刘海泉
- 作品数：10 被引量：35H指数：4
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- 神经生长因子-β、脑源性神经营养因子、胶质细胞源性神经营养因子对体外压力作用下视网膜神经细胞的保护作用被引量：5
- 2004年
- 刘海泉葛坚杨智宽陈慧怡林明楷
- 关键词：脑源性神经营养因子胶质细胞源性神经营养因子视网膜神经细胞青光眼高眼压
- SD大鼠视网膜神经细胞培养上清液对胚胎干细胞体外分化的诱导作用被引量：13
- 2002年
- 目的 探讨视网膜神经细胞培养的上清液对胚胎干细胞 (embryonic stem cells,ES)体外分化的诱导作用。 方法 收集 SD大鼠视网膜神经细胞培养上清液 ,抽滤后按 2∶ 3比例与 DMEM培养液混合 ,用该混合液进行 ES细胞的诱导分化 ,每天倒置相差显微镜观察 ES细胞的生长及分化情况 ,对诱导分化后的细胞进行神经丝蛋白 (nellcofilamentprotein,NFP)免疫组织化学检查。 结果 加入了视网膜神经细胞培养上清液的 ES细胞生长出类似神经细胞突起样结构 ,NFP免疫组织化学染色阳性。 结论 SD大鼠视网膜神经细胞培养的上清液具有诱导 ES细胞向神经细胞分化的作用。
- 杨智宽葛坚郭彦王智崇刘海泉
- 关键词：胚胎干细胞细胞分化免疫组织化学神经丝蛋白
- MTT法检测干扰素-γ对人眼Tenon囊成纤维细胞增殖的抑制效应被引量：3
- 2002年
- 目的 :探讨重组人IFN γ对体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞增殖的抑制作用。方法 :用组织块培养法和混合消化液培养法体外培养人眼Tenon囊成纤维细胞。采用MTT法检测不同浓度的重组人IFN γ对体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞的抑制作用。结果 :用上述两种方法成功培养出正常人眼Tenon囊成纤维细胞。重组人IFN γ对人眼Tenon囊成纤维细胞具有抑制作用 ,1× 10～ 1× 10 6IU/mlIFN γ浓度范围的抑制率为 2 0 2 %～43 5 % ,1× 10 6UI/mlIFN γ作用 48h后 ,与对照组相比 ,细胞数量明显减少 ,细胞皱缩 ,但未见细胞死亡或漂浮。结论 :IFN γ对人眼Tenon囊成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用。
- 蓝育青葛坚林明楷郑健梁陈慧怡刘海泉
- 关键词：MTT法成纤维细胞细胞增殖比色法
- 压力及维生素B_1作用下视网膜神经细胞p53、MDM_2及Ref1基因的表达被引量：2
- 2004年
- 目的:探讨压力及压力加维生素B1联合作用下SD大鼠视网膜神经细胞p53、MDM2及Ref1基因的表达情况.方法:新生SD大鼠视网膜神经细胞体外培养,倒置相差显微镜观察细胞的生长情况,细胞分单纯加压组、实验加压组(加入维生素B1)及未加压对照组,于加压后2 d(培养第9～10天)行苔盼兰染色检查计数细胞成活率,p53免疫组化检查并提取细胞总RNA,用逆转录聚合酶链反应法检测p53、MDM2及Ref1基因的表达.结果:单纯压力组p53/MDM2基因的表达较正常未加压组增强,Ref1基因表达无增强;而维生素B1作用后的加压组,其p53/MDM2基因的表达较单纯加压组明显减弱.结论:压力作用下视网膜神经细胞的损害有凋亡机制参与,维生素B1对压力作用下视网膜神经细胞具有保护作用.
- 杨智宽葛坚银巍申煌煊刘海泉郭彦
- 关键词：凋亡P53MDM2维生素B1视网膜神经细胞
- 转γ-干扰素基因防治青光眼术区滤过泡纤维化的实验研究
- 2003年
- 【目的】评价转γ-干扰素基因、人重组γ-干扰素制剂(IFN-γ)、丝裂霉素(MMC)和生理盐水对家兔青光眼手术滤过区的影响。【方法】选取8只新西兰纯种家兔,行巩膜咬切术后随机分为4组,分别于术后滤过区旁球结膜下注射入重组IFN-γ、生理盐水、重组质粒 pIRES-EYFP IFN-γ和术中结膜瓣下放置浸润有0.25 mg/mL MMC 的湿棉片。术后观察滤过泡大小和形态,滤过区行病理切片,HE 染色及免疫组化分析。【结果】所有兔眼于术后3d,均有滤过泡形成,于术后2～3周逐渐扁平。其中放置 MMC 组,滤过泡壁隆起较高,壁薄,色苍白,无血管长人;注射重组人 IFN-γ组滤过泡隆起也较高,但周围可见血管,其余二组,滤过泡轻至中度隆起,弥散,注射生理盐水组充血较明显。病理组织切片经 HE 染色光镜下检查:MMC 组结膜上皮下结缔组织疏松排列;转 pIRES-EYFP IFN-γ组。结膜上皮下结缔组织稀疏,可见隧道样空间;注射 IFN-γ组,2眼结膜上皮下结缔组织稀疏,可见隧道样空间,另外2眼与注射生理盐水组相似,表现为结膜上皮下被厚实的纤维组织所覆盖。免疫组化反应,转 pIRES-EYFP IFN-γ组结膜下及浅层巩膜细胞胞浆和胶原可见 IFN-γ阳性反应;注射 IFN-γ组亦可见结膜下及浅层巩膜IFN-γ弱阳性反应;生理盐水和 MMC 组,呈阴性反应。【结论】直接注射法转 IFN-γ基因的家兔 Tenon 囊和浅层巩膜组织于术后3周的时间内表达 IFN-γ。人重组 IFN-γ对家兔青光眼术后滤过区纤维的增殖和胶原的产生具有一定程度的抑制作用。人重组 IFN-γ对青光眼术后滤过泡的影响与 MMC 不同。
- 蓝育青葛坚刘海泉陈慧怡郑湖玲
- 体外转染γ-干扰素基因抑制人眼球筋膜囊成纤维细胞的研究被引量：5
- 2005年
- 目的探讨阳离子脂质体介导的γ-干扰素(IFN-γ)基因对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的抑制作用。方法采用脂质体介导的方法,以质粒pcDNA3IFNγ基因转染体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞,同时以空载体重组质粒pcDNA3作为对照,G418筛选抗性克隆并扩增。以RTPCR、免疫组化及流式细胞仪间接免疫荧光法检测IFN-γ基因的表达,应用流式细胞仪进行细胞周期分析,采用四甲基偶氮唑盐法检测IFN-γ基因对成纤维细胞的作用。结果转染pcDNA3IFN-γ基因的成纤维细胞在转录水平和蛋白水平表达IFN-γ基因,转染的IFN-γ基因可明显抑制成纤维细胞的增殖。结论转染的IFN-γ基因对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞的增殖具有抑制作用。
- 蓝育青葛坚林明楷郑健樑魏菁刘海泉李艳艳
- 关键词：眼球筋膜囊Γ-干扰素基因抑制体外转染四甲基偶氮唑盐法细胞周期分析
- XPERT非接触性眼压计的临床应用被引量：4
- 1999年
- 对ＸＰＥＲＴ非接触性眼压计进行准确性研究，为该眼压计在临床和青光眼筛选的应用提供可靠依据。方法：应用ＸＰＥＲＴ非接触性眼压计和Ｇｏｌｄｍａｎｎ压平眼压计测定了２９３眼（１５０例）的眼压，并对其眼压值进行统计学分析。结果：ＸＰＥＲＴ非接触性眼压计和Ｇｏｌｄｍａｎｎ压平眼压计测量值呈密切相关（ｒ＝０．９７０２，Ｐ＝０．００００）。两者测定的均数差＝０．１５５３（Ｐ＞０．０５）。以Ｇｏｌｄｍａｎｎ压平眼压计测定为标准，ＸＰＥＲＴ非接触性眼压计测定值的波动范围在±０．１３３ｋＰａ（１ｍｍＨｇ）内占５７．７％，在±０．４ｋＰａ（３ｍｍＨｇ）内的占８５％，在±０．６５５ｋＰａ（５ｍｍＨｇ）内的占９６．６％。结论：经研究显示ＸＰＥＲＴ非接触性眼压计和Ｇｏｌｄｍａｎｎ压平眼压计的测量值一致性和相关性较好，可以应用于临床和人群青光眼检查快速筛检眼压升高者。
- 于强孙炜丽凌运兰刘海泉
- 关键词：青光眼眼压计
- 苯并卟啉衍生物介导的光动力学疗法抑制兔眼滤过术后纤维化的研究被引量：1
- 2006年
- 目的探讨新型光敏剂苯并卟啉衍生物(BPD)介导的光动力疗法(PDT)抑制兔滤过术后术区纤维化的效果。方法制作新西兰大白兔滤过手术模型,PDT组术前3 h术区结膜下注射BPD 2.5μg,术后滤过区局部进行半导体激光照射;同时设单纯手术组、丝裂霉素C(MMC)组、BPD对照组和激光对照组。术后观察滤过泡形态、眼压及并发症情况,病理组织切片及电镜检查评价术区纤维化程度。结果PDT组和MMC组滤过泡存留时间明显长于单纯手术组、激光对照组和BPD对照组。单纯手术组术后3 d内眼压下降,术后1周恢复至术前水平,PDT组和MMC组在术后4周内均可维持比术前低的、稳定的眼压水平。与PDT组相比,MMC组的并发症更为严重。组织切片显示PDT组能明显抑制兔滤过区结膜下纤维增生,电镜检查提示术区成纤维细胞可能发生早期凋亡改变,胶原纤维数量明显减少。结论PDT在大白兔眼滤过术模型上可获得与MMC相近的抗纤维化效果,但并发症少,其可能的作用机制是抑制胶原纤维的合成。PDT有望成为调控青光眼术区纤维化的一种较为有效的方法。
- 陈慧怡葛坚金陈进刘海泉黄圣松
- 关键词：光动力效应成纤维细胞
- N-甲基-D-天冬氨酸及其非竞争性受体阻滞剂和钙离子对培养的鼠视网膜神经细胞的作用被引量：2
- 2002年
- 目的 探讨N 甲基 D 天冬氨酸 (N methyl D aspartate,NMDA)及其非竞争性受体阻滞剂(MK80 1)和Ca2 + 对培养的鼠视网膜神经细胞的作用及其相互间的关系。方法 取生后 1～ 3d鼠龄的Sprague Dawley(SD)乳鼠视网膜作为原代视网膜神经细胞进行体外培养 ,对培养 7d的视网膜神经细胞经抗神经丝蛋白 (neurofilamentprotein ,NF)、Thy1 1及抗胶质纤维酸性蛋白 (glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP)单克隆抗体进行鉴定 ,同时在培养 7d的神经细胞中单独及联合加入NMDA、MK80 1和Ca2 + ,锥虫蓝拒染 ,计算细胞活性。结果 2 0 0 μmol/L的NMDA及 10mmol/L的Ca2 + 所致视网膜神经细胞失活与对照组比较 ,差异有显著意义 (F =2 6 0 91;P =0 0 2 5 ,P <0 0 0 1) ,2 0 μmol/L的MK80 1对视网膜神经细胞的影响不明显 ,对Ca2 + 所致细胞毒性无保护作用 ,但可阻断NMDA的作用。结论NMDA、一定浓度的Ca2 + 对培养的视网膜神经细胞有毒性作用 ,MK80 1可阻断NMDA的毒性作用 ,但对Ca2 + 的毒性无阻断作用 ,Ca2 +
- 刘海泉葛坚杨智宽卓业鸿林明楷
- 关键词：视网膜N-甲基-D-天冬氨酸MK801钙视网膜神经细胞阻滞剂
