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Mcl—1在人骨髓瘤细胞系XG—7凋亡中的作用: 为进一步研究IL—6对XG—7细胞凋亡的调节作用,我们首先将XG—7细胞在2%FCS1640培养基中进行去IL—6饥饿处理18h,然后再补加10ng/mLIL—6刺激细胞12h。收集细胞样品进行PI染色和FACS分析。结...; 宋伦黎燕孙英勋于鸣沈倍奋; 关键词：MCL; 文献传递

抗人重组IL－1单克隆抗体的制备及初步鉴定: 1995年; 以重组人ＩＬ－１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞６５３融合，得到一组分泌抗人重组ＩＬ－１单克隆抗体的杂交瘤细胞。对其中的３株ＹＡ１３３、ＹＡ１４０和ＹＡ１６３进行了初步鉴定；抗体类别为ＩｇＧ，亚类均为ｌｇＧｌ；免疫转印显示，３株抗体均能特异性地识别分子量为１７．５ｋＤ的ＩＬ－１蛋白条带；ＥＬＩＳＡ法证明与其它细胞因子如：ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＴＮＤ－α、ＩＦＮ－γ和ＧＭ－ＣＳＦ均无交又反应；放射免疫测定结果证实，３株抗体分别识别ＩＬ－１分子上两个不同的抗原决定簇。; 于鸣孙瑛勋杨子义孙启鸿沈倍奋; 关键词：白细胞介素-1 单克隆抗体

RACE策略克隆抗人CD16单克隆抗体轻链可变区基因被引量：5: 2003年; 鼠源性单克隆抗体(mAb)应用于人体治疗首先需对其进行基因工程化改造.目前, 常用的克隆mAb可变区基因的方法, 是利用抗体可变区内骨架区(FR)序列的保守性, 设计一组通用引物, 采用RT-PCR法扩增可变区基因[1,2].但由于引物的简并性, 克隆过程中将不可避免地改变抗体可变区两侧(FR1、FR4)的氨基酸序列, 这些改变可能导致基因工程抗体亲和力降低[3].我们对传统方法进行了改进, 采用5′-RACE(rapid amplification of cDNA end, RACE)克隆的策略, 获得了抗人CD16 mAb轻链可变区(VL)基因的真实序列.; 解志刚郭宁冯健男施明孙瑛勋于鸣沈倍奋; 关键词：基因克隆基因序列

抗人CD3嵌合抗体基因的构建、表达及表达产物的初步功能研究被引量：4: 2005年; 目的: 构建并表达抗人CD3嵌合抗体, 以克服鼠源单克隆抗体(mAb)用于临床的局限性。方法: 采用基因工程技术, 将抗体VL、VH 基因分别克隆入嵌合抗体表达载体VLExpress及VHExpress中。共转染COS- 7细胞后, 用ELISA检测培养上清中嵌合抗体的表达水平; 采用ProteinA亲和层析法纯化抗体, 并进行Westernblot鉴定。用FACS检测嵌合抗体结合抗原的活性; 混合淋巴细胞培养检测抗体的功能。结果: 成功地构建了VH Express VH 及VLExpress VL表达载体并表达纯化。Westernblot的结果显示, 表达的抗人CD3抗体为人鼠嵌合抗体。FACS的结果显示, 该抗体具有良好的结合抗原活性; 混合淋巴细胞培养结果显示, 该抗体具有一定的免疫抑制功能。结论: 成功地构建、表达了抗人CD3嵌合抗体, 为进一步的研究打下了基础。; 吕明赖春宁于鸣郭宁黎燕沈倍奋; 关键词：CD3 嵌合抗体混合淋巴细胞培养免疫抑制

SOX11结合p53并上调其转录活性被引量：1: 2010年; 目的:研究SOX11对p53转录活性的影响,并检测二者的体外相互作用。方法:在H1299(p53缺失)和H460(含野生型p53)2种细胞中分别过表达SOX11和p53,用双萤光素酶方法测定p53的转录活性;用大肠杆菌DH5α表达GST和GST-p53融合蛋白并将其纯化,用GST pull-down实验检测SOX11与p53在体外是否存在相互作用。结果:萤光素酶实验结果表明,在H1299和H460细胞中,过表达SOX11分别能促进外源p53和内源p53的转录活性;GST pull-down实验表明SOX11能在体外与p53发生相互作用。结论:SOX11能在体外与p53发生相互作用并促进p53的转录活性,为进一步研究p53的功能提供了新的线索。; 常艳张维娜李腾高彦飞李慧艳满江红梁冰巩伟丽于鸣潘欣; 关键词：P53 相互作用转录活性

E-选择素突变体的构建和表达: 1998年; 从ｐＵＣ１８／Ｅ－选择素（Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎＣＤ６２Ｅ）重组质粒，以ＰＣＲ的方法扩增得到Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ突变体ＣＤ６２Ｅ１和ＣＤ６２Ｅ２基因。将其分别插入痘苗病毒表达载体ｐＪＳＡ１１７５的单一ＳｍａⅠ位点，在痘苗病毒真核系统中进行了表达。初步的细胞粘附功能试验结果表明，Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ分子不同结构域的缺失可削弱其粘附能力，为进一步研究Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ公子的结构与功能奠定了基础。; 胡美茹蔡铀庆孙英勋于鸣裴武红汲言山沈倍奋; 关键词：E-选择素疫苗病毒突变体

Tet-off诱导表达CUEDC2稳定细胞系的建立: 2011年; CUEDC2(CUE domain containging protein 2)是近年来发现的一个功能尚未十分明确的蛋白质。实验室前期的研究表明,CUEDC2通过影响孕激素受体PR抑制乳腺癌细胞生长。此外,研究还发现CUEDC2通过招募PP1磷酸酶,促进IKK复合体的去磷酸化,抑制NF-kB信号通路的激活。为了深入研究CUEDC2的功能,构建了CUED2可诱导表达载体(p617-neo-T-CUEDC2-I-tTA4),并通过逆转录病毒系统获得tet-off可诱导表达CUEDC2的稳定细胞系。该诱导表达细胞株的建立为CUEDC2功能基因的研究提供了必要的手段。; 徐金敬王玉博王芊艺周杰梁冰穆蕊于鸣巩伟丽张维娜; 关键词：CUEDC2 稳定细胞系

CUEDC2突变体的构建及在原核和昆虫表达系统中的表达被引量：1: 2011年; 为构建CUEDC2的突变体并在原核和昆虫表达系统中表达验证,根据人cuedc2序列设计引物,以其突变体质粒为模板PCR扩增目的片段,酶切后连接至pET28a原核表达载体以及pFastBac1-Flag-N和pFastBac-HTA昆虫表达系统的表达载体。转化至DH5α后提取质粒,经菌液PCR、测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)及DH10Bac感受态细胞中。原核表达载体在E.coli中表达后用Ni-NTA亲和纯化,SDS-PAGE检测。昆虫表达载体提取杆粒,转染至昆虫细胞Sf9中表达。最后用western进行鉴定。结果成功构建了CUEDC2的突变体,并在原核和昆虫表达系统中表达。说明在原核和昆虫表达系统中,成功表达的CUEDC2突变体蛋白为CUEDC2的结构和功能研究奠定了基础。; 王玉博高彦飞李腾常艳穆蕊徐金敬王芊艺巩伟丽于鸣李慧艳; 关键词：CUEDC2 昆虫突变体

AWP1抑制TNFα诱导的NF-κB转录活性: 2011年; AWP1含有A20样锌指蛋白结构域。在人乳腺文库中克隆了AWP1 cDNA序列。双荧光报告基因检测系统证明过表达AWP1抑制TNFα诱导的NF-κB转录激活,并且AWP1与TNFα受体复合物中的TRAF2、IKKγ存在外源相互作用,为AWP1抑制TNFα信号通路的机制研究提供线索。; 穆蕊高彦飞陈亮李腾甄诚于鸣巩伟丽潘欣夏晴; 关键词：TNFΑ NF-ΚB

FTY720主要通过促进淋巴细胞归巢发挥免疫抑制作用: 目的:观察FTY720对小鼠异基因骨髓移植诱发的急性排斥反应的预防作用,并对其介导的免疫抑制作用机制进行初步分析。方法:无菌条件下分离C57BL／6小鼠(供鼠,H-2Kb)脾脏以及骨髓细胞。在BALB／c(受鼠,H-2K...; 肖鹤崔健张磊董波孙瑛勋于鸣李松沈倍奋黎燕; 关键词：FTY720 FACS 归巢淋巴结; 文献传递

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