- bcr-abl融合基因特异性siRNA对K562细胞生物学特性的影响
- 目的:慢性粒细胞白血病(慢粒),是一种起源于骨髓多能造血干细胞的恶性克隆增殖性疾病。95%的患者在遗传学上有特异的染色体标记Ph染色体。Ph染色体的bcr-abl融合基因编码的P210融合蛋白具有异常的酪氨酸激酶活性,是...
- 王莎孙秉中于文强尚振川柴玉波刘飞谢鑫张孝勇
- 文献传递
- 血清、血浆标本IgH基因重排对B细胞淋巴瘤的诊断价值
- 淋巴瘤是我国常见10种恶性肿瘤之一。其中部分病人在发病或病程中缺乏浅表淋巴结肿大,而以深部淋巴结肿大及结外组织器官受累为主要表现,这些病人由于淋巴结或组织活检取材困难,常延误诊断及治疗,文献报道该类患者的临床误诊率可高达...
- 冯琦孙凯李红玲苏明权刘家云张新海张涛王莎王玮孙秉中
- 文献传递
- MAPK在慢性髓细胞白血病K562细胞株信号转导中的作用被引量：7
- 2003年
- 背景与目的:近年研究表明,ras-MAPK信号传导通路在慢性髓细胞白血病(CML)的发生和发展中起着重要作用。本研究拟探讨丝裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,MAPK)在CML信号传导中的作用及其作用机理。方法:用脂质体转染法将MAPK的反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASO)导入CML细胞株K562细胞中,通过细胞增殖、DNA合成、MAPK含量和MAPK活性变化检测MAPKASO对K562细胞的作用。结果:MAPKASO可明显抑制细胞增殖、DNA合成、MAPK含量和MAPK活性,其抑制率分别为51.8%、57.1%、45.3%和61.6%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MAPK在CML信号转导中起重要,极有可能成为治疗CML的新靶点。
- 尚振川孙秉中陈志南王玮冯琦王莎张涛
- 关键词：MAPK慢性髓细胞白血病K562细胞株信号转导
- bcr-abl融合基因特异性siRNA对K562细胞生物学特性的影响被引量：4
- 2005年
- 目的应用特异性siRNA(小干涉RNA)抑制慢性粒细胞白血病bcrabl融合基因表达,观察其对K562细胞生物学特性的影响。方法以慢性粒细胞白血病细胞系K562为研究对象,合成并转染针对K562细胞bcrabl融合基因融合位点的21ntsiRNA,应用Westernblot法检测bcrabl融合基因的表达;3HTdR掺入法检测K562细胞的增殖活性;AnnexinⅤFITC/PI染色法检测K562细胞的存活状况;流式细胞仪法检测K562细胞周期变化以及联苯胺染色法检测K562细胞的分化状况;应用Westernblot法检测凋亡相关蛋白BclxL/Bax的表达。结果(1)RNA干涉组K562细胞bcrabl融合基因的表达水平明显下降;(2)RNA干涉组的CPM值(每分钟脉冲数)在siRNA转染K562细胞第24h,48h,72h和96h均明显低于对照组(下降率依次为3306%,5225%,5764%,7087%),(3)RNA干涉组转染48h时有432%的K562细胞发生凋亡;(4)RNA干涉组K562细胞凋亡相关蛋白BclxL的表达水平下调,但Bax的表达无明显变化;(5)RNA干涉组K562细胞联苯胺染色阳性比例增加,部分K562细胞向红系分化;(6)RNA干涉组K562细胞出现明显的G1期阻滞。结论特异性siRNA分子可以显著抑制bcrabl融合基因的表达,影响K562细胞的基本生物学特性,最终导致K562细胞分化或凋亡。
- 王莎柴玉波刘飞张孝勇贾卫谢鑫于文强尚振川金伯泉孙秉中
- 关键词：K562细胞BCR-ABL融合基因特异性BLOT法小干涉RNARNA分子
- 丙种球蛋白治疗特发性血小板减少性紫癜被引量：1
- 2002年
- 王莎冯琦孙秉中朱华锋白庆咸乔庆大袁跃传
- 关键词：特发性血小板减少性紫癜丙种球蛋白
- MAPK反义寡核苷酸对K562细胞系的增殖抑制作用被引量：3
- 2003年
- 目的 :探讨MAPK在慢性髓细胞白血病 (CML)信号转导中的作用及其作用机制 .方法 :用脂质体转染法将MAPKASO导入K5 6 2细胞中 ,通过集落形成、DNA合成、蛋白质含量和MAPK活性的变化检测MAPKASO对K5 6 2细胞的作用 .结果 :MAPKASO可明显抑制细胞集落形成、DNA合成、蛋白质含量和MAPK活性 ,其抑制率分别为 4 6 .1% ,5 7.1% ,4 3.2 %和 6 2 .0 % ,与对照组比较有显著差异 (P <0 .0 5 ) .结论 :MAPK在CML信号转导中起重要作用 。
- 尚振川孙秉中陈志南王玮冯琦王莎张涛
- 关键词：白血病反义
- PD98059对慢性髓细胞白血病Ras-MAPK信号转导的作用被引量：6
- 2003年
- 目的:探讨PD98059对慢性髓细胞白血病信号转导的作用及其作用机制。方法:将PD98059加入慢性髓细胞白血病细胞系K562细胞中,通过细胞活力、DNA合成、集落形成和MAPK活性的变化,观察PD98059对慢性髓细胞白血病信号转导的作用。结果:PD98059可明显抑制K562细胞活力、DNA合成、集落形成和MAPK活性(与对照组比较,P<0.05),其抑制作用具有浓度依赖性。结论:PD98059可通过阻断Ras-MAPK信号通路而发挥其抑制作用。Ras-MAPK通路极有可能成为CML治疗的新靶点。
- 尚振川孙秉中冯琦王玮王莎张涛陈志南王晶
- 关键词：PD98059慢性髓细胞白血病RAS-MAPK信号转导
- 特异性siRNA分子与crkl基因反义寡核苷酸对k562细胞的协同作用
- 目的:慢性粒细胞白血病,简称慢粒,是一种起源于骨髓多能造血干细胞的恶性克隆增殖性疾病。携带有bcr-abl融合基因的Ph染色体是慢粒发病的关键因素,其编码的P210蛋白具有失调的酪氨酸激酶活性。CRKL是以BCR-ABL...
- 王莎孙秉中于文强尚振川张孝勇
- 文献传递
- CRKL基因反义寡核苷酸对K562细胞增殖的影响被引量：1
- 2001年
- 目的 通过研究 CRKL基因反义寡核苷酸对 K5 6 2细胞增殖活性的影响 ,探讨 CRKL基因在 Ph+ 慢性粒细胞性白血病 (CML)发病中的作用 .方法 脂质体为载体 ,CRKL基因反义寡核苷酸转染 K5 6 2细胞 ,通过活细胞记数、H3- Td R掺入、RT- PCR等方法观察 K5 6 2细胞的增殖活性及基因表达的变化 .结果 CRKL反义寡核苷酸对 K5 6 2细胞的增殖有抑制作用 .结论 CRKL基因在 Ph+ CML的发病中可能有重要作用 ,可作为 CML 治疗的新靶点 .
- 王莎孙秉中黄高昇于文强柴玉波
- 关键词：反义寡核苷酸慢性粒细胞白血病K562细胞细胞增殖
- CRKL基因对K562细胞的作用研究
- 2002年
- 目的 :通过研究CRKL基因反义寡核苷酸 (ASODN)对K 5 6 2细胞增殖及凋亡的作用 ,探讨CRKL基因对慢性粒细胞性白血病 (CML)发病的影响。方法 :应用CRKL基因反义寡核苷酸作用于K 5 6 2细胞 ,通过3 H TdR掺入、流式细胞术、Rt PCR等方法观察K 5 6 2细胞形态学、细胞周期、细胞动力学及基因表达等变化。结果 :CRKL基因ASODN对K 5 6 2细胞的增殖有抑制作用 ,并可诱导K 5 6 2细胞的凋亡。结论 :CRKL基因在CML的发病中可能有重要作用。
- 王莎孙秉中于文强
- 关键词：反义寡核苷酸K562细胞慢性粒细胞性白血病
