俞晓岚
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
- 供职机构：福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省卫生厅医学创新课题福建省教育厅资助项目福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 线粒体膜ATP敏感钾通道预处理保护缺血再灌注心脏的实验研究
- 目的:在麻醉家兔心肌缺血-再灌注(IR)模型上,观察IR和线粒体膜ATP敏感钾通道(mitK<,ATP>)开放剂二氮嗪预处理早期及延迟相对血流动力学、心电生理、心肌梗塞范围、心肌酶学、心肌超微结构及心肌细胞凋亡的影响.初...
- 俞晓岚
- 关键词：药物预适应心肌梗塞心肌超微结构有效不应期
- 文献传递
- 慢病毒介导新型Tet-On系统调控大鼠GDNF和TH双基因表达对帕金森病大鼠的实验研究被引量：5
- 2015年
- 目的观察改良Tet-On系统修饰慢病毒(Lv-TH-GDNF)目的基因的表达调控及纹状体内直接转移对帕金森病(PD)大鼠的作用。方法 1用Lv-TH-GDNF与rt TA2s-M2病毒感染He La细胞,免疫印迹法检测强力霉素(Dox)对TH、GDNF基因表达的调控。2用Lv-TH-GDNF与rt TA2sM2病毒共同注射到PD大鼠患侧纹状体,Dox诱导目的基因表达。通过观察阿扑吗啡(APO)诱导旋转行为、黑质多巴胺能神经元数量、患侧纹状体DA、DOPAC含量评估Lv-THGDNF治疗效应;通过移植侧纹状体内TH与GDNF蛋白量评估外源基因在体内的表达。结果 1在体外He La细胞实验,仅Dox阳性组见TH、GDNF蛋白条带。2在动物体内实验,病毒移植4周后,与PBS对照组相比,仅病毒+Dox组大鼠旋转行为明显改善(P<0.01),损伤侧黑质致密部TH阳性细胞数、纹状体DA、DOPAC含量及TH和GDNF蛋白量明显增高(P<0.01)。结论新型Tet-On系统修饰的Lv-THGDNF目的基因表达受四环素类抗生素调控,在体外实验未见基础活动,且纹状体内直接转移对PD大鼠有一定治疗作用。
- 张阳张志坚俞晓岚陈东平吴秀丽王志红陈祖盛陈秋红
- 关键词：TH基因GDNF基因帕金森病慢病毒
- 转基因干细胞技术治疗脑梗死实验研究
- 张志坚张彦定俞晓岚周海涛陈柏龄陈东平王伟黄东煜黄志新
- 项目属神经病学领域。来源于卫生部科学研究基金、福建省卫生教育联合攻关计划资助项目（WKJ2005-2-011）“利用转基因干细胞技术预防与治疗脑梗塞的研究”。项目内容包括三个方面。干细胞转治疗基因技术提高脑梗死后神经功能...
- 关键词：
- 关键词：脑梗死骨髓间充质干细胞基因工程
- 慢病毒介导的新型Tet-On系统大鼠GDNF和TH双基因脑内转移对帕金森病大鼠模型的保护作用被引量：3
- 2011年
- 目的探讨慢病毒介导的新型Tet-On系统大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因和酪氨酸羟化酶(TH)双基因直接转移对帕金森病(PD)大鼠的保护作用。方法将携带TH、GDNF基因并含启动子为Palb的四环素应答元件的慢病毒(Lv-TH-GDNF)和四环素反式作用子rtTA2s-M2病毒共同注射到SD大鼠左侧纹状体,用强力霉素(DOX)诱导大鼠目的基因GDNF和TH的表达。1周后在大鼠的同侧纹状体注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)损毁纹状体的DA能神经元。通过旋转行为、黑质TH免疫组化染色以及高效液相色谱-电化学方法(HPLC-ECD)检测纹状体DA含量评估其保护效应;通过RT-PCR、免疫印迹观察Lv-TH-GDNF在脑内的表达。实验与健康对照组、磷酸缓冲液(PBS)对照组进行比较。结果在6-OHDA损伤后4周,Lv-TH-GDNF+rt-TA2s-M2+DOX组大鼠阿扑吗啡诱发的旋转效应均明显低于PBS对照组(P<0.01),损毁侧的的黑质区TH阳性细胞表达强度、纹状体DA含量均明显高于PBS对照组(P<0.01),但二者均低于健康对照组(P<0.01)。RT-PCR、免疫印迹结果显示,与PBS对照组比较,Lv-TH-GDNF+rtTA2s-M2+DOX组大鼠纹状体TH、GDNF基因的表达明显增高(P<0.01)。结论慢病毒介导的新型Tet-On系统大鼠GDNF和TH双基因脑内直接转移,在强力霉素诱导下可减缓6-OHDA诱发的大鼠DA能神经元进行性变性,具有保护作用。
- 张阳张志坚俞晓岚黄志新吴秀丽
- 关键词：胶质细胞源性神经营养因子酪氨酸羟化酶慢病毒帕金森病
- 共表达EGFP和CXCR4的大鼠骨髓间充质干细胞的构建及其迁移能力被引量：1
- 2010年
- 目的构建携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)及CXCR4慢病毒载体,并实现其在大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)中的表达,观察转CXCR4基因后对rMSCs迁移能力的影响。方法 RT-PCR扩增大鼠CXCR4编码区片段,将其插入慢病毒载体质粒PNL-IRES2-EGFP,获得的PNL-CXCR4-IRES2-EGFP与包装及包膜质粒用脂质体法共转染293T细胞,包装生产慢病毒。所获慢病毒转染rMSCs后,用RT-PCR、Western blot、细胞免疫荧光组织化学和流式细胞术检测转CXCR4基因rMSCs组、转空载体rMSCs组中CXCR4表达情况。利用Transwell方法检测两组rMSCs在SDF-1作用下的迁移能力。结果双酶切和测序证实,PNL-CXCR4-IRES2-EGFP构建正确,转CXCR4基因rMSCs组CXCR4表达明显增多,在SDF-1α作用下迁移能力明显增强。结论成功构建带有EGFP和大鼠CXCR4的慢病毒载体,并获得CXCR4-rMSCs基因工程细胞,为深入研究SDF/CXCR4轴在rMSCs向损伤组织定向迁移中的作用奠定了基础。
- 俞晓岚张志坚吴秀丽黄志新
- 关键词：CXCR4EGFP慢病毒骨髓间充质干细胞
- ATP敏感钾通道与心肌缺血预适应被引量：1
- 2003年
- 俞晓岚吴黎明
- 关键词：心肌缺血预适应ATP敏感钾通道分子生物学
- 过表达CXCR4的骨髓间质干细胞移植治疗大鼠脑梗死的疗效观察
- 脑梗死是中老年人致残的主要疾病之一,目前对脑梗死的治疗尚缺乏理想的方法。在脑缺血损伤模型中,通过动、静脉注射的骨髓间质干细胞/(MSCs/)都能够迁移、聚集到损伤部位表明局部缺血微环境可能表达某些信号以促使循环中的MSC...
- 俞晓岚
- 关键词：CXCR4SDF-1骨髓间质干细胞大脑中动脉阻塞
- 文献传递网络资源链接
- 过表达Nanog基因的小鼠骨髓间质干细胞对NF-κB表达的影响被引量：2
- 2010年
- 核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的激活被认为与中枢神经系统变性疾病的进展有关。新近报告Nanog能抑制NF-κB的表达,为验证这一发现,通过限制性内切酶酶切和基因重组的方法,构建携带Nanog基因的重组慢病毒表达载体质粒pNL-Nanog-IRES2-EGFP,经PCR检测以及测序鉴定后,在脂质体介导下与包装质粒HELPER、包膜质粒VSVG共转染293T细胞包装生产慢病毒。所获慢病毒感染小鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs)后,Western blotting法检测在mMSCs中Nanog基因的表达,PCR、Western blotting和免疫细胞化学法检测NF-κB基因的表达。结果显示所克隆的Nanog基因测序结果与GenBank报道序列完全一致。构建的慢病毒载体质粒PNL-Nanog-IRES2-EGFP经SalI和BamHI双酶切后电泳鉴定正确。所获慢病毒感染mMSCs后荧光激发mMSCs可见绿色荧光,Western blotting检测显示Nanog-mMSCs组表达Nanog,其他两组基本不表达。RT-PCR和Western blotting检测显示Nanog-mMSCs组的NF-κB表达较空载体-mMSCs组及mMSCs组低,差异有显著性意义。构建携带Nanog基因慢病毒载体并在小鼠骨髓间质干细胞中成功表达,Nanog基因的表达可抑制NF-κB表达,这结果为神经变性疾病的治疗提供了新思路。
- 黄志新张志坚张阳俞晓岚吴秀丽
- 关键词：NANOGNF-ΚB慢病毒载体
