0.1μmol/L。检测灵敏度为10 copies、0.8 TCID50,特异性结果显示与BPIV3等22种常见病毒及原辅材料均无交叉,重复性试验显示不同模板浓度重复检测变异系数均小于1.5%,重复性良好。
- 吴华伟秦义娴陈晓春高金源邓永刘丹苏佳薛青红陈延飞
- 关键词：荧光定量RT-PCR
- 蓝耳病疫苗的正确使用
- 2009年
- 在养猪生产中，既要重视高致病性蓝耳病的防控工作，也要重视经典（普通）蓝耳病的的防控。正确选择并使用疫苗是防控猪蓝耳病的重要手段之一，本文对蓝耳病疫苗的种类和正确使用做一阐述。
- 吴华伟金丽霞陈征郑明
- 关键词：猪蓝耳病疫苗养猪生产高致病性
- 一种抗鸡传染性贫血病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株、单克隆抗体、试剂或试剂盒及其应用
- 本发明属于兽用生物技术检测领域，具体涉及一种抗鸡传染性贫血病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株、单克隆抗体、试剂或试剂盒及其应用。本发明提供了一株抗鸡传染性贫血病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株CIAV Mab‑VP2‑...
- 刘丹吴华伟侯力丹黄小洁薛麒孔冬妮薛青红邓永陈晓春
- 猪轮状病毒阳性血清(G5型)制备及初步鉴定
- 2023年
- 采用常见猪病毒抗体阴性仔猪制备了猪轮状病毒G5型阳性血清,经冻干鉴定,其性状、无菌检验、特异性检验、剩余水分测定、真空度测定结果均符合要求,效价高达1∶11482,为我国猪轮状病毒活疫苗或其联苗成分的外源病毒检验、鉴别检验提供阳性血清,以满足疫苗检验需求。
- 高金源高月异邓永王兆秦义娴李翠吴华伟薛青红
- 关键词：猪轮状病毒阳性血清
- 细胞源猪瘟活疫苗E2基因遗传稳定性和免疫原性分析
- 2023年
- 测定了中国4个细胞源猪瘟活疫苗(C株)E2基因全序列,将其与GenBank上13个猪瘟病毒的E2基因序列(含C株原始毒株、7个猪瘟病毒C株以及国际上5个主要猪瘟活疫苗毒株的E2基因全序列)进行了核苷酸序列、推导的氨基酸序列进行遗传变异分析,通过生物信息学手段对预测的E2蛋白N-糖基化位点、E2蛋白磷酸化位点和理化特性以及模拟的蛋白空间结构进行了比较,并通过免疫攻毒试验对4个细胞源猪瘟疫苗(C株)的免疫效果进行了验证。结果表明,与猪瘟病毒C株原始种毒相比,尽管中国4个细胞源猪瘟活疫苗的E2基因核苷酸序列、推导的E2蛋白氨基酸序列或模拟的三维结构等发生个别核苷酸变异、个别氨基酸位点突变或缺失,但均不影响猪瘟C株的免疫原性,猪瘟疫苗C株仍然是防控猪瘟的最有效武器。
- 吴华伟陈晓春黄小洁刘丹邓永秦义娴高金源薛青红孙淼陈建陈延飞
- 关键词：猪瘟细胞源活疫苗E2基因同源性免疫原性
- 鼠源细胞TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立
- 2023年
- 为对鼠源细胞进行鉴别检测,以鼠线粒体16S rRNA基因序列为靶位点设计特异性引物及探针,建立实时荧光定量PCR检测方法,并评价该方法的特异性及敏感性。结果显示,所建立的检测方法特异性好,针对鼠源细胞基因组荧光定量PCR扩增曲线良好,其他物种来源细胞基因组及生物制品原辅材料未出现特异性扩增曲线;敏感性高,基因拷贝数检出限度为45.3拷贝。本试验建立的荧光定量PCR检测方法能够有效地对鼠源细胞进行快速检测,为细胞质量控制提供了有效方法。
- 苏佳赵炜秦义娴邓永高月异白洪旭薛青红陈晓春吴华伟
- 关键词：荧光定量PCR
- 表达猪瘟E2基因的重组伪狂犬病毒构建及其生物学特性分析被引量：4
- 2018年
- 以构建的TK、gI、gE、US9、部分gN基因缺失的绿色荧光标记猪伪狂犬病毒rPRV-BE为亲本株,通过同源重组构建了表达猪瘟病毒(CSFV C株)主要免疫原性基因E2的重组伪狂犬病毒rPRV-CSFV PE2SC。经PCR、间接免疫荧光试验(IFA)鉴定证实构建正确,并能成功表达E2蛋白。同时,对重组病毒在PK15细胞中的遗传稳定性、增殖特性等进行了研究,结果显示第5、10、15、20代重组病毒经PCR均能扩增出与原代重组病毒相同大小的约为3469 bp含猪瘟病毒E2基因的重组片段;第20代重组病毒感染细胞孔中出现明显的针对E2蛋白的荧光,表明重组病毒在体外连续传20代后仍能稳定遗传。一步生长曲线测定结果表明,与野毒PRV(SX株)、亲本毒rPRV-BE相比,重组病毒rPRV-CSFV PE2SC前期增殖速度较快,病毒滴度到达峰值的时间早,峰值病毒滴度低于野毒,与亲本毒相当,最高病毒滴度依次为10^(6.7)TCID_(50)/mL、10^(8.0)TCID_(50)/mL、10^(7.0)TCID_(50)/mL。结果显示构建的重组病毒具有良好的遗传稳定性及体外复制能力,为进一步对其免疫效果的评价以及PRV基因缺失重组疫苗的研制奠定基础。
- 韩爽陈晓春邓永吴华伟曹明慧李俊平夏业才
- 关键词：伪狂犬病毒猪瘟病毒基因缺失同源重组
