曾梦华
- 作品数：18 被引量：18H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 治疗性应用于移植的调节性T细胞的体外扩增及共刺激分子B7-1和B7-2对调节性T细胞发育和体内稳态影响
- 第一部分天然调节性T细胞的分离及两种体外扩增方法的比较
【目的】平行对比分析使用抗体或骨髓分化的树突状细胞/(bonemarrow deriveddendritic cell，BM-DC/)体外扩增天然调节性T...
- 曾梦华
- 关键词：天然调节性T细胞体外扩增共刺激分子B7-2调节性T细胞
- 文献传递
- 建立同种大鼠心脏移植超急性排斥反应动物模型被引量：2
- 2006年
- 目的建立大鼠心脏移植超急性排斥反应的实验动物模型。方法以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者。供、受者间连续进行3次皮肤移植,使受者预致敏。再进行颈部异位心脏移植。采用微量淋巴毒试验监测受者体内抗供者抗体滴度的变化。结果预致敏后的受者体内抗供者抗体滴度明显升高。7只受者心脏移植后有6只移植心在24h内被排斥,病理学证实为超急性排斥反应。结论供、受者间连续3次皮肤移植预致敏后,再行心脏移植可以建立稳定的同种移植超急性排斥反应模型。
- 李荣郭晖王大卫谢林曾梦华王树森王璐陈实
- 关键词：心脏移植动物移植物排斥
- 同种大鼠胚胎胰组织移植后在异体内的增殖和分化
- 2006年
- 目的研究同种大鼠胚胎胰组织移植后在异体内重新血管化并再生长发育的可能性。方法将妊娠14．5 d(E14．5)和妊娠15．5 d(E15．5)的Lewis大鼠胚胎胰移植到成年健康Lewis大鼠的肾包膜下,分别在移植后3周和6周开腹观察移植胰的发育情况,并取标本作病理切片观察,采用免疫组织化学染色半定量和定位。结果(1)E14．5和E15．5的胚胎胰移植入肾包膜下3周后,体积均增大约10-15倍,外分泌部分腺泡导管分化发育,B细胞大量增殖,形成胰岛,组织周围有新生血管,且胰岛素分泌功能正常。(2)胚胎胰植入肾包膜下6周后,E14．5的胚胎胰内分泌部分进一步增殖;E15．5的胚胎胰则未见增殖,外分泌部分均有纤维化表现,内分泌部分与外分泌部分有分离趋势。结论(1)E14．5与E15．5的胚胎胰移植于同种大鼠肾包膜下均可在异体内再血管化,并发育为近似正常的胰腺组织。(2)E14．5和E15．5胎龄的大鼠胚胎胰都是比较适合移植的。
- 王璐黄亚冰郭晖王树森谢林曾梦华李荣陈实
- 关键词：胚胎组织移植再血管化
- LC-MS/MS法测定家兔血浆中奥昔布宁浓度及其在生物等效性评价中的应用
- 2018年
- 目的建立家兔血浆中奥昔布宁的液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS/MS)定量方法,用于评价自制盐酸奥昔布宁凝胶和国外上市品Gelnique的生物等效性。方法以盐酸苯海拉明为内标,血浆样品经0.5 mol/L NaOH碱化后采用叔丁基甲醚液-液萃取。用Kinetex C_(18)色谱柱分离,流动相采用水相(1‰甲酸-10 mmol/L乙酸铵缓冲液)-乙腈(50∶50,v/v)进行洗脱;电喷雾离子源正离子检测,离子对为m/z 358→142(奥昔布宁),m/z 256→167(苯海拉明)。用以上方法测定家兔单次经皮给予自制盐酸奥昔布宁凝胶和Gelnique后血浆中奥昔布宁的浓度,评价两者的生物等效性。结果奥昔布宁在1~200μg/L范围内线性关系良好,低中高质控浓度的批间和批内精密度(RSD)介于1.67%~9.79%,准确度在92.9%~103%。自制盐酸奥昔布宁凝胶和Gelnique经评价生物等效。结论本方法简便,专属性强,灵敏度好且准确性高,适用于透皮制剂在家兔体内的药动学研究和生物等效性评价。
- 沈沅陈忠杰曾梦华
- 关键词：奥昔布宁液相色谱-串联质谱法生物等效性家兔血浆透皮制剂
- 采用核转染技术建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G_1的真核细胞系
- 2006年
- 目的建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1(solublehumanleucocyteantigenG1,sHLA-G1)的真核细胞系。方法采用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入不表达HLA-类分子的LCL721.221细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞,通过RT-PCR及Dot-ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达。结果采用核转染法LCL721.221细胞转染效率可以达到约14%。RT-PCR检测发现了sHLA-G1基因特异性条带;采用Dot-ELISA方法利用sHLA-G1特异性抗体MEM-G/9检测,存在sHLA-G1蛋白。结论通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA-G1的真核细胞系。
- 曾梦华房崇芸王树森朱珉谢林王璐李荣吴雄文陈实
- 转人CD46基因抑制人补体在转基因小鼠心脏组织中的沉积
- 2008年
- 目的观察转人源性膜辅助蛋白（CD46）基因对转基因小鼠心脏中人补体沉积的抑制作用。方法以近交系昆明小鼠为对象，采用显微注射法制备转人CD46基因小鼠，用逆转录聚合酶链法（RT_PCR法）检测外源基因的整合情况。以F0代转基因小鼠11只为实验组，同窝非转基因小鼠10只为对照，快速切取小鼠心脏，用改良的Langendorff法经小鼠主动脉逆行灌注预先制备的含补体的B型血人血浆。观察并记录小鼠心脏搏动时间；采用免疫荧光和免疫组织化学法检测小鼠心脏组织中补体C3。及C9的沉积情况。结果Fn代转基因小鼠外源基因的整合率为33．3％。实验组小鼠心脏搏动时间为（42．6±20．6）min（15±77min），长于对照组的（20．2±12．5）min（7±40min），差异有统计学意义（P〈0．01）。实验组小鼠心脏组织中补体G3c及C9的沉积均少于对照组。结论通过显微注射法制备的转人CD46基因小鼠，其外源基因可稳定表达；转人CD46基因可以抑制人补体C3c及C9在转基因小鼠心脏组织中的沉积。
- 谢林魏庆信李文鑫王树森李荣曾梦华朱珉郭晖陈实
- 关键词：转基因异种补体小鼠
- 可溶性HLA-G<,1>抑制人NK细胞对猪血管内皮细胞杀伤作用的研究
- 第一部分稳定表达可溶性HLA-G1的真核细胞系的建立
目的:建立稳定表达可溶性HLA-G1(solublehumanleucocyteantigenG1，sHLA-G1)的真核细胞系。方法:采用核转染技术将含有...
- 曾梦华
- 关键词：NK细胞血管内皮细胞异种移植
- 文献传递
- 圣草酚调控MAPK和Nrf2/HO-1信号通路缓解非酒精性脂肪肝的作用及机制
- 2023年
- 目的研究圣草酚缓解非酒精性脂肪肝(NAFLD)的作用及可能机制。方法将16只C57BL/6J小鼠按体重随机分为对照组、NAFLD模型组和圣草酚低、高剂量组(50、100 mg/kg),每组4只。除对照组外,其余各组均使用高脂饲料诱导NAFLD模型。在预处理4周后,采取腹腔注射方式(0.01 mL/g)进行给药,每日1次,连续6周。测定小鼠体重、肝脏质量,观察小鼠肝组织病理损伤情况,测定小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)和甘油三酯(TG)水平及肝组织中核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达。使用0.5 mmol/L油酸诱导HepG2细胞建立体外NAFLD模型,实验设置正常对照组、NAFLD模型组和圣草酚低、中、高浓度组(50、100、150μmol/L);给药组在诱导模型的同时加入圣草酚,培养24 h。观察细胞中脂质沉积情况,检测细胞中TG、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)水平以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白[细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)]磷酸化水平和Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结果体内实验中,与NAFLD模型组比较,圣草酚低、高剂量组小鼠体重、肝脏质量和血清中AST、ALT和TG的水平(圣草酚低剂量组小鼠血清AST水平除外)均显著降低(P<0.01),脂滴沉积形成的空泡数量显著减少,Nrf2、HO-1蛋白表达水平进一步升高(P<0.01)。体外实验中,与NAFLD模型组比较,圣草酚低、中、高浓度组细胞中脂质沉积减少(P<0.01),ROS、MDA、TG水平显著降低(P<0.05或P<0.01),ERK、JNK磷酸化水平均显著下调(P<0.01),Nrf2、HO-1蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。结论圣草酚可能通过抑制MAPK信号通路,进而激活Nrf2/HO-1信号通路来缓解NAFLD。
- 王楷扬袁烈宋燚刘庆龙钟佩伶李文军蔡永青李小丽曾梦华曾梦华
- 关键词：非酒精性脂肪肝丝裂原活化蛋白激酶血红素加氧酶1
- 可溶性HLA-G1抑制人自然杀伤细胞NK92对猪内皮细胞PED的黏附被引量：1
- 2006年
- 目的研究可溶性HLA-G1(HLA-G5)对人自然杀伤细胞(NK细胞)黏附到猪血管内皮细胞(PED)的抑制作用,从而降低人NK细胞对猪血管内皮细胞杀伤杀伤活性。方法利用核转染技术将pcDNA3-HLA-G5转入LCL721.221细胞株。以RT-PCR、Dot-ELISA技术分别在基因水平和蛋白水平检测HLA-G5的表达;以人类NK细胞系(NK92)效应细胞,猪内皮细胞系(PED)为靶细胞,检测NK92在静止和流动状态下对PED的黏附作用;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HLA-G5抑制NK细胞的杀伤活性。结果与未加入HLA-G5的对照组相比,NK92在静止和流动状态下对PED的黏附功能明显降低(P<0.01),且对HLA-G5组PED的杀伤效率均有明显下降(P<0.01)。结论HLA-G5可以通过抑制NK92对PED的黏附功能,来减轻NK92对PED的杀伤作用。
- 王树森房崇云曾梦华谢林李荣王璐朱珉吴雄文陈实
- 关键词：自然杀伤细胞异种
- 改良法分离睾丸支持细胞体外诱导异种淋巴细胞凋亡被引量：4
- 2007年
- 目的改进睾丸支持细胞(Sertoli 细胞)的分离方法及培养条件,探讨 Sertoli 细胞体外诱导异种淋巴细胞凋亡的作用机制。方法取2～4周龄的 SD 大鼠睾丸,采用 V 型胶原酶、胰蛋白酶及脱氧核糖核酸酶二步消化法制备 Sertoli 细胞。用免疫组织化学法(SABC 法)检测 Sertoli 细胞中Fas 配体(FasL)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)、clusterin 的表达;流式细胞仪检测 Sertoli 细胞诱导异种淋巴细胞凋亡情况。结果在分离培养纯化过程中,Sertoli 细胞占培养细胞总数的90%以上,生长状况良好,能稳定表达 FasL、TGF-β_1和 clusterin,并且能够诱导异种淋巴细胞发生凋亡。结论应用本实验方法能够稳定获得大量高纯度的 Sertoli 细胞,并且能够发挥其免疫豁免的功能,从而用于细胞联合移植。
- 尹注增曾梦华谢林李荣黄亚冰朱珉陈刚陈实
- 关键词：淋巴细胞SERTOLI细胞改良法
