殷相平
- 作品数：116 被引量：167H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一种抗体检测用胶体金试纸条的制备方法及应用
- 本发明公开了一种抗体检测用胶体金试纸条的制备方法，包括以下步骤：制备免疫兔血清沉淀的IgG抗体的制控带；胶体金溶液的制备；金标抗体的制备；胶体金试纸条的制备。本发明的抗体检测用胶体金试纸条包括底板、样品垫、涂覆胶体金标记...
- 柳纪省王蒲张韵杨彬兰喜李志勇殷相平李学瑞李宝玉
- 文献传递
- 牛结节性皮肤病病毒TK基因缺失毒株LSDV-△TK的构建方法
- 本发明提供牛结节性皮肤病病毒TK基因缺失毒株LSDV‑△TK的构建方法，包括以下步骤：构建缺失TK基因的pUC19T‑LoxP‑pmH5‑EGFP‑LoxP‑△TK转移载体；构建绿色荧光标记毒株LSDV‑LoxP‑pmH...
- 任善会孙跃峰殷相平陈豪泰王相伟王莎莎
- BMP4通过诱导ID1的上调表达抑制口蹄疫病毒的复制被引量：1
- 2021年
- 口蹄疫病毒(FMDV)能够感染多种偶蹄动物,对畜牧业发展造成极大威胁。骨形成蛋白4(BMP4)是转化生长因子超家族成员之一,能够调节细胞的增殖、分化、凋亡和迁移,研究表明BMP4在肿瘤生长及侵袭迁移中发挥重要作用。DNA结合抑制分子-1(ID1)是广泛存在于哺乳动物细胞中的核转录因子负调控蛋白,在细胞生长、衰老和分化中发挥作用,与肿瘤的发生和发展密切相关。BMP4在FMDV感染过程中所起的作用仍不清楚。为了研究BMP4抑制FMDV复制的分子机制,采用蛋白免疫印迹(Western-blotting)和实时荧光定量(qRT-PCR)研究BMP4、ID1与FMDV之间的关系。利用FMDV感染BHK-21细胞,发现病毒感染后BMP4的m RNA和蛋白水平均有所上调,表明BMP4可能参与FMDV复制的调控。外源鼠BMP4重组蛋白刺激试验表明,BMP4可抑制FMDV的复制,并且与宿主ID1的表达呈正相关。为了验证BMP4是否通过ID1抑制FMDV的复制,利用ID1基因敲除细胞系进行感染试验,发现在ID1正常表达的细胞系中,BMP4可抑制FMDV的复制。而在ID1基因敲除细胞系中,BMP4不能抑制FMDV的复制。结果表明,BMP4通过诱导ID1蛋白的上调表达从而抑制FMDV的复制。
- 姚凯慎任亭亭毛箬青殷相平孙跃峰何俊峰
- 关键词：口蹄疫病毒骨形成蛋白4
- 表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究
- 将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组,获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N。将重组腺病毒载体经PacⅠ酶切后转染HEK-2...
- 殷相平李志勇李学瑞李宝玉兰喜杨彬柳纪省
- 关键词：狂犬病毒重组腺病毒生物学特性免疫
- 文献传递
- 双表达的AAV重组病毒的制备方法
- 本发明公开了一种双表达的AAV重组病毒的制备方法，采用基因克隆技术将合成的特异性PRRSV RNA干扰寡核苷酸序列克隆至AAV Helper Free System中的表达质粒pAAV-U6-IRES-hrGFP的U6启...
- 柳纪省杨彬兰喜邱燕殷相平李学瑞李宝玉白银梅张韵李志勇方玉萍
- 文献传递
- 狂犬病毒CVS株G基因和IFN-a基因共表达重组腺病毒载体的构建被引量：1
- 2008年
- 通过RT-PCR方法扩增得到狂犬病毒G基因,PCR方法得到IFN-Αa基因并亚克隆入pIRES获得pIRES-a质粒.双酶切G基因和pIRES-a质粒并回收目的基因与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,再与pAdEasy-1质粒在BJ5183菌中同源重组产生腺病毒载体质粒.线性化后的重组腺病毒质粒转染人胚肾293细胞,通过观察报告基因绿色荧光蛋白的表达鉴定重组的腺病毒.结果表明:该重组病毒质粒经酶切鉴定与预期结果一致;转染293细胞后观察到绿色荧光蛋白的表达,说明成功构建了G和IFN-a双基因共表达重组腺病毒载体.
- 李江涛殷相平柳纪省胡永浩
- 关键词：重组腺病毒
- 狂犬病的分子生物学诊断被引量：3
- 2004年
- 从攻击咬伤人并致其死亡的犬脑组织中提取总RNA ,用特异性引物通过反转录聚合酶链反应 (RT PCR)获得了长度约为 14 2 3bp的核酸片段 ,与预期的片段大小相符 ;将扩增产物连接到pMD 18 T 载体中 ,转化大肠埃希氏菌JM 10 9,筛选氨苄青霉素抗性菌落 ,提取质粒 ,经酶切鉴定、PCR分析及测序 ,证明所克隆的 14 2 3bp片段含有完整的狂犬病病毒N基因 ,与国外参考毒株的序列相比同源性较高 ,从而做出正确的诊断。试验表明 ,用RT PCR技术检测狂犬病病毒灵敏度高、特异性强 。
- 殷相平柳纪省胡永浩张兴旺李志勇王辉李宝玉兰喜
- 关键词：狂犬病分子生物学狂犬病病毒人畜共患急性传染病
- 一种利用腺病毒载体表达狂犬病病毒双基因制备狂犬病活载体疫苗的方法
- 一种利用腺病毒载体表达狂犬病病毒双基因制备狂犬病活载体疫苗的方法，包括如下过程：一、制备目的基因：设计引物，扩增出狂犬病病毒(rabies virus，RV)抗原蛋白G基因与N基因；二、构建腺病毒穿梭载体：将抗原蛋白G基...
- 柳纪省殷相平白银梅胡永浩李志勇张兴旺王辉兰喜李宝玉刘兆弼
- 文献传递
- 稳定表达正交氨酰tRNA合成酶/tRNA的细胞系及构建方法
- 本发明公开了稳定表达正交氨酰tRNA合成酶/tRNA的细胞系及构建方法，以pAcBac1.tR4‑MbPyl质粒为模板，构建两对正交氨酰tRNA合成酶/tRNA真核表达重组质粒的引物，通过PCR反应扩出目的片段，分别经B...
- 孙跃峰龚青毛箬青王相伟殷相平张杰
- 文献传递
- 猪γ-干扰素的克隆表达及单抗的潜在应用被引量：4
- 2010年
- 以刀豆素A(ConA)刺激长白猪外周血单个核细胞(PBMC),提取的总RNA为模板,采用一步法RT-PCR扩增出包含猪γ-干扰素(PoIFN-γ)完整基因的片段。将完整的PoIFN-γ基因亚克隆到pET-32a(+)上,构建pET-IFN-γ融合表达载体,转化入Rosetta(DE3)后IPTG诱导表达,得到大小约为36.8kD的目的蛋白。将目的蛋白检测及纯化后免疫后BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,最终筛选出3株能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞。ELISA叠加试验显示,3株单抗针对相同或邻近的PoIFN-γ抗原表位,制备的腹水中单抗间接ELISA效价为1×104。选取单抗IF-2株进行单抗的潜在应用研究,Westernblotting分析结果显示单抗IF-2株能与融合表达蛋白产生特异性反应,与pET-32a(+)标签蛋白无反应;间接免疫荧光检测(IFA)发现,在采用腺病毒表达系统表达PoIFN-γ的HEK-293细胞中散在大量特异性荧光。
- 娄忠子兰喜李建强李学瑞李志勇殷相平柳纪省
- 关键词：猪Γ-干扰素单克隆抗体
