孙晗笑 作品数:88 被引量:184 H指数:7 供职机构: 暨南大学药学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 理学 更多>>
CD8^+T淋巴细胞非细胞毒性抗HIV作用研究进展 被引量:4 2005年 细胞免疫在抗病毒感染中发挥着至关重要的作用。人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的细胞免疫反应是由CD8+T淋巴细胞的亚群细胞毒性T细胞(CTL)介导的先天免疫。CTLs一方面通过细胞毒性作用杀伤感染的细胞,另一方面分泌可溶性抗病毒因子(CAF)发挥直接的抗病毒作用,因此成为HIV感染中细胞免疫的重要组成部分。本文就HIV感染这一疾病过程中CD8+T淋巴细胞所发挥的非细胞毒性抗病毒效应作一概述。 刘宏艳 孙晗笑关键词:人类免疫缺陷病毒 CD8^+T细胞 非细胞毒性 一种鉴定重组子的快速简便方法 2001年 何文芳 孙晗笑 谢作煊关键词:DNA 重组子 聚合酶链反应 质粒 Blackboard平台在生物技术药物学中的应用 被引量:1 2019年 随着我国现代化教育水平的不断提高,越来越多的高校利用在线课程来辅助教学。生物技术药物学是药学学科的一门专业课程,具有知识点难度大、内容抽象等特点。将Blackboard平台应用于生物技术药物学教学课程中,能够提高学生学习的积极性,增强师生之间的交流,使得教学空间得到显著拓宽,有效提升教学水平。 王峰 雷思佳 沈良华 张斌 莫雪梅 郑青 张志民 孙晗笑 周光雄关键词:BLACKBOARD平台 在线课程 内源性IL-12决定人PBMC产生干扰素γ的水平(英) 被引量:6 2002年 目的:IFN-γ是由被有丝分裂原或抗原所激活的T细胞和NK细胞所产生,它具有广泛的免疫调节活性,现认为IL-12(外源性)是诱导 IFN-γ产生的强诱导剂,并可促进静息 CD4+T细胞朝向 Th1表型分化,即诱导细胞免疫。目的是为了解由PBMC产生的内源性IL-12是否在体外可诱导IFN-γ的产生及通过何机制诱导细胞免疫。方法:用抗CD3抗体、PHA、抗CD3抗体加抗CD28抗体和抗原(MLC)来检测被刺激的PBM细胞的IFN-γ的产生,同时也用IL-12和IL-12Rβ1的中和抗体来抑制IFN-γ的产生。结果:激活的人PBM中IFN-γ分泌依赖于内源性IL-12的产生,而且激活的T细胞可诱导APC细胞产生IL-12,此过程是通过T细胞表面的CD40L和APC的CD40相互作用而实现。结论:这些结果提示,内源性IL-12在正常宿主抗细胞内抗原的感染反应中起重要作用,在某些形式的自身免疫性疾病和移植排斥反应的免疫病理发生中也起中心作用。 孙晗笑 杨滨燕 李波 娄阁 吴长有关键词:白细胞介素12 IFN-Γ CD40L 一种表达HSA-vMIP-Ⅱ融合蛋白的酵母表达体系及其构建方法 本发明公开了一种表达HAS-vMIP-Ⅱ融合蛋白的表达体系,由质粒pPICZaA-HSA-vMIP-Ⅱ转化至巴斯德毕赤酵母得到。本发明还公开了该表达体系的构建方法,是从含有质粒pPICZaA-HSA-vMIP-Ⅱ的大肠杆... 孙晗笑 贾忠伟 肖威 莫雪梅 李秀英 张光 王峰文献传递 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测HIV-1前病毒方法的建立及应用 被引量:3 2010年 目的建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术测定HIV-1前病毒载量方法,并以其观察相关病毒进入抑制剂对HIV-1前病毒的作用。方法选择HIV-1的gag和env保守区域设计引物,建立SYBR Green I荧光定量PCR测定HIV-1前病毒载量的体系,并以其观察6μg/ml^6 ng/ml的重组病毒巨噬细胞炎症蛋白(rvMIP)、逆转录酶抑制剂(AZT)、膜融合抑制剂(T-20)、rvMIP+AZT、rvMIP+T-20对HIV-1前病毒载量的影响。结果所建立的荧光定量PCR体系的检测下限为101Copies,其标准曲线的相关系数为0.998 9,斜率为-4.925,截距为35.70;除6ng/ml的rvMIP、AZT、T-20外,三种药物处理后HIV-1前病毒载量均显著减小(P<0.05),并呈质量浓度依赖性;联合用药者前病毒载量显著低于单用rvMIP者(P<0.05),HIV-1前病毒载量rvMIP+T-20(rvMIP+AZT(rvMIP(T-20(AZT。结论本研究建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法具有灵敏、快速、准确及成本低廉等优点;与T-20或AZT联用可增强rvMIP对HIV-1前病毒的抑制作用。 莫雪梅 闫莉 孙晗笑同源于hMIP-1α的vMIPα对人趋化因子受体的作用 被引量:8 2001年 HIV感染靶细胞须以人CD4+白细胞膜上的趋化因子受体为共受体, 与此共受体结合的趋化因子类似物可阻止HIV进入靶细胞. 实验目的是了解与人趋化因子单核细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)同源的人疱疹病毒8 K6基因编码产物vMIPα是否具有结合人趋化因子受体的功能. 首先用蛋白质同源分析及蛋白空间结构模拟等对比vMIPα与人趋化因子的结构异同, 用PCR扩增出K6片段, 克隆于哺乳类细胞表达载体, 转染于NIH3T3细胞, 得到条件培养液. 然后将K6基因在大肠杆菌中表达, 得表达产物vMIPα. 结果显示转染K6的NIH3T3细胞含有vMIPα单一分子量的mRNA, 此转染细胞的条件培养液及大肠杆菌表达纯化的vMIPα可与人趋化因子125I-hMIP-1α竞争结合外周血单核细胞的CCR5受体, 而且此条件培养液及vMIPα不引起外周血单核细胞对ICAM-1的黏附反应. 研究证实K6编码产物vMIPα与CCR5结合但不引起细胞黏附反应, 即封闭HIV的CCR5共受体, 提示有用于防治HIV/艾滋病的可能性. 孙晗笑 冯丽霞 利奕成 何文芳关键词:人类免疫缺陷病毒 艾滋病 具有氨苄青霉素抗性的乳酸菌及其制剂的制备与应用 本发明公开具有氨苄青霉素抗性的乳酸菌及其制剂的制备与应用。本发明用人体粪便在抗生素压力下分离得到2株具有耐药性的乳酸菌,并进行了抗生素敏感性实验,以及检测是否存在质粒DNA;采用PCR扩增分析菌株的耐药基因定位情况,探索... 孙晗笑 田鹏 杨妍 利时雨 丁清 韦丕金 刘照兵 黄俊丽vMIP-II肽在大肠杆菌中的双辅助子高效表达 被引量:1 2002年 目的 :构建病毒趋化因子 (vMIP -II)基因表达载体并在大肠杆菌中以辅助折叠和辅助阻遏方式高效表达vMIP -II重组肽 .方法 :用PCR法获得vMIP -II基因片断 ,将其插入表达载体pQE ,构建重组表达载体pEh -vMIP .表达载体、辅助折叠子和辅助阻遏子载体共转染大肠杆菌DH5α ,用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆 .结果 :阳性重组子在大肠杆菌细胞中经IPTG诱导可高效表达vMIP -II重组肽 ,蛋白电泳分析可观察到一相对分子质量与理论值相符 (约 8× 10 3)的诱导表达条带 ,其表达量约占菌体总蛋白的 2 0 % .分析表明 ,vMIP -II重组肽主要以可溶性形式表达 .结论 :用双辅助技术在大肠杆菌中高效表达较小相对分子质量vMIP -II的成功 ,为进一步研究vMIP -II的功能及应用奠定基础 ,也为同类小分子。 孙晗笑 利奕成 朱彦彦 钟瑛 冯丽霞关键词:基因表达 大肠杆菌 基因工程 重组病毒巨噬细胞炎性蛋白对HIV-1_(SF1)的体外抑制作用 被引量:4 2005年 目的:研究重组病毒巨噬细胞炎性蛋白(rvMIP)体外的抗HIV-1SF1作用效果和机制。方法:分别在HIV-1SF1接种前后将敏感的MT-4细胞系与rvMIP作用,检测MT-4细胞系病变情况和培养上清的P24抗原水平,用有限稀释PCR法测定前病毒DNA水平。结果:预先用rvMIP处理过的细胞,病毒感染后细胞病变程度很轻,培养上清的P24抗原和前病毒水平明显低于对照组,P24抗原抑制率可达90%;先感染病毒再用rvMIP处理组病毒P24抗原水平和细胞内前病毒DNA水平也显著降低,但降低程度不如先用rvMIP预处理组。结论:rvMIP能阻止病毒进入靶细胞,同时可能也通过某种机制抑制已感染细胞HIV病毒的复制。 沙文琼 孙晗笑 张光 莫雪梅 郭钦丽关键词:巨噬细胞炎性蛋白 体外抑制作用 P24抗原 DNA水平 病毒感染后 抗原水平