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重组vMIP-Ⅱ鼻腔给药的研究: ：为方便用药，减少血源性传播，提高vMIP—Ⅱ生物利用度，本文致力于鼻用vMIP-Ⅱ喷雾剂和粉雾剂(微球)的研究.方法：以SD大鼠为动物模型，分别进行鼻腔给药和静脉注射给药，采用直接竞争ELISA法测定大鼠血浆中vMIP...; 周云孙晗笑王峰莫雪梅李秀英; 关键词：鼻腔喷雾剂粉雾剂药代动力学纤毛毒性

人天然免疫基因TRIM5α的序列及进化分析被引量：2: 2009年; 目的:克隆人TRIM5α基因,对其编码序列进行分析,并进行分子进化研究。方法:以HeLa细胞cDNA为模板,用RT-PCR方法克隆人TRIM5α基因,与人基因组序列对比分析其结构;用BioEdit、Genedoc和MEGA4.1软件进行蛋白序列联配和进化分析。结果:扩增了长1482bp的人TRIM5α基因片段,序列分析表明其覆盖了完整编码框,编码由493个氨基酸残基组成的人TRIM5α蛋白;人TRIM5α蛋白与黑猩猩、大猩猩、猩猩、猕猴TRIM5α蛋白的相似度分别为98.2%、96.8%、93.7%和87.6%。结论:克隆了人TRIM5α基因,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。; 孟祥平李秀英孙晗笑莫雪梅; 关键词：人免疫缺陷病毒进化克隆

炎症及炎症耐受模型筛选广谱趋化因子抑制肽(英文): 2013年; 通过减少炎性组织或细胞趋化因子及炎性因子的表达量能将炎症性病理过程抑制在起始阶段.我们通过体外构建人外周血单个核细胞LPS激活的急性炎症模型及内毒素耐受模型,进行噬菌体肽库亲和筛选,ELISA检测与炎性PBMC的结合能力,分泌抑制实验筛选抑制性噬菌体克隆,经趋化抑制、竞争结合及生成抑制实验检测体外活性,大鼠足肿胀及关节炎模型检验多肽体内作用,SqRT-PCR检测趋化因子及TTP的mRNA水平,探讨其作用机制.筛选到的目标多肽CI-S5趋化抑制率达到48.72%,明显抑制噬菌体阳性克隆P15与LPS激活PBMC的结合,动物试验能明显降低大鼠足肿胀及关节炎症.机制研究显示,CI-S5多肽能降低3种趋化因子的表达量,并调节TTP使其表达增加,提示CI-S5能够靶向炎症前期PBMC,为炎症治疗提供了针对早期急性炎症反应的广谱小分子抑制肽.; 苏焱孙晗笑李秀英莫雪梅张光; 关键词：内毒素耐受 TTP

人TRIM5α嵌合体蛋白与HIV-1gag蛋白体外分子间相互作用的鉴定被引量：1: 2009年; 目的:表达和纯化人TRIM5α嵌合体蛋白[TRIM5αH(R328-332)],并探讨该蛋白和HIV-1gag间的相互作用。方法:将构建的TRIM5α嵌合体pET28aTRIM5αH(R328-332),转化大肠杆菌BL21(DE3),获得重组表达质粒pETTRIM5αH(R328-332),30℃下经IPTG诱导,该融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。获得的重组的蛋白再经过纯化,SDS-PAGE分析重组蛋白,并用免疫共沉淀技术和ELISA等检测重组蛋白与HIV-1gag间的相互作用。结果:构建的重组质粒在大肠杆菌中获得表达,重组TRIM5αH(R328-332)蛋白经纯化复性后,通过免疫共沉淀和ELISA等技术,证明TRIM5αH(R328-332)蛋白能够与HIV-1gag间的相互作用。结论:在大肠杆菌表达系统中成功表达了重组TRIM5αH(R328-332)蛋白,并且证实其在体外与HIV-1gag有结合作用。; 孟祥平李秀英孙晗笑莫雪梅; 关键词：纯化免疫共沉淀 ELISA

基于病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ的多肽设计与活性研究: ：合成对应vMIP-Ⅱ的多肽来研究vMIP-Ⅱ受体结合属性以及寻找具有受体结合能力的多肽. 方法：基于生物信息学方法预测利用固相化学合成法合成相关多肽，通过检验合成多肽对外周血单个核细胞(PBMC)的趋化性以及对...; 叶石敦孙晗笑王峰莫雪梅李秀英; 关键词：HIV病毒趋化因子

Blackboard平台在生物技术药物学中的应用被引量：1: 2019年; 随着我国现代化教育水平的不断提高,越来越多的高校利用在线课程来辅助教学。生物技术药物学是药学学科的一门专业课程,具有知识点难度大、内容抽象等特点。将Blackboard平台应用于生物技术药物学教学课程中,能够提高学生学习的积极性,增强师生之间的交流,使得教学空间得到显著拓宽,有效提升教学水平。; 王峰雷思佳沈良华张斌莫雪梅郑青张志民孙晗笑周光雄; 关键词：BLACKBOARD平台在线课程

SYBR Green Ⅰ荧光RT-PCR法检测贝类中的诺如病毒被引量：3: 2010年; 针对诺如病毒Ⅱ型的保守区域设计引物,建立了SYBR Green Ⅰ实时荧光RT-PCR检测诺如病毒Ⅱ型的反应体系。此方法的病毒检测下限达到10^2拷贝,标准曲线的线形范围为10^2-10^6拷贝,相关系数为0.9952,斜率为-2.982,截距为35.84。对诺如病毒Ⅱ型检测特异,与轮状病毒、腺病毒、甲肝病毒、星状病毒无交叉反应。针对质粒标准品检测的批内试验变异系数（CV）为0.95%-1.69%（n=5）,批间试验CV为0.87%-1.24%（n=3）。运用此方法随机检测30份贝类水产品,检测出2份阳性样品。结果表明,SYBR Green Ⅰ荧光RT-PCR检测诺如病毒Ⅱ型的方法灵敏、特异、重复性好,可应用于贝类水产品的快速检测。; 莫雪梅高东微; 关键词：SYBR

一种表达HSA-vMIP-Ⅱ融合蛋白的酵母表达体系及其构建方法: 本发明公开了一种表达HAS-vMIP-Ⅱ融合蛋白的表达体系，由质粒pPICZaA-HSA-vMIP-Ⅱ转化至巴斯德毕赤酵母得到。本发明还公开了该表达体系的构建方法，是从含有质粒pPICZaA-HSA-vMIP-Ⅱ的大肠杆...; 孙晗笑贾忠伟肖威莫雪梅李秀英张光王峰; 文献传递

SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测HIV-1前病毒方法的建立及应用被引量：3: 2010年; 目的建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术测定HIV-1前病毒载量方法,并以其观察相关病毒进入抑制剂对HIV-1前病毒的作用。方法选择HIV-1的gag和env保守区域设计引物,建立SYBR Green I荧光定量PCR测定HIV-1前病毒载量的体系,并以其观察6μg/ml^6 ng/ml的重组病毒巨噬细胞炎症蛋白(rvMIP)、逆转录酶抑制剂(AZT)、膜融合抑制剂(T-20)、rvMIP+AZT、rvMIP+T-20对HIV-1前病毒载量的影响。结果所建立的荧光定量PCR体系的检测下限为101Copies,其标准曲线的相关系数为0.998 9,斜率为-4.925,截距为35.70;除6ng/ml的rvMIP、AZT、T-20外,三种药物处理后HIV-1前病毒载量均显著减小(P<0.05),并呈质量浓度依赖性;联合用药者前病毒载量显著低于单用rvMIP者(P<0.05),HIV-1前病毒载量rvMIP+T-20(rvMIP+AZT(rvMIP(T-20(AZT。结论本研究建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法具有灵敏、快速、准确及成本低廉等优点;与T-20或AZT联用可增强rvMIP对HIV-1前病毒的抑制作用。; 莫雪梅闫莉孙晗笑

运用SYBR GreenⅠ荧光实时RT-PCR法检测草莓中甲肝病毒被引量：5: 2010年; 针对甲肝病毒的vp3/vp1壳蛋白区域设计引物,建立SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR检测甲肝病毒的反应体系。此方法的病毒检测下限达到101TCID50,标准曲线为Ct=-3.052lg(TCID50)+34.57,线形范围101～105TCID50,相关系数0.9961。该方法对甲肝病毒检测特异,与轮状病毒、腺病毒、诺如病毒、星状病毒无交叉反应。针对甲肝病毒标准品检测的批内试验变异系数(CV)为0.85%～1.71%(n=5)、批间试验CV为0.76%～1.98%(n=3)。运用此方法随机检测45份草莓样品,检测出3份阳性样品。该检测方法灵敏、特异、重复性好,可应用于水果和蔬菜中甲肝病毒的快速检测。; 莫雪梅高东微; 关键词：甲肝病毒 SYBR 草莓

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