李荣
- 作品数：12 被引量：10H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 建立同种大鼠心脏移植超急性排斥反应动物模型被引量：2
- 2006年
- 目的建立大鼠心脏移植超急性排斥反应的实验动物模型。方法以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者。供、受者间连续进行3次皮肤移植,使受者预致敏。再进行颈部异位心脏移植。采用微量淋巴毒试验监测受者体内抗供者抗体滴度的变化。结果预致敏后的受者体内抗供者抗体滴度明显升高。7只受者心脏移植后有6只移植心在24h内被排斥,病理学证实为超急性排斥反应。结论供、受者间连续3次皮肤移植预致敏后,再行心脏移植可以建立稳定的同种移植超急性排斥反应模型。
- 李荣郭晖王大卫谢林曾梦华王树森王璐陈实
- 关键词：心脏移植动物移植物排斥
- 同种大鼠胚胎胰组织移植后在异体内的增殖和分化
- 2006年
- 目的研究同种大鼠胚胎胰组织移植后在异体内重新血管化并再生长发育的可能性。方法将妊娠14．5 d(E14．5)和妊娠15．5 d(E15．5)的Lewis大鼠胚胎胰移植到成年健康Lewis大鼠的肾包膜下,分别在移植后3周和6周开腹观察移植胰的发育情况,并取标本作病理切片观察,采用免疫组织化学染色半定量和定位。结果(1)E14．5和E15．5的胚胎胰移植入肾包膜下3周后,体积均增大约10-15倍,外分泌部分腺泡导管分化发育,B细胞大量增殖,形成胰岛,组织周围有新生血管,且胰岛素分泌功能正常。(2)胚胎胰植入肾包膜下6周后,E14．5的胚胎胰内分泌部分进一步增殖;E15．5的胚胎胰则未见增殖,外分泌部分均有纤维化表现,内分泌部分与外分泌部分有分离趋势。结论(1)E14．5与E15．5的胚胎胰移植于同种大鼠肾包膜下均可在异体内再血管化,并发育为近似正常的胰腺组织。(2)E14．5和E15．5胎龄的大鼠胚胎胰都是比较适合移植的。
- 王璐黄亚冰郭晖王树森谢林曾梦华李荣陈实
- 关键词：胚胎组织移植再血管化
- 可溶性HLA-G1抑制人自然杀伤细胞NK92对猪内皮细胞PED的黏附被引量：1
- 2006年
- 目的研究可溶性HLA-G1(HLA-G5)对人自然杀伤细胞(NK细胞)黏附到猪血管内皮细胞(PED)的抑制作用,从而降低人NK细胞对猪血管内皮细胞杀伤杀伤活性。方法利用核转染技术将pcDNA3-HLA-G5转入LCL721.221细胞株。以RT-PCR、Dot-ELISA技术分别在基因水平和蛋白水平检测HLA-G5的表达;以人类NK细胞系(NK92)效应细胞,猪内皮细胞系(PED)为靶细胞,检测NK92在静止和流动状态下对PED的黏附作用;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HLA-G5抑制NK细胞的杀伤活性。结果与未加入HLA-G5的对照组相比,NK92在静止和流动状态下对PED的黏附功能明显降低(P<0.01),且对HLA-G5组PED的杀伤效率均有明显下降(P<0.01)。结论HLA-G5可以通过抑制NK92对PED的黏附功能,来减轻NK92对PED的杀伤作用。
- 王树森房崇云曾梦华谢林李荣王璐朱珉吴雄文陈实
- 关键词：自然杀伤细胞异种
- 转人CD46基因抑制人补体在转基因小鼠心脏组织中的沉积
- 2008年
- 目的观察转人源性膜辅助蛋白（CD46）基因对转基因小鼠心脏中人补体沉积的抑制作用。方法以近交系昆明小鼠为对象，采用显微注射法制备转人CD46基因小鼠，用逆转录聚合酶链法（RT_PCR法）检测外源基因的整合情况。以F0代转基因小鼠11只为实验组，同窝非转基因小鼠10只为对照，快速切取小鼠心脏，用改良的Langendorff法经小鼠主动脉逆行灌注预先制备的含补体的B型血人血浆。观察并记录小鼠心脏搏动时间；采用免疫荧光和免疫组织化学法检测小鼠心脏组织中补体C3。及C9的沉积情况。结果Fn代转基因小鼠外源基因的整合率为33．3％。实验组小鼠心脏搏动时间为（42．6±20．6）min（15±77min），长于对照组的（20．2±12．5）min（7±40min），差异有统计学意义（P〈0．01）。实验组小鼠心脏组织中补体G3c及C9的沉积均少于对照组。结论通过显微注射法制备的转人CD46基因小鼠，其外源基因可稳定表达；转人CD46基因可以抑制人补体C3c及C9在转基因小鼠心脏组织中的沉积。
- 谢林魏庆信李文鑫王树森李荣曾梦华朱珉郭晖陈实
- 关键词：转基因异种补体小鼠
- 胚胎胰组织移植的实验研究
- 2007年
- 目的：研究胚胎胰组织在同种异体内再生长发育的可能性，并根据不同胎龄、不同移植部位的移植胚胰生长状况，研究大鼠胚胰移植的适合胎龄和移植部位。方法：将远交系SD大鼠妊娠15．5d（E15．5）、E16．5、E17．5和E18．5的胚胰移植到成年健康SD大鼠的肾包膜下或网膜内。移植后14～21d期间剖腹观察器官生长情况，并取标本行病理切片和免疫组化观察。结果：①E15，5胚胰植入肾包膜21d后，发育良好，腺泡导管分化发育，β细胞增殖并聚集。植入网膜内16d后，有中度排斥反应，发育有限。②E16．5胚胰植入肾包膜下21d后，可见中度排斥，但结构发育较好。③E17．5和E18．5胚胰植入肾包膜下后，16d内就发生重度排斥，生长严重受限，β细胞也未见增殖。④E15．5胚胰移植到小鼠体内，未经任何免疫抑制处理，16d内见到重度排斥表现并导致组织坏死。结论：不使用免疫抑制剂时，一定胎龄的胚胰可在同种远交系成年大鼠体内再血管化，并发育为近似正常胰腺组织。E15．5或更早期的胚胰用来移植比较适合，排斥反应较轻，增殖潜力较大。胚胰移植在肾包膜下相对于移植在网膜内的排斥轻、发育好。
- 王璐黄亚冰郭晖朱珉王树森谢林曾梦华李荣陈实
- 关键词：同种异体移植再血管化排斥反应
- 采用核转染技术建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G_1的真核细胞系
- 2006年
- 目的建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1(solublehumanleucocyteantigenG1,sHLA-G1)的真核细胞系。方法采用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入不表达HLA-类分子的LCL721.221细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞,通过RT-PCR及Dot-ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达。结果采用核转染法LCL721.221细胞转染效率可以达到约14%。RT-PCR检测发现了sHLA-G1基因特异性条带;采用Dot-ELISA方法利用sHLA-G1特异性抗体MEM-G/9检测,存在sHLA-G1蛋白。结论通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA-G1的真核细胞系。
- 曾梦华房崇芸王树森朱珉谢林王璐李荣吴雄文陈实
- 改良法分离睾丸支持细胞体外诱导异种淋巴细胞凋亡被引量：4
- 2007年
- 目的改进睾丸支持细胞(Sertoli 细胞)的分离方法及培养条件,探讨 Sertoli 细胞体外诱导异种淋巴细胞凋亡的作用机制。方法取2～4周龄的 SD 大鼠睾丸,采用 V 型胶原酶、胰蛋白酶及脱氧核糖核酸酶二步消化法制备 Sertoli 细胞。用免疫组织化学法(SABC 法)检测 Sertoli 细胞中Fas 配体(FasL)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)、clusterin 的表达;流式细胞仪检测 Sertoli 细胞诱导异种淋巴细胞凋亡情况。结果在分离培养纯化过程中,Sertoli 细胞占培养细胞总数的90%以上,生长状况良好,能稳定表达 FasL、TGF-β_1和 clusterin,并且能够诱导异种淋巴细胞发生凋亡。结论应用本实验方法能够稳定获得大量高纯度的 Sertoli 细胞,并且能够发挥其免疫豁免的功能,从而用于细胞联合移植。
- 尹注增曾梦华谢林李荣黄亚冰朱珉陈刚陈实
- 关键词：淋巴细胞SERTOLI细胞改良法
- 云南眼镜蛇毒因子用于预致敏大鼠同种心脏移植的实验研究
- 2006年
- 目的观察纯化的云南眼镜蛇毒因子（Y-CVF）对预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的作用。方法BN大鼠到Lewis大鼠连续3次皮肤移植预致敏后行颈部异位心脏移植。将15对大鼠用随机数字法分成2组，实验组（n=8）于心脏移植前24h静脉给予Y-CVF80μg／kg；对照组（n=7）不用Y-CVF。观察移植心的生存时间，移植心停跳后病理学检查排斥类型，免疫组织化学染色观察移植心IgG和补体C3的沉积。结果Lewis大鼠预致敏后抗BN大鼠抗体滴度由0升高至1：1028～1：2056。对照组移植心存活时间为12．71h±13．94h，实验组移植心存活时间为99．50h±38．72h，与对照组比较差异有统计学意义（t=5．599，P〈0．01）。病理检查结果证实，实验组均未发生急性体液排斥，仅见以大量单核淋巴细胞浸润为特征的急性细胞排斥反应。对照组则见以小血管内血栓形成为特征的急性体液排斥反应。免疫组织化学IgG染色实验组和对照组均为阳性，C3染色对照组为阳性，而实验组为阴性。结论使用Y-CVF可克服预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的发生。
- 李荣陈刚郭晖王大卫谢琳王树森王婉瑜熊郁良陈实
- 关键词：心脏移植移植排斥
- 转录因子诱骗性寡核苷酸转染猪血管内皮细胞抑制人补体介导的异种细胞毒作用
- 2008年
- 目的探讨转录因子SP，诱骗性寡核苷酸（decoyODNs）转染的猪血管内皮细胞对人血清补体介导的异种细胞毒作用的影响。方法将培养的永生化猪血管内皮细胞系细胞株SV40-PED分为3组。转染组：SV-40PED转染了SP，decoyODNs；错配组：S驴4D—PED转染了错配的decoyODNs；空转染组：SV-40PED仅用转染试剂oligofectamine作用。转染后26h，采用细胞爬片免疫荧光技术、蛋白印迹法、逆转录聚合酶链反应及乳酸脱氢酶释放试验进行检测，分别观察各组SV40-PED胞膜a半乳糖残基（regal）、蛋白质和α1，3-半乳糖基转移酶（α1，3-GT）mRNA等表达的变化，以及转染了SP，decoyODNs的SV-40PED对人血清补体介导的细胞毒作用的影响。结果转染组SV-40-PED胞膜α—G1的荧光表达明显减弱，部分胞膜可见点状荧光缺损，而空转染组和错配组仍可见明亮的绿色荧光。转染组蛋白表达水平均有不同程度的下降，相对吸光度（A值）仅为未转染组的52．6％。转染组α1，3GT基因异构体1和2mRNA的相对表达量分别为0．42±0．20和0．27±0．12，空转染组分别为0．72±0．17和0．50±0．19，两组比较，差异有统计学意义（P〈0.05）；错配组与空转染组相比，差异无统计学意义（P〉0.05）。体积分数为20％和40％的人血清对空转染组和错配组SV40-PED均有不同程度的杀伤，而对转染组SV-40-PED的杀伤明显减弱（P〈0.，05）。结论经SP，decoyODNs转染的猪血管内皮细胞可以抑制人血清补体介导的异种细胞毒作用。
- 黄亚冰王璐尹注增李荣郭晖陈实
- 关键词：转录因子SP1寡核苷酸类补体
- 人CD59/MCP双基因对人血灌注转基因小鼠离体心脏功能的保护作用被引量：3
- 2005年
- 目的研究转人补体调节蛋白hCD59/hMCP双基因抑制人补体激活从而抑制补体介导的超急性反应、延长体外灌注小鼠心脏功能的作用。方法利用显微注射法建立转hCD59/hMCP双基因小鼠的模型,其子代中hCD59单基因阳性小鼠8只、hMCP单基因阳性小鼠11只和hCD59/hMCP双基因阳性小鼠8只分别为3个实验组,同窝非转基因小鼠10只为对照组。用新鲜人血浆体外灌注小鼠心脏,研究小鼠表达抑制人补体激活的人补体调节蛋白后,对补体介导的异种移植超急性排斥反应的抑制作用。结果转双基因组心脏搏动时间(138min±25min)明显长于单基因组(hCD59组78min±27min,hMCP组43min±21min)及非转基因组(20min±12min)(Dunnett′s T检验,均P<0.01);免疫荧光染色及免疫酶组织化学染色显示转双基因组心脏内补体C3c及C9沉积也明显减少。结论转人补体调节蛋白hCD59/hMCP双基因能够有效地抑制补体介导的异种移植超急性排斥反应。
- 谢林朱珉王树森李荣曾梦华黄亚冰王璐郭晖魏庆信李文鑫陈实
- 关键词：小鼠转基因异种血液灌注CD59
