魏凯
- 作品数：9 被引量：15H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 白芦藜醇通过Sirtuin1激活足细胞Notch1信号
- 目的:探索白芦藜醇是否影响足细胞中的Notch 1 信号通路及其可能的机制.方法:我们使用野生型(WT)和 CAGGS-col/TGM-SIRT1 hRNA(以下简称为CAGGS)小鼠足细胞系,第14-25 代分化的足细...
- 魏凯谢可炜向芃顾明颖倪兆慧顾乐怡
- 激活环磷酸腺苷／蛋白激酶信号对药物诱导足细胞损伤的影响被引量：1
- 2013年
- 目的研究激活环磷酸腺苷（cAMP）信号对药物诱导的足细胞损伤的影响。方法8周龄雄性BalB／C小鼠被随机分为对照组、阿霉素（ADR）组和腺苷酸环化酶激动剂（Forskolin）＋ADR组，采用ADR尾静脉注射的方法制备肾病模型，Forskolin＋ADR组小鼠给予腹腔内注射Forskolin。用免疫荧光激光共聚焦法检测小鼠肾组织环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）磷酸化水平，透射电子显微镜观察足细胞形态改变，免疫组织化学法检测肾小球WT一1的表达。分别用嘌呤霉素氨基核苷（PAN），环磷酸腺苷直接激活的交换蛋白（Epac）信号激动剂8一pCPT．2．O—Me．cAMP（2Me），蛋白激酶A（PKA）信号激动剂pCPT．cAMP（pCPT）及其阻断剂H89处理条件永生化的足细胞，Western印迹法检测足细胞Epac、caspase3及cleavedcaspase3的表达水平，蛋白激酶检测系统检测足细胞PKA活性，CCK-8试剂盒法检测足细胞毒性，TUNEL法检测足细胞凋亡，JC-1染色法检测线粒体膜电位。结果（1）与ADR组比较，Forskolin＋ADR组小鼠尿白蛋白排泄量减少（P〈0．05），。肾小球wT-1阳性细胞数增加（P〈0．05）。（2）PAN刺激可致足细胞数量减少，作用呈时间依赖性（均P〈0．05）；pCPT可减轻PAN诱导的足细胞数量减少（P〈0．05）；PKA信号抑制剂H89有阻断pCPT的作用，并呈剂量依赖性（均P〈0．05）。（3）对照组，PAN组和pCPT＋PAN组绿色荧光细胞数所占比率分别是（12．67±2．15）％，（31．35±4．60）％和（16．96＋2．51）％，P〈0．05。H89预处理有阻断pCPT的作用（P〈0．05）。（4）PAN刺激足细胞凋亡细胞数和cleavedcaspase3表达水平较对照组显著升高（均P〈0．05），pCPT预处理后足细胞凋亡细胞数和cleavedcaspase3表达水平较PAN组显著下降（均P〈0．05）。结论激活cAMP信号可减轻ADR肾病小鼠足细胞损伤及PAN诱导的足细胞凋亡，cAMP／PKA�
- 魏凯李肖瑛倪兆慧陶花顾乐怡
- 关键词：足细胞凋亡环磷酸腺苷蛋白激酶A
- cAMP通过激活PKA促进线粒体融合防止足细胞凋亡
- 的体外研究显示激活足细胞代谢型谷氨酸受体1/5后,可以通过环磷酸腺苷(cAMP)信号依赖的方式防止氨基核苷嘌呤霉素(PAN)诱导的足细胞凋亡.cAMP作为细胞内最重要的第二信使分子之一,主要通过下游的蛋白激酶A(PKA)...
- 李肖瑛陶花魏凯倪兆慧严玉澄谢可炜顾乐怡
- 关键词：足细胞凋亡环磷酸腺苷蛋白激酶A线粒体
- 白藜芦醇通过Sirtuin1激活足细胞Notch1信号被引量：1
- 2015年
- 目的探索白藜芦醇是否影响足细胞中的Notch1信号通路及其可能的机制。方法分别使用RNA干扰（RNAi）技术和盐酸多西环素（doxycycline，Dox）诱导野生型（WT）和可诱导的Sirtuin1（SIRT1）短发夹RNA（shRNA）转基因（CAGGS）足细胞SIRT1表达下降，重组小鼠Notch信号的Delta配体4（Delta—like ligand4，DLL4）诱导激活Notch1通路。实时荧光定量PCR法检测SIRT1、Notch1通路关键γ分泌酶mRNA及Notch1靶基因Hesl、Hey2的表达。Western印迹法检测足细胞内Notch1胞内段结构域（intracellular domain of Notch1，ICD1）、SIRT1、解聚素金属蛋白酶（ADAM）10以及γ分泌酶复合物Presenilin1和Nicastrin的表达。结果白藜芦醇剂量依赖地诱导野生型小鼠足细胞Notch1信号胞内段ICDl表达以及下游产物Hesl和Hey2 mRNA表达增高。白藜芦醇可诱导Notch1蛋白水解酶1分泌酶组分Nicastrin的mRNA和蛋白表达上升以及ADAM10蛋白的表达下降（P〈0．05），而这些变化在使用SIRTIRNAi后均被减弱（P〈0．05）。重组小鼠DLL4可以增加Notch1通路靶基因Hes1和Hey2的mRNA水平，同时增加细胞核内ICD1的表达，盐酸多西环素孵育CAGGS足细胞显著降低SIRT1mRNA水平（P〈0．05），48h后SIRT1蛋白表达明显下降（P〈0．05），并且显著减弱DLIA的作用（P〈0．05）。结论白藜芦醇可以通过高表达分泌酶Nicastrin诱导足细胞中Notch1信号活化，SIRT1介导了白藜芦醇和DLL4诱导Notch1信号活化的作用。
- 谢可炜魏凯顾明颖向芃顾乐怡
- 关键词：足细胞受体NOTCHLSIRTUINΓ-分泌酶
- 细胞自噬及其在肾脏疾病中的作用被引量：3
- 2012年
- 自噬（autophagy）是保持细胞内物质合成与分解代谢平衡,维持细胞器更新的重要生物学过程.近十年来随着自噬相关基因和相关标志蛋白的发现以及检测手段的进步,自噬的研究不断取得新的突破.细胞自噬不仅在细胞分化、生长、发育、老化等生理过程中有重要作用,在应激和疾病中,如内质网（ER）应激、氧化应激和自由氧离子（ROS）产生、神经元退行性疾病、微生物感染、肿瘤、肾病中同样起了重要作用.
- 魏凯顾乐怡
- 关键词：细胞自噬肾脏疾病生物学过程退行性疾病微生物感染代谢平衡
- 白芦藜醇通过Sirtuin1激活足细胞Notch1信号
- <正>目的:探索白芦藜醇是否影响足细胞中的Notch 1信号通路及其可能的机制。方法:我们使用野生型(wide type,WT)和CAGGS-col/TGM-SIRT1 sh RNA(以下简称为CAGGS)小鼠足细胞系,...
- 魏凯
- 文献传递
- 激活足细胞环腺苷酸信号调节细胞磷酸化ERM和CLIC5的表达被引量：1
- 2014年
- 目的研究足细胞内环腺苷酸(c AMP)信号对足细胞标志蛋白Podocalyxin、细胞内氯离子通道蛋白5(CLIC5)及相关的埃兹蛋白-根蛋白-膜突蛋白(ERM)表达的影响。方法构建阿霉素(ADR)肾病小鼠模型,部分小鼠使用腺苷酸环化酶激活剂Forskolin治疗(ADR组和ADR+Forskolin组)。考马斯亮蓝染色法测定尿液中蛋白质含量;电子显微镜观察足突宽度;免疫荧光染色和Western blotting检测足细胞中磷酸化ERM(P-ERM)、CLIC5和Podocalyxin的表达。结果与ADR组比较,ADR+Forskolin组小鼠尿白蛋白含量明显减少,足突增宽显著改善(P<0.05)。Western blotting和免疫荧光染色结果显示:与ADR组比较,ADR+Forskolin组小鼠足细胞内P-ERM、Podocalyxin和CLIC5蛋白表达及共定位均显著增加。Western blotting检测结果显示:体外以嘌呤霉素氨基核苷(PAN)孵育足细胞72 h,可使P-ERM和CLIC5的表达显著减少(P<0.01);Epac信号激动剂2Me-c AMP预处理可防止PAN诱导的足细胞P-ERM低表达,而PKA信号激动剂p CPT-c AMP预处理可防止PAN诱导的CLIC5表达减少。结论 Forskolin可减轻ADR肾炎小鼠的白蛋白尿,改善足突融合,缓解Podocalyxin/CLIC5/ERM蛋白复合体低表达。c AMP分别通过PKA和Epac信号通路防止PAN诱导的CLIC5和P-ERM表达降低。
- 陈晓欢阿依加肯·卡司木马力陶花李肖瑛魏凯顾乐怡
- 关键词：蛋白尿足细胞环腺苷酸细胞骨架
- PKA激动剂防止嘌呤霉素诱导的足细胞细胞骨架的损伤及ERM磷酸化
- 本试验为确定cAMP信号是否防止足细胞损伤，并研究cAMP的下游分子机制，了解激活cAMP/PKA以及cAMP/Epac信号后是否影响嘌呤霉素诱导足细胞的细胞骨架重排，并观察这些信号对Ezrin,radixin和moes...
- 陶花李肖瑛倪兆慧严玉澄魏凯顾乐怡
- 关键词：嘌呤霉素足细胞损伤蛋白磷酸化
- 初始保守治疗的特发性膜性肾病患者的临床调查和短期蛋白尿预后分析被引量：9
- 2015年
- 目的：了解特发性膜性肾病（idiopathic membranous nephropathy,IMN）初始保守治疗的患者临床和病理特点,并观察12个月蛋白尿的变化及其相关危险因素。方法：我们回顾分析了2004年5月~2012年9月在我院诊断为IMN并完成至少12个月随访的患者的临床和病理资料。所有患者分为初始免疫抑制治疗组（IIT组）和初始保守治疗组（CT组）。其中CT组患者中,随访期间维持保守治疗者分为A组,加用免疫抑制治疗者为B组。结果：共139例IMN患者完成了12个月随访,其中CT组的患者56例（40.29%）。和IIT组患者比较,CT组患者年龄和血浆白蛋白较高,24 h尿蛋白定量和血胆固醇水平更低,P值均〈0.001。病理中肾小球C3沉积的水平更少,毛细血管袢和系膜细胞及基质增生程度较轻,肾小管间质病变程度更轻。随访12个月时两组患者的24 h尿蛋白分别是（2.07±2.88）vs（1.95±2.40）,P〉0.05。在56例初始保守治疗的患者中,37例在随访12个月内维持保守治疗（A组）,19例在随访至第2~9月时开始免疫抑制治疗（B组）。我们发现A组患者发病初期24 h尿蛋白水平,血总胆固醇水平更低,e GFR和白蛋白水平更高。病理中A组患者毛细血管袢增生程度更轻。随访12个月时,A组和B组患者的疾病完全和部分缓解率差异无统计学意义。多因素Logistic回归分析提示血胆固醇水平是初始保守治疗的膜性肾病患者12个月疾病是否缓解的独立危险因素。结论：对低危的IMN患者初始使用保守治疗,短期（12个月）不会导致蛋白尿加重。在初始保守治疗的患者中,血浆胆固醇水平是疾病12个月缓解的危险因素。
- 顾明颖向芃魏凯谢可炜倪兆慧顾乐怡
- 关键词：特发性膜性肾病蛋白尿免疫抑制治疗预后
